（14分）下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。请据图回答下列有关问题：

(1)图中科学家在进行①操作时，要用同一种___________ 分别切割目的基因和运载体，运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过__________（键名）而结合，遵循              原则。
(2)在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种       、四种脱氧核苷酸和         的DNA聚合酶。
(3)图中的III是导入了目的基因的受体细胞，经培养、筛选最终获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交产生的F₁中，仍具有抗虫特性的植株占总数的      ，原因是                                                                            
(4)上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，往往有很多植株不再具有抗虫性，原因是_            
                          ，要想获得纯合体，常采用的方法是________   __。
(5)科学家最初在做抗虫实验时，虽然用一定的方法已检测出棉花的植株中含有抗虫基因，但让棉铃虫食用棉的叶片时，棉铃虫并没有被杀死，这说明______   _。科学家在研究的基础上又一次对棉花植株中的抗性基因进行了修饰，然后在让棉铃虫食用棉的叶片，结果食用的第二天棉铃虫就死亡了

（14分）下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。请据图回答下列有关问题：

(1)图中科学家在进行①操作时，要用同一种___________  分别切割目的基因和运载体，运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过__________（键名）而结合，遵循               原则。

(2)在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种        、四种脱氧核苷酸和          的DNA聚合酶。

(3)图中的III是导入了目的基因的受体细胞，经培养、筛选最终获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交产生的F₁中，仍具有抗虫特性的植株占总数的       ，原因是                                  

_                                                                             

(4)上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，往往有很多植株不再具有抗虫性，原因是_            

                           ，要想获得纯合体，常采用的方法是________    __。

(5)科学家最初在做抗虫实验时，虽然用一定的方法已检测出棉花的植株中含有抗虫基因，但让棉铃虫食用棉的叶片时，棉铃虫并没有被杀死，这说明______    _。科学家在研究的基础上又一次对棉花植株中的抗性基因进行了修饰，然后在让棉铃虫食用棉的叶片，结果食用的第二天棉铃虫就死亡了

回答下列有关生物工程的问题：

(1)在基因工程中，利用              筛选出含目的基因(或重组DNA分子)的受体细胞；基因工程最终获得成功的标志是                               

(2)在植物组织培养的再分化过程中，若要将愈伤组织诱导生根，则植物生长调节剂的浓度配比应为生长素浓度            (填“大于”、“小于”或“等于”)细胞分裂素浓度。

(3)动物细胞培养要取得成功，首先要对培养液、培养用具进行         处理，在使用合成培养基时，还应该在培养基中加人           等天然成分以支持生长。动物细胞培养时，需要一定的气体环境，其中C02的主要作用是                  。

(4)在胚胎工程中，若要获得多个卵细胞，则需对母畜作            处理，若要出现“不同的母体产下性状相同的后代”这一现象，则应使用的技术为              。

据2008年1月17日《干细胞》杂志报道，某科学家使用了进行试管受精的年轻女性捐献的卵子，以及2名志愿者的皮肤成纤维细胞，成功克隆出了5个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的干细胞。请回答：

（1）上述过程中主要应用到的动物细胞工程有                                      ；若将某经过修饰的基因导入其中的部分胚胎干细胞，常用的方法是                    。

（2）在使用合成培养基进行胚胎干细胞培养时，通常需要加入        等天然成分。在细胞培养时，要保证被培养的细胞处于一定的气体环境，所需要的气体主要有             ，其作用分别是                                                                  。如果将此细胞用于检测有毒物质是否引起了细胞基因突变，可用                  技术。

（3）科学家欲机型胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的          或囊胚，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。

下图表示利用胚胎干细胞（简称ES细胞）所作的一系列研究，请据图分析回答：

（1）过程I表示胚胎干细胞的体外培养，在培养液中需要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸以及天然成分____等物质，通过培养将获得遗传物质稳定的细胞群体，我们称之为________。

（2）过程II表示将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有____的特点。在哺乳动物胚胎发育过程中，囊胚将进一步发育成           。

（3）过程III中的褐毛基因转入胚胎干细胞前需构建         ，需要的工具酶是          。

（4）克隆转基因小鼠常用的技术手段有      、细胞培养和           。