小鼠基因敲除技术2007年获诺贝尔奖。80年代初胚胎干细胞的分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础，87年Thompsson首次建立了完整的ESC基因敲除技术的模型，此后几年中基因敲除技术得到了进一步的发展和完善，其技术路线如下。
①胚胎干细胞的获得；
②构建重组基因表达载体；
③用一定方法把重组DNA转入受体细胞内；
④用一定培养基筛选已击中的细胞；
⑤将击中的细胞转入胚胎，通过胚胎移植使其生长为转基因动物，然后对该动物进行形态观察和分子生物学检测。
异源抗体用于人体容易发生排异反应，若将动物抗体分子基因敲除，代之以人的抗体分子基因，那么人源抗体的产生将迎刃而解。根据上述材料回答下列问题：
（1）构建重组载体过程中，为使导人的目的基因能完成表达，需要在目的基因的首端和尾端各插入              ；
（2）上述过程中所需的胚胎通常通过供体获得，再将处理过的胚胎移植到受体内培养，则胚胎移植前要对供体和受体进行              处理，若想培养出多个性状表现一致的个体，可通过              技术；
（3）应用基因敲除技术可让动物生产人源抗体，通常可将从动物体内提取的细胞的抗体分子基因敲除，代之以人的抗体分子基因，然后将该细胞通过细胞融合技术与骨髓瘤细胞融合，再通过              、              等过程筛选出能产生人源抗体的细胞群，再在培养液或小鼠腹腔进行培养，从而获得所需抗体；
（4）用培养基筛选重组载体是否已击中细胞，方法之一是启动子缺失筛选法：原理是在重组载体的目的片段中插入一个启动子缺失的正向选择基因，同时目的基因片段也不包含该基因的启动子序列。若基因载体和细胞基因组发生同源重组，则正向选择基因可以在靶位点基因启动子的作用下得以表达，使阳性细胞具有G418抗性（G418是一种细胞毒性药物，对细胞有抑制或杀伤作用），从而从培养基中得到所需要的阳性克隆细胞，根据上述原理筛选导入成功的细胞的基本方法或过程是              。

小鼠基因敲除技术2007年获诺贝尔奖。80年代初胚胎干细胞的分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础，87年Thompsson首次建立了完整的ESC基因敲除技术的模型，此后几年中基因敲除技术得到了进一步的发展和完善，其技术路线如下。

①胚胎干细胞的获得；

②构建重组基因表达载体；

③用一定方法把重组DNA转入受体细胞内；

④用一定培养基筛选已击中的细胞；

⑤将击中的细胞转入胚胎，通过胚胎移植使其生长为转基因动物，然后对该动物进行形态观察和分子生物学检测。

异源抗体用于人体容易发生排异反应，若将动物抗体分子基因敲除，代之以人的抗体分子基因，那么人源抗体的产生将迎刃而解。根据上述材料回答下列问题：

（1）构建重组载体过程中，为使导人的目的基因能完成表达，需要在目的基因的首端和尾端各插入               ；

（2）上述过程中所需的胚胎通常通过供体获得，再将处理过的胚胎移植到受体内培养，则胚胎移植前要对供体和受体进行               处理，若想培养出多个性状表现一致的个体，可通过               技术；

（3）应用基因敲除技术可让动物生产人源抗体，通常可将从动物体内提取的细胞的抗体分子基因敲除，代之以人的抗体分子基因，然后将该细胞通过细胞融合技术与骨髓瘤细胞融合，再通过               、               等过程筛选出能产生人源抗体的细胞群，再在培养液或小鼠腹腔进行培养，从而获得所需抗体；

（4）用培养基筛选重组载体是否已击中细胞，方法之一是启动子缺失筛选法：原理是在重组载体的目的片段中插入一个启动子缺失的正向选择基因，同时目的基因片段也不包含该基因的启动子序列。若基因载体和细胞基因组发生同源重组，则正向选择基因可以在靶位点基因启动子的作用下得以表达，使阳性细胞具有G418抗性（G418是一种细胞毒性药物，对细胞有抑制或杀伤作用），从而从培养基中得到所需要的阳性克隆细胞，根据上述原理筛选导入成功的细胞的基本方法或过程是               。

小鼠基因敲除技术2007年获诺贝尔奖。80年代初胚胎干细胞的分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础，87年Thompsson首次建立了完整的ESC基因敲除技术的模型，此后几年中基因敲除技术得到了进一步的发展和完善，其技术路线如下。

