29. 和用于基因敲除细胞的筛选 先让该克隆小鼠与多只野生型小鼠交配然后让子代与该克隆小鼠回交筛选突变型的隐性纯合子. 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

回答下列I、II小题

I.(14分)“基因敲除”技术(通常叫基因打靶)的出现,可以准确地“敲除”DNA分子上的特定基因,以研究某一基因在生物个体发育和病理过程中的作用,从而为研究基因功能开辟了新途径。该技术的过程大致如下:

第一步:分离胚胎干细胞。从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞,在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。

第二步:突变DNA的体外构建。获取与靶基因同源的DNA片断,利用基因工程技术在该DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因),使该片段上的靶基因失活。

第三步:突变DNA与靶基因互换。将体外构建的突变DNA转移入胚胎干细胞,再通过同源互换,用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个,完成对胚胎干细胞的基因改造。

第四步:将第三步处理后的胚胎干细胞,转移到添加新霉素的培养基中筛选培养。

    其基本原理如下图所示:

请根据上述资料,回答下列问题:

(1)在上述的“基因敲除技术”中,采用的生物工程技术有               

(2)“基因敲隙技术”以胚胎干细胞作为对象是因为胚胎干细胞具有____性。

(3)在靶基因中插入neoR基因的目的是                     

(4)基因敲除过程中外源基因是否导入受体细胞,可利用重组基因上的            进行检测。将失活靶基因导入胚胎干细胞的操作完成后,通常需要进行筛选,其原因是                   

(5)假设经过上图表示的过程,研究者成功获得一枚“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞,并培育成一只雌性克隆小鼠,则其一个卵原细胞产生的卵细胞携带neoR基因的概率是__     。若该克隆雌鼠与普通小鼠交配,理论上该克隆雌鼠产下抗新霉素小鼠与不抗新霉素小鼠的比例为____  。

II.(8分)菜豆种皮颜色由两对非等位基因A(a)和B(b)调控。A基因控制黑色素合成(A—显性基因一出现色素,AA和Aa的效应相同),B基因为修饰基因,淡化颜色的深度(B—显性基因—修饰效应出现,BB使色素颜色完全消失,Bb使色素颜色淡化)。现有亲代种子P1(纯种、白色)和P2(纯种、黑色),杂交实验如右图:

   (1)①P1的基因型是____;F1的基因型是__  

②F2中种皮为白色的个体基因型有    种,其中纯种个体大约占____。

   (2)从F2取出一粒黑色种子,在适宜条件下培育成植株。为了鉴定其墓因型,将其与F1杂交,预计可能的实验结果,并得出相应的结论:

①若子代表现为__   __,则该黑色种子的基因型为     

②若子代表现为_    ___,则该黑色种子的基因型为     

 

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回答下列I、II小题

I.“基因敲除”技术(通常叫基因打靶)的出现,可以准确地“敲除”DNA分子上的特定基因,以研究某一基因在生物个体发育和病理过程中的作用,从而为研究基因功能开辟了新途径。该技术的过程大致如下:

第一步:分离胚胎干细胞。从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞,在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。

第二步:突变DNA的体外构建。获取与靶基因同源的DNA片断,利用基因工程技术在该DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因),使该片段上的靶基因失活。

第三步:突变DNA与靶基因互换。将体外构建的突变DNA转移入胚胎干细胞,再通过同源互换,用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个,完成对胚胎干细胞的基因改造。

第四步:将第三步处理后的胚胎干细胞,转移到添加新霉素的培养基中筛选培养。

    其基本原理如下图所示:

请根据上述资料,回答下列问题:

(1)在上述的“基因敲除技术”中,采用的生物工程技术有               

(2)“基因敲隙技术”以胚胎干细胞作为对象是因为胚胎干细胞具有____性。

(3)在靶基因中插入neoR基因的目的是                     

(4)基因敲除过程中外源基因是否导入受体细胞,可利用重组基因上的            进行检测。将失活靶基因导入胚胎干细胞的操作完成后,通常需要进行筛选,其原因是                   

(5)假设经过上图表示的过程,研究者成功获得一枚“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞,并培育成一只雌性克隆小鼠,则其一个卵原细胞产生的卵细胞携带neoR基因的概率是__     。若该克隆雌鼠与普通小鼠交配,理论上该克隆雌鼠产下抗新霉素小鼠与不抗新霉素小鼠的比例为____  。

II.菜豆种皮颜色由两对非等位基因A(a)和B(b)调控。A基因控制黑色素合成(A—显性基因一出现色素,AA和Aa的效应相同),B基因为修饰基因,淡化颜色的深度(B—显性基因—修饰效应出现,BB使色素颜色完全消失,Bb使色素颜色淡化)。现有亲代种子P1(纯种、白色)和P2(纯种、黑色),杂交实验如右图:

   (1)①P1的基因型是____;F1的基因型是__  

②F2中种皮为白色的个体基因型有    种,其中纯种个体大约占____。

   (2)从F2取出一粒黑色种子,在适宜条件下培育成植株。为了鉴定其墓因型,将其与F1杂交,预计可能的实验结果,并得出相应的结论:

①若子代表现为__   __,则该黑色种子的基因型为     

②若子代表现为_    ___,则该黑色种子的基因型为     

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回答下列I、II小题
I.(14分)“基因敲除”技术(通常叫基因打靶)的出现,可以准确地“敲除”DNA分子上的特定基因,以研究某一基因在生物个体发育和病理过程中的作用,从而为研究基因功能开辟了新途径。该技术的过程大致如下:
第一步:分离胚胎干细胞。从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞,在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。
第二步:突变DNA的体外构建。获取与靶基因同源的DNA片断,利用基因工程技术在该DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因),使该片段上的靶基因失活。
第三步:突变DNA与靶基因互换。将体外构建的突变DNA转移入胚胎干细胞,再通过同源互换,用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个,完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步:将第三步处理后的胚胎干细胞,转移到添加新霉素的培养基中筛选培养。
其基本原理如下图所示:

