【生物一生物技术实践】

尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

   （1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_____（能／不能），原因是__________________________________。

   （2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用     法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________________就能大约推测出样品中活菌数。

   （3）初步分离脲酶通常用       法，如下图，试管中收集到的液体最先出现的是___________。鉴定分离出的脲酶纯化程度，一般采用_______法。

   （4）该同学设想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素"，尿素肥效一定更高。为了提高“加酶尿素"中脲酶的利用率，应当采用          技术。

（8分）【生物一生物技术实践】

尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

   （1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_____（能／不能），原因是__________________________________。

   （2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用     法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________________就能大约推测出样品中活菌数。

   （3）初步分离脲酶通常用       法，如下图，试管中收集到的液体最先出现的是___________。鉴定分离出的脲酶纯化程度，一般采用_______法。

   （4）该同学设想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素"，尿素肥效一定更高。为了提高“加酶尿素"中脲酶的利用率，应当采用          技术。

利用玉米秸秆生产乙醇,其技术流程为：

(1)    玉米秸杆经预处理后，应该选用纤维素酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。 纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中 纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养—梯度稀释→鉴别培养。

①从土壤中分离出分解纤维素细菌的培养基配方如下：纤维素粉5g, NaNO3 1g、 Na2HPO4 • 7HZ0 1.2g、KH2PO4 0.9 g,MgS04·7H20  0.5g、K Cl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸馏水定容到IOOOmU9该培养基能初步选择出分解纤维素细菌的原因是______________

②为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入_______染液，将筛选获得的菌液稀释后用涂布平板法方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生_______的菌落作为菌种进行扩大培养。

③从分解纤维素细菌中提取出的纤维素酶首先要检测____________________________，以便更好地将酶用于生产实践。为了使分离出的纤维素酶能够反复使用，最好采用_____________________或_____________________方法将酶固定化。

(2)    发酵阶段需要的菌种是酵母菌，在产生酒精时要控制的必要条件是______________。

(3)    发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性,从而影响进一步的发酵。科学家利用基 因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种，该过程需采用PCR 技术扩增目的基因。在PCR反应体系中，除了要加入模板、原料外，还需要加入_______和_______等

尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_____（能／不能），原因是__________________________________。

（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用     法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________________就能大约推测出样品中活菌数。

（3）初步分离脲酶通常用    法，如下图，试管中收集到的液体最先出现的是_______。鉴定分离出的脲酶纯化程度，一般采用_______法。

（4）该同学设想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素”，尿素肥效一定更高。为了提高“加酶尿素"中脲酶的利用率，应当采用          技术。

（08广东六校第三次联考）（15分）下列是有关酶的应用以及微生物的培养与应用等问题，请分析回答。

A、工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出果汁率，为研究温度对果胶酶活性的影响。某学生设计了如下实验：

①将果胶酶与苹果泥分装于不同试管，在10℃水浴中恒温处理10分钟（如图A）

②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10℃水浴中恒温处理10分钟（如图B）。

③将步骤②处理后的混合物过滤，收集滤液，测量果汁量（如图C）。

④在不同温度条件下重复以上实验步骤，并记录果汁量，结果如下表：

根据上述实验，请分析回答下列问题：

（1）果胶酶能破除细胞壁，是因为果胶酶可以促进细胞壁中果胶的水解，产物是      ___。

（2）实验结果表明，当温度为___________附近时，果汁量最多，此时果胶酶的活性_________。

（3）为什么该实验能够通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高低？

                                                                    _。

（4）果胶酶作用于一定量的某种物质（底物），保持温度、pH在最适值，生成物量与反应时间的关系如右图：在35分钟后曲线变成水平是因为                 。

若增加果胶酶浓度，其他条件不变，请在答题卷原图上画出生成物量变化的示意曲线。

B、在农业生产研究上，常需要进行微生物的培养和计数。

（1）右图是利用         法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步          分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：（至少答2项）        __。

（2）分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述           ­­­__ 成分，并加入葡萄糖和          物质。

（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下统计结果：

甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；

乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；

丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；

在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确？                  。