右图为用于基因工程的一个质粒示意图。用EcoRⅠ限制酶切割目的基因和该质粒，再用DNA连接酶连接形成重组质粒，然后导入大肠杆菌(不含质粒中的抗性基因)，最后将大肠杆菌放在以下四种培养基中培养，含重组质粒的大肠杆菌能生长的是(多选)

A．无抗生素的培养基 　　　 B．含四环素的培养基

C．含氨苄青霉素的培养基 　D．含四环素和氨苄青霉素的培养基

右图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用运载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达。请回答：

 (1)一个基因表达载体的组成除目的基因外，还必须有             、             和标记基因等。将基因表达载体导入细菌B之前，一般要先用        处理细胞，以增加其细胞壁的通透性。

(2)将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。以上培养基按用途属于             培养基。

(3)上述培养基上聚集的菌种可通过               法或             培养成单菌落，经进一步筛选即可获得导入重组质粒的工程菌。获得纯培养物的关键是无菌操作，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是                  。

(4)在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种        、四种脱氧核苷酸和          的 DNA聚合酶。

右图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用运载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达。请回答：

(1)一个基因表达载体的组成除目的基因外，还必须有            、            和标记基因等。将基因表达载体导入细菌B之前，一般要先用       处理细胞，以增加其细胞壁的通透性。
(2)将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。以上培养基按用途属于            培养基。
(3)上述培养基上聚集的菌种可通过              法或            培养成单菌落，经进一步筛选即可获得导入重组质粒的工程菌。获得纯培养物的关键是无菌操作，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是                 。
(4)在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种       、四种脱氧核苷酸和         的 DNA聚合酶。

右图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用运载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达。请回答：

 (1)一个基因表达载体的组成除目的基因外，还必须有             、             和标记基因等。将基因表达载体导入细菌B之前，一般要先用        处理细胞，以增加其细胞壁的通透性。

(2)将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。以上培养基按用途属于             培养基。

(3)上述培养基上聚集的菌种可通过               法或             培养成单菌落，经进一步筛选即可获得导入重组质粒的工程菌。获得纯培养物的关键是无菌操作，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是                  。

(4)在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种        、四种脱氧核苷酸和          的 DNA聚合酶。

回答下列关于基因工程的问题。
草甘膦是一种广谱除草剂，其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡。但是，它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前，已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因，若将该基因转入植物细胞内，从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。
下图A-F表示6株植物，其中，植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题：
.


（1）若A-C浇清水，D-F浇的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成长的是_________。
（2）若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲，在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。
（3）假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图I所示，则应选择表中酶__________进行酶切；若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图I和II所示，则应选择表中酶__________ 进行酶切。
（4）假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图II所示，请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。（2分）

（5）假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但植物F仍没有表现出抗性，分析可能的原因_______________________________________________________________。
下图甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000对碱基）与大肠杆菌pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）

（6）图乙的培养基中含有氨苄青霉素，请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中，何种会含有重组质粒。___________。
（7）现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观察，若出现长度为_________kb和      kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计）