研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究，肺部细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图所示，据图回答

1.在基因工程中通常选择细菌质粒作为载体，原因是                          ；如果某质粒由100 0个脱氧核苷酸组成，脱氧核苷酸平均分子量为a,则该质粒的质量为        。

2.图甲中在构建重组载体时，酶切目的基因和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端必须是                。

3.图甲中在将酶切后的目的基因导入到酶切后的质粒上时需要的酶是              ， 图乙中let-7基因转录过程需要的酶是    ，这 两种酶作用的化学键都是          。

4.EcoR I限制酶只能识别序列一GAATTC一，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoR I的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。                      

5.原代培养是是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。原代培养随着培养时间的延长和细胞不断分裂，空间因素和营养因素会限制其进一步生长。此时就需要将培养物分割成小的部分（组织细胞分散开），重新接种到另外的培养器皿内再进行培养，这个过程就称为传代或者再培养。图甲中进行传代培养操作时，需要用　　 　　酶处理贴附在原代培养培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

6.研究发现，let-7基因能影响RAS基因的表达，其影响机理如图乙所示。从分子水平的角度分析，其作用机理是　　                               　    　。

7.下图所示pBR322是目前常用的人工质粒载体。如果将BamHI处理后的pBR322质粒与用BgIⅡ处理得到的目的基因进行重组，并将重组质粒导入原本无amp^R和tet^R  的大肠杆菌进行培养。为了检测重组质粒是否成功导入大肠杆菌，现将上述大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是___       _____ ，图三结果显示，多数大肠杆菌内导入的是___            __。

在调查某湖水中H细菌指数（1升水中含有的H细菌菌落数）的实验中，先将5升湖水水样浓缩至5毫升，然后各取浓缩水样1毫升，分别涂布到5个培养皿中培养，培养后统计的H细菌菌落数分别是42、38、55、18、12。实验引发出一系列的问题，请回答：

       （1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了                   。

       （2）配制好的培养基用            法灭菌，并在              条件下接种。

       （3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于             中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种          作为对照进行实验。

       （4）细菌培养产生的单个菌落在生态学中称为                。根据上述结果计算，被检水样的H细菌指数为                     。

       （5）在培养H细菌的过程中发现了另一种X细菌，并进行了如下图所示的实验：

           从生态学的角度分析，H细菌与X细菌之间的关系是                 。X细菌周围H

细菌不能生长和繁殖的原因最可能是                           。

       （6）干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，科学家用基因工程的方法生产干扰素时，用H菌作为              ，常用的转化方法是，先用                 处理细胞，使其处于感受态，然后将其与                     在缓冲液中混合，最后通过         的表达，检测干扰素基因是否成功导入。

       （7）若X细菌感染特定人群，则X细菌对感染者来说属于免疫学中的____物质，如果X细菌侵入人体细胞内，则彻底消灭这些细菌所涉及的免疫有                 。

在调查某湖水中H细菌指数（1升水中含有的H细菌菌落数）的实验中，先将5升湖水水样浓缩至5毫升，然后各取浓缩水样1毫升，分别涂布到5个培养皿中培养，培养后统计的H细菌菌落数分别是42、38、55、18、12。实验引发出一系列的问题，请回答：
（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了                  。
（2）配制好的培养基用           法灭菌，并在             条件下接种。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于            中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种         作为对照进行实验。
（4）细菌培养产生的单个菌落在生态学中称为               。根据上述结果计算，被检水样的H细菌指数为                    。
（5）在培养H细菌的过程中发现了另一种X细菌，并进行了如下图所示的实验：

从生态学的角度分析，H细菌与X细菌之间的关系是                。X细菌周围H
细菌不能生长和繁殖的原因最可能是                          。
（6）干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，科学家用基因工程的方法生产干扰素时，用H菌作为             ，常用的转化方法是，先用                处理细胞，使其处于感受态，然后将其与                    在缓冲液中混合，最后通过        的表达，检测干扰素基因是否成功导入。
（7）若X细菌感染特定人群，则X细菌对感染者来说属于免疫学中的____物质，如果X细菌侵入人体细胞内，则彻底消灭这些细菌所涉及的免疫有                。