①胚胎干细胞的获得；

②构建重组基因表达载体；

③用一定方法把重组DNA转入受体细胞内；

④用一定培养基筛选已击中的细胞；

⑤将击中的细胞转入胚胎，通过胚胎移植使其生长为转基因动物，然后对该动物进行形态观察和分子生物学检测。

异源抗体用于人体容易发生排异反应，若将动物抗体分子基因敲除，代之以人的抗体分子基因，那么人源抗体的产生将迎刃而解。根据上述材料回答下列问题：

（1）构建重组载体过程中，为使导人的目的基因能完成表达，需要在目的基因的首端和尾端各插入               ；

（2）上述过程中所需的胚胎通常通过供体获得，再将处理过的胚胎移植到受体内培养，则胚胎移植前要对供体和受体进行               处理，若想培养出多个性状表现一致的个体，可通过               技术；

（3）应用基因敲除技术可让动物生产人源抗体，通常可将从动物体内提取的细胞的抗体分子基因敲除，代之以人的抗体分子基因，然后将该细胞通过细胞融合技术与骨髓瘤细胞融合，再通过               、               等过程筛选出能产生人源抗体的细胞群，再在培养液或小鼠腹腔进行培养，从而获得所需抗体；

（4）用培养基筛选重组载体是否已击中细胞，方法之一是启动子缺失筛选法：原理是在重组载体的目的片段中插入一个启动子缺失的正向选择基因，同时目的基因片段也不包含该基因的启动子序列。若基因载体和细胞基因组发生同源重组，则正向选择基因可以在靶位点基因启动子的作用下得以表达，使阳性细胞具有G418抗性（G418是一种细胞毒性药物，对细胞有抑制或杀伤作用），从而从培养基中得到所需要的阳性克隆细胞，根据上述原理筛选导入成功的细胞的基本方法或过程是               。

阅读材料，分析有关生物进化和生物多样性的问题。 （7分）

材料1.某些动物在不同季节中数量差异很大：春季繁殖，夏季数量增加，到了冬季又由于寒冷、缺少食物等原因而大量死亡。第二年春季，由残存的少量个体繁殖，再使数量增多。由此形成一个如瓶颈样的模式（见图）。

(1)在图示的三年间，第一年夏季●基因的频率为2%，第二年夏季●基因的频率为3%，第三年夏季●基因的频率为0%，该生物种群是否发生进化？        。理由为                              。

(2)使用农药防治害虫，保留了突变出抗药性基因的个体。其实质是依赖      的选择作用，提高该害虫种群中           的频率。而经过越冬的瓶颈样模式，抗药性个体不耐寒冷而死亡，导致下一年该害虫种群中抗药性基因频率又下降。抗药性基因的出现，对该害虫来说是有利还是有害？              （有利/有害/取决于环境的变化）。

材料2.图中地雀A与B可以交配并产生可育后代，地雀C与A、B之间不能互相交配。

(3)若干年后，岛屿上出现地雀新种C。它的进化机制是：“地雀种群本来就存在着基因频率的变化；大陆与岛屿不同的环境引起不同的自然选择；由于           隔离，阻断两处种群的基因交流,导致两处种群的基因频率向不同的方向变化；当基因频率的变化达到一定程度时，由于          隔离，形成新种C。”

阅读材料，分析有关生物进化和生物多样性的问题。
材料1.某些动物在不同季节中数量差异很大：春季繁殖，夏季数量增加，到了冬季又由于寒冷、缺少食物等原因而大量死亡。第二年春季，由残存的少量个体繁殖，再使数量增多。由此形成一个如瓶颈样的模式（见图）。

（1）在图示的三年间，第一年夏季●基因的频率为2%，第二年夏季●基因的频率为3%，第三年夏季●基因的频率为0%，该生物种群是否发生进化？ 理由是                                     。
（2）使用农药防治害虫，保留了突变出抗药性基因的个体。其实质是依赖     的选择作用，提高该害虫种群中          的频率。而经过越冬的瓶颈样模式，抗药性个体不耐寒冷而死亡，导致下一年该害虫种群中抗药性基因频率又下降。抗药性基因的出现，对该害虫来说是有利还是有害？             （有利/有害/取决于环境的变化）。
材料2图中地雀A与B可以交配并产生可育后代，地雀C与A、B之间不能互相交配。

（3）若干年后，岛屿上出现地雀新种C。它的进化机制是：“地雀种群本来就存在着基因频率的变化；大陆与岛屿不同的环境引起不同的自然选择；由于          隔离，阻断两处种群的基因交流,导致两处种群的基因频率向不同的方向变化；当基因频率的变化达到一定程度时，由于         隔离，形成新种C。”
（4）从图1 至图3的演变，反映了生物多样性发展的规律是                      。