［生物―――选修１ 生物技术实践］（15分）
尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如右图所示。请分析回答问题：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4.7H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
琼脂	15g
将上述物质溶解后,用自来水定容到1000mL

(1)此培养基能否用于植物组织培养？______________，理由是    ________。
(2)培养基中加入尿素的目的是______________，这种培养基属于 __________培养基。
(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的____________和________，实验需要振荡培养，原因是______________________。
(4)转为固体培养时，常采用______________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。
(5)下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手。
需要灭菌的是：______________；需要消毒的是：______________。（填序号）
(6)在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有（  ）（填序号）
①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照
(7)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入____________，细菌合成的____________将尿素分解为氨，PH增高，使指示剂变红色。

［选修一:生物技术实践专题］（15分）

尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答：?

KH2PO4	1.4 g
Na2HPO4	2.1 g
MgSO4·7H2O	0.2 g
葡萄糖	10 g
尿素	1 g
琼脂	15 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100 mL

（1）此培养基能否用于植物组织培养？       ，理由是                         。

（2）培养基中加入尿素的目的是筛选           ，这种培养基属于          培养基。

（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的        和         ，实验需要振荡培养，原因是                   。?

（4）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用     的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（5）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是       ，需要消毒的是       （填序号）。①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管 ③实验操作者的双手

（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有      （填序号）。

①土样不同  ②培养基污染  ③操作失误  ④没有设置对照?

（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行               处理后，才能倒掉。

 

为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请分析回答问题：

 

（1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：___________________。

（2）培养基中加入尿素的目的是筛选 _______________________，这种培养基属于____________培养基。

（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的___________和___________，实验中需要振荡培养，原因是_______________________。

（4）转为固体培养基时，常采用______________________接种，获得单菌落后继续筛选。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行_______________________处理后，才能倒掉。

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母的培育过程，请分析回答下列问题。

(1)将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用________将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，瓶中的液体经适当稀释后，用________方法接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落。

(2)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌________。从存活的酵母菌提取DNA，并用PCR技术大量扩增目的基因。

(3)将目的基因连接到一种穿梭质粒(可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母中表达的质粒)上。该质粒具有两种标记基因，即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后，应接种于含________的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时，由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖，应选择缺乏________能力的酿酒酵母作为受体菌。从细胞结构看，酵母菌不同于大肠杆菌的主要特点是________。

(4)对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试，结果如图所示：

据图分析，将转基因酿酒酵母接种在以________为碳源的培养基中进行发酵能力测试，最初培养基中的________糖被快速消耗，随着发酵继续进行，转基因酿酒酵母能够___________________，说明所需菌株培育成功。

 

尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如右图所示。请分析回答问题：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4.7H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
琼脂	15g
将上述物质溶解后,用自来水定容到1000mL

(1)此培养基能否用于植物组织培养？______________，理由是______________。

(2)培养基中加入尿素的目的是______________，这种培养基属于__________培养基。

(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的____________和________，实验需要振荡培养，原因是______________________。

(4)转为固体培养时，常采用______________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

(5)下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手。

需要灭菌的是：______________；需要消毒的是：______________。（填序号）

(6)在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有（   ）（填序号）

①由于土样不同  ②由于培养基污染  ③由于操作失误  ④没有设置对照

(7)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入____________，细菌合成的____________将尿素分解为氨，PH增高，使指示剂变红色。