（6分）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物
	A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900   200
		1400		800    600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900   600
		1300		800    500
		1200		1000   200
	经A酶和B酶同时切割	1900    1000    800    600    500    200

（1）该实验设计主要体现了      原则。
（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为   个和   个。
（3）根据表中数据，请在答题纸图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和“GGATCT//CCTAGA”序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化      键的形成。

（6分）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物
A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900   200
1400	800    600
1000	1000
500	500
B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900   600
1300	800    500
1200	1000   200
经A酶和B酶同时切割	1900    1000    800    600    500    200

（1）该实验设计主要体现了       原则。

（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为    个和    个。

（3）根据表中数据，请在答题纸图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和“GGATCT//CCTAGA”序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化       键的形成。

 

为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物
	A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900   200
		1400		800    600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900   600
		1300		800    500
		1200		1000   200
	经A酶和B酶同时切割	1900    1000    800    600    500    200

（1）该实验设计主要体现了       原则。

（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为    个和    个。

（3）根据表中数据，请在答题纸图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和“GGATCT//CCTAGA”序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化       键的形成。

为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种限制酶对单酶水解片段进行降解，分析片段大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物 （单位bp）
	A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900   200
		1400		800    600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900   600
		1300		800    500
		1200		1000   200
	经A酶和B酶同时切割	1900    1000    800    600    500    200

（1）该实验设计主要体现了                                 原则。

（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为    个和     个。

（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制酶的酶切位点。

（4）已知Bam HⅠ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个Bam HⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后和                            序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化                                  键的形成。

（5）一个基因表达载体的组成除了目的基因外，还必须有       、       及标记基因。

为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物 （单位bp）
	A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900　 200
		1400		800　 600
		1000		1000
		500		500
	B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900　 600
		1300		800　 500
		1200		1000　 200
	经A酶和B酶同时切割	1900　 1000　 800　 600　 500　 200

（1）该实验设计主要体现了__________________原则。

（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。

（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和______________序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化_________键的形成。