生物膜与膜生物工程国家重点实验室是由中国科学院与我国著名的北京大学、清华大学有关实验室组成的联合实验室之一，又叫人工膜技术，是生物工程的一个新的分支。这一技术是把磷脂制成的微球体包裹着酶、抗体、核酸等生物大分子或小分子药物，运输到患病部位的细胞，通过脂质微球体的膜与细胞质的相互作用(包括膜相互融合，被吞噬等)，把这些物质送入细胞中。从而达到诊断、治疗疾病或改变细胞代谢和遗传特性的目的。请回答：

(1)微球体与细胞的融合依赖于膜的            性，要将药物、酶等运输到患病部位，与细胞膜的特异性的                功能有关，这一功能与组成细胞膜的      

密切有关。

(2)下图为人体肝细胞膜的业显微结构模式图，则：

①在a～d四种物质进出细胞方式中。表示CO₂的运输的是                ，表示K⁺运输的是               。(用字母回答)

②若该细胞在一定条件下代谢活动加强，则该膜结构特点表现为         。若将该细胞置于低渗溶液中，则该膜结构将变              。

(3)在谷氨酸发酵过程中，常通过减少磷脂的供给量，达到提高谷氨酸产量的目的，这样做的原理是              。

(4)“生物导弹”可以将抗癌药物运输到癌细胞中，达到治疗的目的。其中将抗癌药物运输到特定部位的关键物质是          ，这是由于癌细胞具有        性。

(5)甘油、胆固醇等之所以能优先通过细胞膜，主要与             有关。

(6)如果该细胞为甲状腺细胞，给狗注射适量的Na¹³¹I，可见该细胞中¹³¹I先上升后下降，原因                                                                。

(7)如果该细胞为癌细胞，与正常细胞相比较，则膜结构中[   ]                含量下降，正常细胞转化为癌细胞的根本原因是                                   。

[生物一一一选修3：现代生物科技专题]（15分）
绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和鲴织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶足③过程需要的酶是____．
（2）④过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。
（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用__________技术进行检测。
（4）图中猪的卵母细胞应处于________期，此时在显微镜下可观察到在卵黄膜和透明带之间有__________个极体。用于核移植的导入了基因表达载体的猪胎儿成纤维细胞一般都选用传代10代以内的细胞的原因是__________。
（5）由重组细胞培育得到绿色荧光转基因克隆猪过程中涉及到的现代生物技术手段有__________，生殖方式为__________。
（6）假如该过程得到了一个早期胚胎，为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法，分割时应选择__________或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意__________。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用__________处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。

[生物一一一选修3：现代生物科技专题]（15分）

绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和鲴织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶足③过程需要的酶是____．

（2）④过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。

（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用__________技术进行检测。

（4）图中猪的卵母细胞应处于________期，此时在显微镜下可观察到在卵黄膜和透明带之间有__________个极体。用于核移植的导入了基因表达载体的猪胎儿成纤维细胞一般都选用传代10代以内的细胞的原因是__________。

（5）由重组细胞培育得到绿色荧光转基因克隆猪过程中涉及到的现代生物技术手段有__________，生殖方式为__________。

（6）假如该过程得到了一个早期胚胎，为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法，分割时应选择__________或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意__________。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用__________处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。

白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性人白细胞介素。

（1）在体液免疫过程中，白细胞介素是由＿＿＿细胞分泌的，可作用于受到抗原刺激的B细胞，使B细胞增殖，分化、形成＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿细胞。

   （2）目的基因获取：从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37°C培养48h，提取细胞总RNA，生成eDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成eDNA时所加反应物不同的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 。

   （3）重组载体的构建：用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后，用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿酶处理，形成重组载体。该载体与细胞膜上载体的化学本质分别是＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。

   （4）将重组载体导入酵母细胞，在培养液中培养一段时间后，收集菌液离心取＿＿＿＿＿＿（上清液/菌体）进行产物鉴定。若要统计培养液中酵母菌的活菌数目，常用的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

   （5）利用纯化的产物进行细胞培养实验，可研究人白细胞介素对于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 的作用。