（现代生物技术专题，8分）

Ⅰ．加利福尼亚大学的一组科学家通过基因工程技术成功地将萤火虫的荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内。

   （1）在基因工程中，通常需要使用的工具酶包括                     。

   （2）将目的基因导入大肠杆菌需要运载体的帮助。作为运载体需具备的条件有          。

A．能够在宿主细胞内复制并稳定保存

B．具有特定的限制酶切点

C．具有与目的基因相同的碱基片断

D．具有某些标记基因

Ⅱ．动物细胞融合的主要用途是制备单克隆抗体,制备单克隆抗体，使用的融合细胞是                                           ，所需的融合细胞的特点是                                                                             。

现代生物科技专题：

2009年7月 ，国际权威科学杂志《自然》在线发表中国科学家的一项研究成果：将iPS细胞（诱导性多能干细胞），注射到小鼠四倍体囊胚中，通过培养，最终得到了具有繁殖能力的小鼠，从而在世界上第一次证明了iPS细胞的全能性。过程如下图。请据图回答：

⑴将病毒基因导入黑鼠皮肤细胞之前，要用           等工具酶来构建基因表达载体，导入常用的方法是           ；

⑵图示过程涉及的生物技术主要用细胞培养、              、               ；

⑶由图示可知，四倍体囊胚在iPS细胞的发育中所起的作用是                       ；

⑷如果将该项研究成果用于人类器官移植，与使用胚胎干细胞相比，iPS细胞优势是                                              

（10分）现代生物科技专题

   材料：饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪、禽等动物由于缺乏有关酶，无法有效利用植酸，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排除后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成为目前重要的饲料添加剂之一。

（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的           ，然后改变植酸酶的           ，从而得到新的植酸酶。

（2）培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是                 。请简述获得转基因植株的完整过程。

（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过       转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过             方法，从而一次得到多个转基因猪个体。

（4）若这些转基因因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？

(现代生物科技专题)据报道，中山大学中山眼科中心主任任葛坚领导的研究小组将猴子的皮肤干细胞注射到小鼠的囊胚里，再将囊胚移入代孕鼠体内发育形成猴鼠嵌合体——猴鼠，用于角膜等器官的移植研究。请回答下列问题。

(1)胚胎干细胞体外培养诱导分化可形成大量皮肤干细胞，其原因是________________________________________________________________。

根据胚胎干细胞的这种功能特性，当我们身体的某一类细胞功能出现异常或退化时，利用胚胎干细胞的治疗思路是________________。

(2)囊胚期时，胚胎细胞开始出现分化，有些细胞个体较小，将来只能发育成胎膜和胎盘，这类细胞称为________。因此，应将猴子的皮肤干细胞注射到小鼠囊胚的________部位，以伴随其发育成某种组织。

(3)将囊胚移入代孕鼠体内属于________技术，此技术对代孕受体的要求是________________________________________________________________。

在畜牧生产中采用这种技术的优势主要是________________________，若想进一步提高胚胎的利用率，可采用________技术。

[现代生物科技专题]（10分）
2007年诺贝尔生理学或医学奖授予在“基因靶向”技术方面作出突出贡献的三位科学家。借助这一技术，科学家可以用小鼠进行实验，使其体内的某项特定基因丧失功能，以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程，请回答有关问题。
（1）获得胚胎干细胞(ES细胞)。实验一般采用ES细胞（或受精卵）作为目的基因的受体细胞，这是因为ES细胞易表现出______________。举出一例获取Es细胞的常用方法：                                            。
（2）获取目的基因。为了提高实验成功率，还需要通过PCR技术扩增目的基因。与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入哪两种特别的物质?                                
（3）将基因表达载体导入ES细胞，从中筛选出成功发生了同源重组的ES细胞，然后培育出小鼠。由ES细胞培育出小鼠的过程中，需要用到早期胚胎培养技术和           技术。（4）通过检测目的基因是否表达出蛋白质产品，可以确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组。这种检测方法是                            。