关于利用细菌大量生产人类胰岛素，下列叙述错误的是

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A．用适当的酶对运载体和人类胰岛素基因进行切割与黏合

B．用适当的化学物质处理受体菌表面，将重组DNA导入受体菌

C．通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体菌

D．重组DNA必须能在受体菌内进行复制与转录，并合成人类胰岛素

利用生物工程的方法可以让大肠杆菌生产人胰岛素。下面有关叙述哪一项是错误的是

A．人胰岛素基因能够在大肠杆菌体内得以表达，是因为这两类生物具有完全相同的代谢方式

B．能合成人胰岛素的大肠杆菌从可遗传变异的类型上属于基因重组

C．常以b时期的细菌作为菌种，原因是此时期细菌代谢旺盛，生长繁殖速率快

D．用带有人胰岛素基因的大肠杆菌进行发酵时，可在上图中c时期得到大量的人胰岛素

（14分）回答有关生物工程的问题：
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生__末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_（相同不同）粘性末端的限制酶。
（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是提供________特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用___处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与__________杂交，该杂交技术称为_________。
（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的______中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将_____插入植物细胞的染色体___上。
(4)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。
(5)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
(6)利用生物反应器培养家蚕细胞时，细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

（14分）回答有关生物工程的问题：

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生__末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_（相同不同）粘性末端的限制酶。

（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是提供________特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用___处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与__________杂交，该杂交技术称为_________。

（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的______中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将_____插入植物细胞的染色体___上。

(4)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

(5)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

(6)利用生物反应器培养家蚕细胞时，细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

运用相关知识填空：

(1)细菌具有天然耐药性和_______耐药性，不按正确_____使用抗生素，或任意缩短使用抗生素时间，会增加细菌耐药性概率，耐药性的内在实质是???????????????????????????????? __________。

(2)在绿色食品的生产过程中一般不使用杀虫剂,也允许使用少量的杀虫剂，但长期使用也会使害虫出现抗药性，因此生产资料使用准则对生产过程中___________进行了规定，其中农药使用准则规定只能使用生物源农药、矿物源农药和________农药，以利于生产出无污染、_________、优质的绿色食品。

（3）利用基因工程培养转基因植物能减少化肥农药使用对环境的污染，该工程还能生产基因工程药物、基因工程疫苗，___________疫苗是第一个投入使用的基因工程疫苗，而“超级细菌”的出现，还意味着该工程能运用到__________技术。

（4）人们利用基因工程的方法，用大肠杆菌生产人类胰岛素，这一过程不涉及到（?? ）

A．用适当的酶对胰岛素基因与运载体进行切割并拼接

B．把重组后的DNA分子导入受体细胞内并进行扩增

C．检测重组DNA分子是否导入受体细胞内并表达出相应的性状

D．检测目的基因是否发生结构上的改变