利用灭菌技术，将某种细菌接种到培养皿内，以不同的方式处理培养皿并加盖（下图表内阴影部分表示有细菌，白色清晰区表示无细菌）。

（1）描述图表中1和2结果的不同：________________；描述图表中4和5结果的不同：________________。

（2）根据3的结果判断，抗生素P和Q同时用于治疗由这种细菌引起的疾病，疗效如何？为什么？

（3）说明滥用抗生素治疗细菌感染疾病的危害性：________________。

34．（8分）【生物——生物技术实践】

柠檬果实富含维生素C和柠檬酸，果皮油细胞中有具特殊香味的柠檬油，在食品、保健、美容等领域应用广泛。目前发现可通过酵母菌发酵生产柠檬酸。请回答下列问题：

（1）若想从自然界中分离获取酵母菌，需使用           培养基，实验中对培养皿进行灭菌常用         法。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是              ，接种后需将培养皿倒置并放在         中培养。

（3）柠檬油是某些化妆品的优质配料，提取柠檬油常用的方法是          。为了使柠檬油易与水分离，需加入         ，并调节pH到7～8。

（4）利用柠檬花粉进行组织培养时，诱导花粉植株能否成功的主要影响因素是     和      。

Ⅰ. （9分）(除注明外，每空1分)

下表是植物细胞分裂素发现过程中的几个主要历程。请据此作答。   

历程	时间	科学家	科学事实
①	1954年	斯库格等	一定条件下腺嘌呤能促进细胞分裂
②	1955年	米勒等	将存放了4年的鲱鱼精细胞的DNA，加入到烟草髓组织的培养基中，能诱导细胞分裂。
③	1956年	斯库格等	用新提取的鲱鱼精细胞DNA，不能促进细胞分裂；但在pH＜4的条件下进行高压灭菌处理后，却能促进细胞分裂。从处理物中分离出这种活性物质，并命名为“激动素”。
④	1963年	莱撒姆	从未成熟的玉米籽粒中分离出类似于“激动素”的促进细胞分裂的物质，命名为“玉米素”，其生理活性高于“激动素”。

（1）DNA彻底水解的产物是______________。

（2）“激动素”______________（“属于”或“不属于”）植物激素。理由是______________。

（3）从②和③分析，“激动素”可能是______________（物质）。请写出对此加以验证的简要实验思路：将____________________加入烟草髓组织的培养基中，观察结果。(2分)

（4）植物体合成细胞分裂素的主要部位是____________，细胞分裂素与____________（激素）存在拮抗作用。

（5）在植物组织培养中，通过调整细胞分裂素与________________（激素）的比例，可诱导愈伤组织形成完整的植株。

Ⅱ.（9分）请回答下列生物技术方面的问题：

（1）测定亚硝酸盐含量的操作程序是：①配制溶液；②______________；③制备样品处理液；④___________。泡菜发酵过程中产生的亚硝酸盐在盐酸酸化条件下，与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶联成______________色化合物。

（2）固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果 (注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量)。

①酶的固定化技术的应用最主要的目的是_______________________。

②从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是__________________________________________________________________。

③乙图曲线表明浓度为____________的海藻酸钠包埋效果最好。

④研究人员固定小麦酯酶不采用海藻酸钠直接包埋，而是同时用戊二醛作交联剂，这是因为___________________________________________________。

⑤根据介绍，科研人员所采用的固定化技术可用下图中的______ 表示。

     

(3)上右图为某同学利用海藻酸钠固定小麦酯酶的实验结果，出现此结果的可能原因不包括_________

A．海藻酸钠浓度过高            

B．酵母细胞已经死亡

C．注射器中的溶液推进速度过快

D．注射器距离CaCl₂溶液液面太近

某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。

（1）培养基中加入化合物A的目的是______________，这种培养基属于_______培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_________________。实验需要振荡，培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是_________________。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是_________________________。

（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是____，操作时采用____________________________灭菌的方法。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是__________。

（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10^-4、10^-5、10^-6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是_______________________，此对照实验的目的是______________________________。

（7）有同学将“目的菌”破碎并提取得到该菌蛋白质，之后一同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的___________、___________以及分子的形状等。而另一位同学则利用凝胶过滤法分离蛋白质（下图），他在操作中加样的正确顺序是_______。待蛋白质接近色柱底端时，用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是__________。

芽孢杆菌是微生物实验的常用材料之一。请回答下列问题。

（1）利用工程技术生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与芽孢杆菌相同的是_______________。

A．甲流疫苗              B．味精      C．果酒              D．果醋

（2）研究芽孢杆菌的群体生长规律时，出现不止一种细胞形态的时期是__________。

（3）研究某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

①采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过高压蒸汽灭菌 法灭菌处理的__________（填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。

②接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行__________处理。之后，将菌液涂布接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计__________。

③结果与结论：将适量的碘液滴加在菌落周围，如果菌落周围出现透明圈，则说明______________________________。

（4）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入＿＿＿＿。

（5）在谷氨酸发酵生产过程中，需要添加氨水，它不仅为细菌生长提供所需的       ，而且起到调节培养液                  的作用。如果谷氨酸发酵过程中产生了大量的乙酰谷氨酰胺，从发酵过程分析，其原因很可能是                 。