下面是利用大肠杆菌生产人胰岛素的有关问题，请回答：

（1）利用大肠杆菌生产人胰岛素必须应用____________和___________等工程学手段。

（2）为了获得人的胰岛素基因通常采用________________________________的方法，

（3）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是

，则EcoRI的识别序列和切点是___________（切点用箭头标在序列上）。

（4）要将人的胰岛素基因插入上述质粒切口形成重组质粒必须利用的工具酶是__         _。

通过基因工程，可利用大肠杆菌生产人的胰岛素，下列说法中正确的是?

A.通常用鸟枪法直接获得目的基因?

B.运载体除了可用质粒，还可以用聚乙二醇?

C.可以直接用合成胰岛素的信使RNA作为目的基因?

D.根据人的胰岛素的氨基酸序列人工合成目的基因

（11分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_____末端。过程②必需的酶是        酶，过程③必需的酶是       酶。

（2）在利用AB获得C的过程中，必须用              切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入         ，才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是__              ___。

（3）为使过程⑧更易进行，可用       （药剂）处理D。

（4）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___       ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____，常用抗原-抗体杂交技术。

（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。

（11分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_____末端。过程②必需的酶是       酶，过程③必需的酶是      酶。
（2）在利用AB获得C的过程中，必须用             切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入        ，才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是__             ___。
（3）为使过程⑧更易进行，可用      （药剂）处理D。
（4）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___      ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____，常用抗原-抗体杂交技术。
（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。

通过基因工程，可利用大肠杆菌生产人的胰岛素。下列说法中，正确的是（    ）

A．通常用鸟枪法直接获得目的基因

B．运载体除了可用质粒，还可以用秋水仙素

C．可以直接用合成胰岛素的信使RNA作为目的基因

D．根据人的胰岛素的氨基酸序列人工合成目的基因