器官移植是治疗人类某些疾病的有效方法，如肾衰竭的病人可以通过肾脏移植进行治疗，肝癌可以移植肝脏等，请回答有关器官移植的一些问题：

（1）目前器官移植的最大障碍有两个方面，一是移植免疫；二是器官来源。移植免疫主要是细胞膜上的________，能够被病人的________系统识别而加以排斥。

（2）国外科学家已经研究用动物的器官作为器官移植的来源，发现猪的内脏器官与人的内脏器官大小、形态等均差不多，研究的重点是改造猪细胞膜。

①猪细胞膜的基本结构和人细胞膜是相同的，但其上面的________和人细胞膜有很大差别。

②改造猪细胞膜主要通过________技术进行，具体操作步骤是：

第一步：获得控制目的基因，该目的基因应当是________，所采用的方法有________________。

第二步：将目的基因与________结合，最常用的是________________。

第三步：将目的基因导入受体细胞，对于猪来说，应导入其________细胞。在这项技术中，必须使用的工具酶是________________。

（3）由于伦理、生态和免疫方面的原因，这项研究被终止了，请你从生态和免疫的角度，谈谈为什么终止这项很有意义的研究工作。（提示：人体中有很多与人共生的微生物）________________。

英国科学家已经研究用动物的器官作为器官移植的来源，科学家发现猪的内脏器官与人的内脏器官大小、形态均差不多，他们从20世纪80年代就开始研究。研究的重点是改造猪细胞膜。

（1）猪细胞膜的基本结构和人的细胞膜是相同的，但其上的________和人细胞膜有很多是不同的。

（2）改造猪细胞膜主要是通过________技术进行，具体操作步骤：

第一步：获得目的基因（人体细胞膜上蛋白质合成的基因），所用的方法有：________________。

第二步：将目的基因与________结合，最常用的运载体是________。

第三步：将目的基因导入受体细胞，对猪来说，应导入其________细胞最有效。在这项技术中，必须使用的两种工具酶是________。

回答下列关于基因工程的问题。

草甘膦是一种广谱除草剂，其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡。但是，它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前，已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因，若将该基因转入植物细胞内， 从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。

下图A-F表示6株植物，其中，植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题：

（1）若A-C浇清水，D-F浇的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成长的是_________。

（2）若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲，在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。

（3）假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图1所示，则应选择表中酶__________进行酶切；若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图1和2所示，则应选择表中酶__________ 进行酶切。

（4）假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图2所示，请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。（2分）

（5）假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但植物F仍没有表现出抗性，分析可能的原因_____________。

下图甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000对碱基）与大肠杆菌pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）

（6）图乙的培养基中含有氨苄青霉素，请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中，何种会含有重组质粒。___________。

（7）现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观察，若出现长度为_________kb和       kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计）

1979年，美国科学家利用基因工程技术，将人胰岛素基因转入大肠杆菌细胞内，然后通过大肠杆菌的繁殖，生产出了人胰岛素，操作过程如下图所示：

（1）人类基因能和异种生物的基因拼接在一起，是因为它们的DNA分子都具有__________结构，都是由四种    ____构成的，基因中的碱基能够__________。

（2）在上述基因工程操作的①→②和③→④过程中，必须使用             酶；

④→⑤过程需要使用                酶形成                       。

（3）人的基因在大肠杆菌细胞中表达时，需经过___________________两个步骤，

第一步的模板是__________________；人的基因表达时所用的原料是细菌提供的                            。