35   . (8分）【生物一现代生物科技专题】

羊绒素有“软黄金”之称，内蒙古绒山羊和辽宁绒山羊是我国的两大产绒品种。我国生物 学家运用现代生物技术培育出了转基因克隆绒山羊,其过程如下图所示：

(1)在辽宁绒山羊细胞中获取的IGF-I基因在导入胚胎干细胞之前须________，这是基因工程操作的核心步骤,该操作过程必需的工具酶是________，将IGF-I基因导入胚胎干细胞最有效的方法是________

(2)转基因胚胎干细胞培养过程常在培养液中加人一定量的________.以防培养过程中的污染;同时在使用合成培养基时，为保证细胞正常生长,在培养基中还要添加________等天然成分。

(3)干细胞经扩大培养诱导分化为早期胚胎，随后即可植入________的代孕母羊体内。为提高胚胎利用率，还可以采用________技术以获得更多的转基因克降绒山羊幼仔。

(4)请列举至少两种转基因克隆绒山羊培育过程中采用的现代生物技术: ________

35.   【生物一现代生物科技专题】（8分）

科学家发现人的第5号染色体中的PITXl基因能遏制端粒酶发挥作用，将该基因移植到实验鼠的癌细胞中，能使得癌细胞无法增殖。请分析回答问题：

(1)在上述转基因过程中用到的工具有______，PITXI基因称为______。

(2)将该基因移植到实验鼠的癌细胞的过程中，其操作的核心步骤为______,标记基因的作用是______。

(3)在配制动物细胞培养液时，通常加入______等天然成分，在培养癌细胞的过程中，______ (会、不会）出现接触抑制。

(4)用鼠的骨髓瘤细胞与人的某种浆细胞融合，得到的杂交瘤细胞既能______，又能______。

【生物一现代生物科技专题】科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄理科的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有Pst I 、sma II 、Hind III 、Alul 等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr 为抗氨苄青霉素基因），其中①——④ 是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，I 、II 表示相关结构或细胞。请据图作答：

（l）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶，分别对       进行切割，切割后产生的DNA 片段分别为       种。

（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体I 中含有         作为标记基因。

（3）研究人员通常采用        法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用       技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。

（4）利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的              过程。

（8分）（生物一现代生物科技专题）

人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：

请回答：
（1）过程①代表的是        。
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用          和         两种工具酶。
（3）过程③采用的实验技术是       ，获得的X是           。
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的         所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行      比较；或用图中的          进行特异性结合检测。

【生物一现代生物科技专题】

我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60％的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请回答：

(1)在上述工程中，铁结合蛋白基因称为____________，获取该基因后常用___________技术进行扩增。

(2)构建重组Ti质粒时，通常要用同种限制酶分别切割___________和__________。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用___________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。

(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得__________；培养基3与培养基2的区别是_________。

(4)检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻____________。