下列有关遗传变异的叙述中正确的是（  ）

A．三倍体西瓜不能形成正常的配子，是因为秋水仙素抑制纺锤体的形成

B．XY型生物体细胞中的X和Y染色体在有丝分裂过程中不会发生联会现象

C．基因突变和核基因重组都能在肺炎双球菌内发生

D．基因重组可以导致生物基因型发生改变，是因为改变了基因的分子结构

下列有关遗传变异的叙述中正确的是（ ）

A．三倍体西瓜不能形成正常的配子，是因为秋水仙素抑制纺锤体的形成

B．XY型生物体细胞中的X和Y染色体在有丝分裂过程中不会发生联会现象

C．基因突变和核基因重组都能在肺炎双球菌内发生

D．基因重组可以导致生物基因型发生改变，是因为改变了基因的分子结构

回答下列关于基因工程的问题：

如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达，根据图示所给信息回答下列问题：

(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时，用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒，露出相同的黏性末端，将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的             ，使质粒与目的基因结合成重组质粒。

(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时，效率还不高；导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒；有的导入的是普通质粒A；只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：

将得到的细菌涂抹在一个含有                的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件                      ；                                            。

(3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒，将得到的细菌涂抹在一个含有

                的培养基上培养，若细菌                ，则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程，应该用                                    作为探针。

（4）使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴                        的途径。

(5) 目的基因表达成功后，“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看，此变异属于         

       。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?                    。

回答下列关于基因工程的问题：

如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达，根据图示所给信息回答下列问题：

(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时，用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒，露出相同的黏性末端，将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的             ，使质粒与目的基因结合成重组质粒。

(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时，效率还不高；导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒；有的导入的是普通质粒A；只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：

将得到的细菌涂抹在一个含有                的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件                      ；                                            。

(3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒，将得到的细菌涂抹在一个含有

                的培养基上培养，若细菌                ，则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程，应该用                                    作为探针。

（4）使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴                        的途径。

(5) 目的基因表达成功后，“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看，此变异属于         

       。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?                    。

右图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用运载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达。请回答：

 (1)一个基因表达载体的组成除目的基因外，还必须有             、             和标记基因等。将基因表达载体导入细菌B之前，一般要先用        处理细胞，以增加其细胞壁的通透性。

(2)将得到的细菌涂抹在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。以上培养基按用途属于             培养基。

(3)上述培养基上聚集的菌种可通过               法或             培养成单菌落，经进一步筛选即可获得导入重组质粒的工程菌。获得纯培养物的关键是无菌操作，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是                  。

(4)在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种        、四种脱氧核苷酸和          的 DNA聚合酶。