（17分）基因工程又叫基因拼接技术。
（1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的      为模板，  　  成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。
（2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、 　　　　 。
（3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 　　　　 和  　　　 。
（4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。
（5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。
（6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生    个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是          个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：
①                                                                 。
②                                                                 。
（7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有     ，      以
及            。
（8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行            杂交，若有          出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

（17分）基因工程又叫基因拼接技术。

（1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的       为模板，   　   成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

（2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、  　　　　  。

（3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：  　　　　 和   　　　 。

（4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。

（5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。

（6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生     个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是           个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：

①                                                                  。

②                                                                  。

（7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有      ，       以

及             。[来源:学#科#网Z#X#X#K]

（8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行             杂交，若有           出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

基因工程又叫基因拼接技术。

（1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的       为模板，   　   成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

（2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、  　　　　  。

（3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：  　　　　 和   　　　 。

（4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。

（5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。

（6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生     个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是           个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：

①                                                                  。

②                                                                  。

（7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有      ，       以

及             。

（8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行             杂交，若有           出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

请回答基因工程方面的有关问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。 图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为  。
②在第   轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。

①第1组：引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效； ②第2组：         。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为                       。

(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

（10分）请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。 图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A，不含有引物B的DNA片段所占的比例为______。
②至少完成_____轮循环，才能获得两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的一组引物（只标注了部分碱基序列）是不符合要求的（如下图），请说明理由____________________________________________。

(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的 功能，这是因为________________________________________。

(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。