请根据上述资料,回答下列问题:
(1)在上述的“基因敲除技术”中,采用的生物工程技术有               
(2)“基因敲隙技术”以胚胎干细胞作为对象是因为胚胎干细胞具有____性。
(3)在靶基因中插入neoR基因的目的是                     
(4)基因敲除过程中外源基因是否导入受体细胞,可利用重组基因上的           进行检测。将失活靶基因导入胚胎干细胞的操作完成后,通常需要进行筛选,其原因是                   
(5)假设经过上图表示的过程,研究者成功获得一枚“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞,并培育成一只雌性克隆小鼠,则其一个卵原细胞产生的卵细胞携带neoR基因的概率是__    。若该克隆雌鼠与普通小鼠交配,理论上该克隆雌鼠产下抗新霉素小鼠与不抗新霉素小鼠的比例为____ 。
II.(8分)菜豆种皮颜色由两对非等位基因A(a)和B(b)调控。A基因控制黑色素合成(A—显性基因一出现色素,AA和Aa的效应相同),B基因为修饰基因,淡化颜色的深度(B—显性基因—修饰效应出现,BB使色素颜色完全消失,Bb使色素颜色淡化)。现有亲代种子P1(纯种、白色)和P2(纯种、黑色),杂交实验如右图:

(1)①P1的基因型是____;F1的基因型是__  
②F2中种皮为白色的个体基因型有   种,其中纯种个体大约占____。
(2)从F2取出一粒黑色种子,在适宜条件下培育成植株。为了鉴定其基因型,将其与F1杂交,预计可能的实验结果,并得出相应的结论:
①若子代表现为__  __,则该黑色种子的基因型为     
②若子代表现为_   ___,则该黑色种子的基因型为     

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由于在涉及胚胎干细胞和哺乳动物DNA重组方面的一系列突破性发现,两位美国科学家和一位英国科学家分享了2007年的诺贝尔生理学或医学奖。这些发现导致了一种通常被人们称为“基因靶向”的强大技术。

           所谓“基因靶向”技术是指利用细胞脱氧核糖核酸(DNA)可与外源性DNA同源序列发生同源重组(指同源性强的外源DNA片段与宿主基因片段互补结合时,结合区的任何部分都有与宿主的相应片段发生交换的可能)的性质将一个结构已知但功能未知的基因去除,或用其他序列相近的基因取代,然后从整体观察实验动物,从而推测相应基因的功能。有了这种人为地把实验动物某一种有功能的基因完全缺失的技术,人们就可以瞄准某一特定基因,使其失去活性,进而研究该特定基因的功能。打个比方来说,使用“基因靶向”这具高精度瞄准镜,科学家们就能够精确瞄准任何一个基因,并对它进行深入研究。

(1)基因靶向技术需要使用的ES细胞的      高,能够分化出              存在稳定性差异的各种细胞,包括生殖细胞系。

(2)通过基因敲除,可以确定已知        的特定基因具有什么功能。

(3)同源重组实现的重组类似于减数分裂中        期的             现象。

(4)为什么基因敲入可以用于特定基因疾病的治疗?                             

(5)下列可以使用基因靶向技术进行治疗的疾病包括       

 A.21三体综合症  B.白化病  C.血友病  D.性腺发育不全

(6)在利用基因敲除技术研究小鼠某特定基因的功能的实验中,对照组的处理方法是

                                                                       

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由于在涉及胚胎干细胞和哺乳动物DNA重组方面的一系列突破性发现,两位美国科学家和一位英国科学家分享了2007年的诺贝尔生理学或医学奖。这些发现导致了一种通常被人们称为“基因靶向”的强大技术。

所谓“基因靶向”技术是指利用细胞脱氧核糖核酸(DNA)可与外源性DNA同源序列发生同源重组(指同源性强的外源DNA片段与宿主基因片段互补结合时,结合区的任何部分都有与宿主的相应片段发生交换的可能)的性质将一个结构已知但功能未知的基因去除,或用其他序列相近的基因取代,然后从整体观察实验动物,从而推测相应基因的功能。有了这种人为地把实验动物某一种有功能的基因完全缺失的技术,人们就可以瞄准某一特定基因,使其失去活性,进而研究该特定基因的功能。打个比方来说,使用“基因靶向”这具高精度瞄准镜,科学家们就能够精确瞄准任何一个基因,并对它进行深入研究。

(1)

基因靶向技术需要使用的ES细胞的________高,能够分化出各种细胞,包括生殖细胞系。

(2)

通过基因敲除,可以确定己知________的特定基因具有什么功能。

(3)

同源重组实现的重组类似于减数分裂中________期的________现象。

(4)

为什么基因敲除可以用于特定基因疾病的治疗?____________________

(5)

基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用同源DNA片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的,在基因敲除技术中涉及到的变异类型是

[  ]

A.

基因重组

B.

基因突变

C.

人工诱变

D.

染色体变异

(6)

下列可以使用基因靶向技术进行治疗的疾病包括

A.

21三体综合症

B.

白化病

C.

血友病

D.

性腺发育不全

(7)

在利用基因敲除技术研究小鼠某特定基因的功能的实验中,对照组的处理方法是_____________________

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