（10分）ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：

（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？         。

PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                   。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？                       。

（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                        酶

对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的              键打开。

（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是         ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用            制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入              可将变异株细胞筛选出来。

（8分）1952年“噬菌体小组”的赫尔希和蔡斯研究了噬菌体的蛋白质和DNA在侵染过程中的功能，请回答下列有关问题：

（1）如何获得被³²P和³⁵S标记的噬菌体                                   。

（2）用标记的噬菌体侵染未标记的大肠杆菌。一段时间后，用搅拌器搅拌，然后离心得到上清液和沉淀物。检测上清液中的放射性，得到如图所示的实验结果。

搅拌的目的是                ，所以搅拌时间应至少大于     min，否则上清液中的放射性较低。当搅拌时间足够长时，上清液中的³⁵S和³²P分别占初始标记噬菌体放射性的80%和30%，说明            ；但上清液中³²P的放射性仍达到30%，其原因可能是            。 图中“被侵染细菌”的存活率曲线的意义是作为对照，如果明显低于100%，则上清液放射性物质³²P的含量会       。

（3）³²P标记的某一个噬菌体侵染未标记的大肠杆菌，最后产生100个子代噬菌体。子代噬菌体的DNA含有的P元素为            ，其形成的噬菌体的比例为           。

（10分）ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。
第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。
第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。
第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：
（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？        。
PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是         ，其作用是                               。
（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                  。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？                      。
（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                       酶
对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的             键打开。
（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是        ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。
（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用           制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入             可将变异株细胞筛选出来。

下面介绍的是DNA研究的科学实验：

Ⅰ.1952年，赫尔希和蔡斯利用同位素标记法，完成了著名的噬菌体侵染大肠杆菌的实验，如图是实验的部分过程：

(1)写出以上实验的部分操作过程：

第一步：用³⁵S标记噬菌体的蛋白质外壳。如何实现对噬菌体的标记？请简要说明实验的设计方法。

________________________________________________________________________。

第二步：将被³⁵S标记的噬菌体与没有标记的大肠杆菌混合。

第三步：一定时间后，在搅拌器中搅拌，然后进行离心。

(2)以上实验结果能否证明遗传物质是DNA？为什么？

________________________________________________________________________。

Ⅱ.用紫外线处理大肠杆菌可诱导产生对T₂噬菌体有抗性的大肠杆菌，这种抗性的产生与其细胞膜上的蛋白质发生变化有关。下图简要示意处理的方法：

(1)在紫外线作用下，大肠杆菌的膜蛋白质发生改变的根本原因是________。

(2)如何将图中的T₂噬菌体抗性菌株从混合菌株中筛选出来？

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下面介绍的是DNA研究的科学实验：

Ⅰ.1952年，赫尔希和蔡斯利用同位素标记法，完成了著名的噬菌体侵染大肠杆菌的实验，如图是实验的部分过程：
(1)写出以上实验的部分操作过程：
第一步：用³⁵S标记噬菌体的蛋白质外壳。如何实现对噬菌体的标记？请简要说明实验的设计方法。
________________________________________________________________________。
第二步：将被³⁵S标记的噬菌体与没有标记的大肠杆菌混合。
第三步：一定时间后，在搅拌器中搅拌，然后进行离心。
(2)以上实验结果能否证明遗传物质是DNA？为什么？
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Ⅱ.用紫外线处理大肠杆菌可诱导产生对T₂噬菌体有抗性的大肠杆菌，这种抗性的产生与其细胞膜上的蛋白质发生变化有关。下图简要示意处理的方法：

(1)在紫外线作用下，大肠杆菌的膜蛋白质发生改变的根本原因是________。
(2)如何将图中的T₂噬菌体抗性菌株从混合菌株中筛选出来？
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