（1）在上述基因操作中，由①→②过程所用的基因“剪刀”是________，由③→④过程的实现是通过________________切割的结果。由④→⑤过程需要目的基因的黏性末端与载体的黏性末端之间碱基____________和________________的连接形成重组DNA分子；由⑥→⑦过程是通过细胞的________实现的。

　　（2）不同生物间基因可以“移植”成功的结构基础是________________________结构，大肠杆菌可以生产出人的胰岛素，说明它们和人类共用一套________________，大肠杆菌合成人胰岛素的过程可以表示为________________。

　　（3）形成的重组DNA分子是否真正转移到了受体细胞，必须对受体细胞进行检测。请根据下面的实验原理和材料用具，设计一个实验：选择运载体——质粒的类别。

　　实验原理：作为运载体的质粒，需有标记基因，这一标记基因往往是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌，其质粒就可能用作运载体。

　　材料用具：青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。

　　方法步骤：

　　第一步：取三个含细菌培养基的培养皿并标1、2、3号，在酒精灯旁，用三支注射器分别注入1mL蒸馏水、青霉素、四环素液，并使之分布在整个培养基表面。

　　第二步：将接种环在酒精灯上燃烧进行________，并在酒精灯火焰旁取种，然后对三个培养皿接种。

　　第三步：培养：将接种后的三个培养皿放在37℃的恒温箱中培养24h。

　　预期结果分析：

　　①设置1号的目的是________，出现的现象是_________________________。

　　②就2号和3号培养皿而言，若仅2号生存则_________________________。

　　③若2号不存活，3号存活则__________________________。

　　④若2号和3号都有细菌存活则_____________________。

　　⑤若2号和3号都没有细菌存活则___________________。

1978年，美国科学家利用基因工程技术，将人胰岛素基因拼接到大肠杆菌的DNA分子中，然后通过大肠杆菌的繁殖，生产出了人胰岛素，操作过程如下图所示：

　　（1）在上述基因操作中，由①→②过程所用的基因“剪刀”是________，由③→④过程的实现是通过________________切割的结果。由④→⑤过程需要目的基因的黏性末端与载体的黏性末端之间碱基____________和________________的连接形成重组DNA分子；由⑥→⑦过程是通过细胞的________实现的。

　　（2）不同生物间基因可以“移植”成功的结构基础是________________________结构，大肠杆菌可以生产出人的胰岛素，说明它们和人类共用一套________________，大肠杆菌合成人胰岛素的过程可以表示为________________。

　　（3）形成的重组DNA分子是否真正转移到了受体细胞，必须对受体细胞进行检测。请根据下面的实验原理和材料用具，设计一个实验：选择运载体——质粒的类别。

　　实验原理：作为运载体的质粒，需有标记基因，这一标记基因往往是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌，其质粒就可能用作运载体。

　　材料用具：青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。

　　方法步骤：

　　第一步：取三个含细菌培养基的培养皿并标1、2、3号，在酒精灯旁，用三支注射器分别注入1mL蒸馏水、青霉素、四环素液，并使之分布在整个培养基表面。

　　第二步：将接种环在酒精灯上燃烧进行________，并在酒精灯火焰旁取种，然后对三个培养皿接种。

　　第三步：培养：将接种后的三个培养皿放在37℃的恒温箱中培养24h。

　　预期结果分析：

　　①设置1号的目的是________，出现的现象是_________________________。

　　②就2号和3号培养皿而言，若仅2号生存则_________________________。

　　③若2号不存活，3号存活则__________________________。

　　④若2号和3号都有细菌存活则_____________________。

　　⑤若2号和3号都没有细菌存活则___________________。

回答有关生物工程的问题。（8分）
小鼠是实验室常用的实验动物，如：利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。
用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。
（1）．将小鼠等分为两组，甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙组注射________________（作对照）。
（2）．为了保存有价值的杂交瘤细胞系，通常用超低温将其冻存，请分析其原因____________
___________________。
用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：
第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。
第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片断，利用特定技术在该DNA片段上插入neo^R基因（新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。
第三步：将插入neo^R基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步：将第三步处理后的胚胎干细胞，转移到特定培养基中筛选培养。
其基本原理如下图所示：

（3）．第二步中neo^R基因插入靶基因使用的工具酶是                     。neo^R基因不仅能使靶基因失活，还可作为       ；“靶基因失活”的根本原因是            。
（4）．从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有           、             等。

回答有关生物工程的问题。（8分）

小鼠是实验室常用的实验动物，如：利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。

用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。

（1）．将小鼠等分为两组，甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙组注射________________（作对照）。

（2）．为了保存有价值的杂交瘤细胞系，通常用超低温将其冻存，请分析其原因____________

___________________。

    用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：

第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。

第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片断，利用特定技术在该DNA片段上插入neo^R基因（新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。

第三步：将插入neo^R基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。

第四步：将第三步处理后的胚胎干细胞，转移到特定培养基中筛选培养。

其基本原理如下图所示：

（3）．第二步中neo^R基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neo^R基因不仅能使靶基因失活，还可作为        ；“靶基因失活”的根本原因是             。

（4）．从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有            、              等。