Ⅰ、（4分）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？
Ⅱ、（6分）甲图是测量种子萌发时锥形瓶中气体体积变化的实验装置。锥形瓶中放的种子事先用水浸泡过并在稀释的消毒剂中清洗过（不影响种子生命力）。实验开始时U形管左侧与右侧液面相平，每隔半小时利用标尺量出右侧管内的液面高度变化，实验结果见乙图。回答下列问题：

（1）种子为什么要在稀释的消毒剂中清洗_______________________________。
（2）此实验的实验目的是___________________________。
（3）分析0～3.5小时内气体体积变化原因___________________。分析3.5小时～4小时内标尺读数没增加最可能的原因______________________。
（4）本实验存在的问题是没有设计对照实验，因此实验数据不能准确反映真实情况。请设置此实验的对照实验_____________________。
⑸由于外界温度、压强的改变导致气体体积改变，在对照实验中气体体积变化在2小时是+0.2个单位，那么同等条件下萌发的种子此时实际呼吸速率是______单位/小时。

Ⅰ、（4分）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？

Ⅱ、（6分） 甲图是测量种子萌发时锥形瓶中气体体积变化的实验装置。锥形瓶中放的种子事先用水浸泡过并在稀释的消毒剂中清洗过（不影响种子生命力）。实验开始时U形管左侧与右侧液面相平，每隔半小时利用标尺量出右侧管内的液面高度变化，实验结果见乙图。回答下列问题：

（1）种子为什么要在稀释的消毒剂中清洗_______________________________。

（2）此实验的实验目的是___________________________。

（3）分析0～3.5小时内气体体积变化原因___________________。分析3.5小时～4小时内标尺读数没增加最可能的原因______________________。

（4）本实验存在的问题是没有设计对照实验，因此实验数据不能准确反映真实情况。请设置此实验的对照实验_____________________。

⑸由于外界温度、压强的改变导致气体体积改变，在对照实验中气体体积变化在2小时是+0.2个单位，那么同等条件下萌发的种子此时实际呼吸速率是______单位/小时。

Ⅰ、（4分）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？

Ⅱ、（6分） 甲图是测量种子萌发时锥形瓶中气体体积变化的实验装置。锥形瓶中放的种子事先用水浸泡过并在稀释的消毒剂中清洗过（不影响种子生命力）。实验开始时U形管左侧与右侧液面相平，每隔半小时利用标尺量出右侧管内的液面高度变化，实验结果见乙图。回答下列问题：

（1）种子为什么要在稀释的消毒剂中清洗_______________________________。

（2）此实验的实验目的是___________________________。

（3）分析0～3.5小时内气体体积变化原因___________________。分析3.5小时～4小时内标尺读数没增加最可能的原因______________________。
（4）本实验存在的问题是没有设计对照实验，因此实验数据不能准确反映真实情况。请设置此实验的对照实验_____________________。

⑸由于外界温度、压强的改变导致气体体积改变，在对照实验中气体体积变化在2小时是+0.2个单位，那么同等条件下萌发的种子此时实际呼吸速率是______单位/小时。

根据模拟制作重组DNA分子的活动，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI酶切后，即可获得所需的目的基因和质粒，回答以下问题：（已知EcoRI酶识别序列为GAATTC，识别位点为G||A）

（1）绿色硬纸板（甲DNA分子）的碱基序列为：      

……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC……     

……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC……

红色硬纸板（乙DNA分子）的碱基序列为：

  ……TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……      

……AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……      

其中，           DNA分子含有“目的基因”，            DNA分子是“质粒”。

（2）用剪刀代表进行切割。酶切位点在         （a处还是b处），此化学键称为              。

（3）请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点。

（4）从基因文库中获取目的基因是常用方法，基因文库实际上就是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的                         的群体。按照其中所含基因的量又可分为               文库和              文库。

（5）基因表达载体的构建是基因工程的关键步骤之一，请根据所给的条件完成下列问题：

     已知有4种限制性核酸内切酶，其中1号和4号切割DNA后产生的是平末端，2和3号酶产生的是黏性末端。含目的基因的DNA片段和质粒的酶切序列如下图所示：

① 请设计酶切方案，构建最佳基因表达载体（重组质粒）                                                                     。

②该重组质粒上有几个复制原点：    ，能用PCR技术扩增吗      （能或不能）

③若用酶2和3切割重组质粒，可以得到几个DNA片段：         。

  若用酶2和1切割重组质粒，可以得到几个DNA片段：         。

关于现代生物技术相关知识的叙述，正确的是                      

1. A.
   限制酶只能识别并作用于特定的DNA分子，体现了酶的专一性
2. B.
   试管苗、试管牛和克隆羊都属于无性生殖且能保持母本性状
3. C.
   用限制酶切割一个DNA分子，获得一个目的基因，同时有两个磷酸二酯键被水解
4. D.
   植物体细胞杂交，能克服远源杂交不亲和的障碍，培育出的新品种一定不是单倍体