已知某DNA分子共含有2000个碱基对.其中一条链上A:T:G:C=l:2:3:4.该DNA分子连续复制3次.共需要腺嘌呤脱氧核苷酸分子数是( ) A.6000个 B.9800个 C.4200个 D.1800个 查看更多

 

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已知某DNA分子共含有2000个碱基对,其中一条链上A∶T∶G∶C=l∶2∶3∶4。该DNA分子连续复制3次,共需要腺嘌呤脱氧核苷酸分子数是

A.6000个    B.9800个    C.4200个    D.1800个

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(10分)mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子,具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。现用两种限制性核酸内切酶M和N切割某人的mtDNA(限制酶M和N的识别序列和切割位点如图1所示),然后通过凝胶电泳分离DNA片段(通电状态下,不同分子量的DNA片段在琼脂中的移动距离不同从而被分离),分析后得到下表。

凝胶电泳结果(1kb=1000对碱基)

(数字表示该片段的存在以及数量)

分子量(kb)

酶M

酶N

酶M+酶N

1.0

1

 

1

2.0

 

 

1

 3.0

 

 

1

4.0

 

 

1

5.0

1

 

 

6.0

 

 

1

7.0

 

1

 

9.0

 

1

 

10.0

1

 

 

(1)该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中,M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

(2)M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接,请将连接的结果表示出来:_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割,请简述理由:________________________________________。

(3)图2为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。现用酶切法直接从供体细胞中切割图2中的基因从而获得目的基因,可选用酶______来切割。这个方法虽然操作方便,但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此,目前往往采用逆转录的人工合成的方法,其基本步骤是:__________________。

图2

(4)已知图2中Ⅱ区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G 和C的总数共有400个,则由该区转录的mRNA中A和U总数是_____________。

 

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mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子,具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割某人的mtDNA,通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图所示。

凝胶电泳结果

(1kb=1000对碱基)(+表示该片段的存在以及含量)

分子量(kb)

酶M

酶N

酶M+酶N

1.0

+

 

+

2.0

 

 

+

3.0

 

 

+

4.0

 

 

+

5.0

+

 

 

6.0

 

 

+

7.0

 

+

 

9.0

 

+

 

10.0

+

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

⑴.该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中,M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

⑵.M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接,请将连接的结果表示出来:_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割,并简述理由:_________________________________________________

⑶.有人认为mtDNA能成为研究人类起源与进化的一个有力工具,请简述理由:_________________________________________________________________________ 。

下图为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。

⑷.现用该基因作为目的基因,若采用直接从供体细胞中分离,具体方法是:_____________。这个方法虽操作方便,但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此,目前往往采用逆转录的人工合成的方法,其基本步骤是:__________________________。

⑸.已知Ⅱ区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G和C的总数共有400个,则由该区转录的mRNA中A和U总数是              

 

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为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行讲解,分析片段大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知第一线性

DNA序列共有

5000bp

(bp为碱基对)

第一步水解

产物

(单位bp)

第二步水解

产物

(单位bp)

A酶切割

3500

将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割

1500  2000

1000

1000

500

500

B酶切割

2000

将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割

500   1500

3000

2000  1000

经A酶和B酶同时切割

2000   1500   1000   500

(1)该实验中体现出限制酶的作用特点是                             

(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为      个和    个。

(3)根据表中数据,请在下图中用箭头标出相应限制酶的酶切位点。

(4)已知BamH I与BglⅡ的识别序列及切割位点如图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH I和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干次循环后       序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化      键的形成。

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