39. 【生物—生物技术实践】（本题共15分）

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图22 回答：

    图22

（1）（每空2分）提取目的基因

  ①若已获取PG的mRNA，可通过                 获取PG基因。

②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有         结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是                                。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有           的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入                       。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞                   现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与                         互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄        ，则可确定转基因番茄成功。

（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用      方法使子代保持转基因的优良性状。（2分）

随着生物科学技术的发展，动物、植物乃至人类自身的生殖方式变得越来越多样化。既解决了一些社会的需求，也带来了一些社会的忧虑。请根据下列各种情况，回答有关问题：

（1）试管婴儿技术：解决了部分夫妻不育的难题或生育健康后代的要求。这种技术和母亲正常怀孕生产过程的相同之处是都是以____________________为发育起点，不同之处在于试管婴儿是在体外进行受精后，在试管中进行胚胎培养；最后选取健康的胚胎进行_______，保证生出健康的孩子。

（2）胚胎分割技术：可解决良种动物快速大量繁殖的问题；对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意____________________________，否则将影响分割后的胚胎的恢复和进一步发育，如需做性别鉴定，还需从__________细胞取样做DNA分析。

（3）植物体细胞杂交技术：可以用来培育一些种间亲缘关系较近的杂交种，如白菜-甘蓝，实质上是利用了            和____________ 两大关键技术来实现。

（4）利用基因工程培育转基因植物：如将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞中，可培育转基因高赖氨酸玉米。选用的表达载体可以是农杆菌的Ti质粒，是因为该质粒的T-DNA_________________；除农杆菌转化法外，还有                 法等。

[现代生物科技]长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近几年发展起来的细胞工程技术和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。下面是科学家快速繁殖良种奶牛的两种方法，请据图回答：
  
（1）克隆牛G的培育过程与试管牛E的培育过程相比特有的技术手段是             技术，这两种繁殖动物的方式相比，实质性的区别为前者是            ，后者是           。
（2）进行胚胎工程操作时，首先对供、受体母牛进行选择，并用激素进行           处理。一般还需用              激素对供体母牛做超数排卵处理。
（3）受精卵体外培养所需的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及          等物质。
（4）科学家将外源基因插入上图的受精卵中，常用的方法是                。在检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因时，常采用的方法是            技术，根据是否显示出杂交带进行鉴定。由于外源基因可能随机插入到受精卵的DNA中，因而有的可发育成转基因牛，有的却死亡，请分析因外源基因的插入而导致早期胚胎死亡的最可能原因是                            。
（5）良种母牛B的胚胎能在受体母牛D的子宫内存活的生理原因是什么？
（6）培育出的克隆牛G的基因来源于                                         。
（7）为大量获得试管牛E，可于                时期将早期胚胎进行分割后移植。

（13分）随着生物科学技术的发展，动物、植物乃至人类自身的生殖方式变得越来越多样化。既解决了一些社会的需求，也带来了一些社会的忧虑。请根据下列各种情况，回答有关问题：
（1）试管婴儿技术：试管婴儿技术解决了部分夫妻不育的难题或生育健康后代的要求。它和母亲正常怀孕生产过程的相同之处是都是以_________________为发育起点，不同之处在于试管婴儿是在体外进行受精后，在试管中进行胚胎培养；如果需要设计试管婴儿，还可以对胚胎进行__________，最后选取健康的胚胎进行                     ，保证生出健康的孩子。
（2）胚胎分割技术：胚胎分割技术可解决良种动物______________的问题，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意____________________________，否则将影响分割后的胚胎的恢复和进一步发育；如需做性别鉴定，还需从__________细胞取样做DNA分析。
（3）动物克隆技术：目前动物的克隆主要采用__________________技术来实现，我国禁止生殖性克隆，但不反对________________的研究。
（4）植物体细胞杂交技术：该技术可以用来培育一些种间亲缘关系较近的杂交种，如白菜-甘蓝实质上是利用了____________和_____________两大关键技术来实现。
（5）基因工程技术：
①利用基因工程技术可培育转基因植物，如将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞中，可培育赖氨酸含量较高的转基因玉米，该技术选用的表达载体可以是农杆菌的Ti质粒，因为该质粒的T-DNA                                  ；（2分）
②利用基因工程技术可培育转基因动物，如转入生长激素基因的鱼生长速度快，营养转化率高，但鱼类易于逃逸和扩散，可能引起生态安全问题，原因是___________________________________________________________。多倍体鱼类对控制过度繁殖是有效的，故可采用培育           鱼作为对策。