回答下列有关基因工程和克隆技术的问题。（10分）

2006年12月22日，我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

63、说出绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中用到了哪些生物工程技术？           　

利用了哪些原理？                      （本题答案从下列所给选项中选择填写）

①转基因技术；②细胞核移植技术；③胚胎移植技术；④干细胞技术；⑤动物细胞培养技术

⑥基因突变；⑦基因重组；⑧动物细胞核具有全能性；⑨动物细胞具有全能性

64、过程①②中必需用到的酶分别是                和                 。绿色荧光蛋白基因之所以能与质粒重组，原因是                                               。

65、早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及               等物质。

通过上图中过程①的方法获取目的基因的数量是有限的，要获得大量的绿色荧光蛋白基因可以利用PCR技术。PCR扩增反应（如下图所示）中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸点的条件下，发挥延伸DNA子链的作用，将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。请回答：

 

PCR（DNA聚合酶链式反应）技术示意图：

	PCR（DNA聚合酶链式反应）技术示意图

 

66、你认为TaqDNA聚合酶一定是从下列哪种生物体细胞中分离提取的？        

A．水母细胞         B．猪胎儿成纤维细胞   　C．极端嗜热菌     D．大肠杆菌

67、下面的表达式不能反映TaqDNA聚合酶的功能，为什么？                           。

 

68、用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点和标出碱基对数。（2分）

(12分)请分析下表，回答有关实验的问题。

组别	材料	实验条件	观察内容
A	豆浆	0.1g/mL的NaOH溶液、0.01g/mL的CuSO4溶液	液体的颜色变化
B	梨汁或苹果汁	0.1g/mL的NaOH溶液、0.05g/mL的CuSO4溶液	液体的颜色变化
C	洋葱鳞叶表皮	解离液、清水、0.02g/mL的龙胆紫等	有丝分裂的过程
D	菠菜叶	二氧化硅、碳酸钙、无水乙醇、层析液等	色素种类和颜色

（1）A组实验注入试剂以后，对试管液体的处理方法与B组有何不同？               。

（2）B组试剂的使用方法与A组比较，不同之处是B组：                             。

（3）C组实验中，在显微镜下观察不到染色体，原因是                             。如果一个同学用洋葱根尖制作临时装片，且在低倍镜下观察到洋葱根尖分生区的一个处于中期的细胞位于视野右上方，想在高倍镜下进一步观察这个细胞的染色体的形态和数目，请从下列选项中选择正确的操作步骤的代码并排序                        。

①转动粗准焦螺旋 ②转动细准焦螺旋 ③调节反光镜、光圈增加进光量 ④转动转换器，换上高倍镜 ⑤向左下方移动装片 ⑥向右上方移动装片 ⑦向上移动装片 ⑧向下移动装片

洋葱根尖细胞生命活动中，细胞核起非常重要的重要，对细胞核功能的较为全面的阐述应该是                     

（4）某同学做D实验后，绘制了四种光合色素在滤纸上分离情况（图 1 所示）。据图分析，主要吸收红光的色素是             （填序号）。 另一同学由于研磨绿叶过程中粗心大意，漏加了某些试剂或药品，导致实验结果不理想（图2所示），请指出该同学漏加的试剂或药品            。

（5）为研究温度对酶活性的影响，某同学根据已提供的实验器材设计出了如下实验方案

1．用恒温水浴锅、烧杯和铁架台调好水浴装置。 2．将量好的酶溶液和天平称取的蛋白质块分别放入2个试管，然后将2个试管放入同一水浴环境中持续一定时间，使试管内外温度一致，再将酶溶液和蛋白质块（将鸡蛋煮熟后的蛋白部分切成的小块）倒入同一试管中混合，保温并记录蛋白质块消失所需的时间。 3．将酶溶液改成等量的蒸馏水，重复步骤2，并注意与步骤2的温度保持一致，进行对照实验。 4．作好观察记录。

你认为该方案存在哪些问题？（4点）

 

(12分)请分析下表，回答有关实验的问题。

（1）A组实验注入试剂以后，对试管液体的处理方法与B组有何不同？              。
（2）B组试剂的使用方法与A组比较，不同之处是B组：                            。
（3）C组实验中，在显微镜下观察不到染色体，原因是                            。如果一个同学用洋葱根尖制作临时装片，且在低倍镜下观察到洋葱根尖分生区的一个处于中期的细胞位于视野右上方，想在高倍镜下进一步观察这个细胞的染色体的形态和数目，请从下列选项中选择正确的操作步骤的代码并排序                       。
①转动粗准焦螺旋 ②转动细准焦螺旋 ③调节反光镜、光圈增加进光量 ④转动转换器，换上高倍镜 ⑤向左下方移动装片 ⑥向右上方移动装片 ⑦向上移动装片 ⑧向下移动装片
洋葱根尖细胞生命活动中，细胞核起非常重要的重要，对细胞核功能的较为全面的阐述应该是                     
（4）某同学做D实验后，绘制了四种光合色素在滤纸上分离情况（图 1 所示）。据图分析，主要吸收红光的色素是            （填序号）。 另一同学由于研磨绿叶过程中粗心大意，漏加了某些试剂或药品，导致实验结果不理想（图2所示），请指出该同学漏加的试剂或药品           。

（5）为研究温度对酶活性的影响，某同学根据已提供的实验器材设计出了如下实验方案

1．用恒温水浴锅、烧杯和铁架台调好水浴装置。 2．将量好的酶溶液和天平称取的蛋白质块分别放入2个试管，然后将2个试管放入同一水浴环境中持续一定时间，使试管内外温度一致，再将酶溶液和蛋白质块（将鸡蛋煮熟后的蛋白部分切成的小块）倒入同一试管中混合，保温并记录蛋白质块消失所需的时间。 3．将酶溶液改成等量的蒸馏水，重复步骤2，并注意与步骤2的温度保持一致，进行对照实验。 4．作好观察记录。

你认为该方案存在哪些问题？（4点）

活细胞的细胞质处于不断流动的状态。利用光学显微镜观察细胞质的流动和存在细胞质中的叶绿体的形态和分布。试回答下列有关的实验中的问题。

（1）为了看清细胞质中叶绿体的形态和分布，显微镜的放大倍数宜选择

[　　]

A．物镜5×、目镜10×

B．物镜10×、目镜100×

C．物镜5×、目镜40×

D．物镜40×、目镜10×

（2）观察叶绿体时，取菠菜叶的下表皮而稍带些叶肉，稍带叶肉的主要原因是

[　　]

A．叶肉细胞中含有较多叶绿体

B．使叶肉细胞较少，便于观察

C．叶肉多，光合作用强

D．叶肉多，呼吸作用旺盛

（3）供观察用的绿藻，事先应放在光下培养，或者放在20～25℃的水中，这样处理的目的是

[　　]

A．光下培养，叶绿体向细胞周围运动

B．温度升高，细胞内代谢加快，细胞质流动加快

C．光下，叶绿体进行光合作用，产生氧气

D．温度升高，细胞质为透明的胶状物质

（4）实验过程中，应使材料随时保持有水状态，这样做的目的是：________。

（5）为了观察到细胞质的流动状态，采取的方法主要有

[　　]

A．改用凹面反光镜，扩大光圈

B．改用平面反光镜，缩小光圈

C．改用凹面反光镜，缩小光圈

D．改用平面反光镜，扩大光圈

（6）在显微镜下观察叶绿体时，也可看到细胞核和线粒体，其中细胞核与叶绿体相比，哪个体积大？________。线粒体与叶绿体相比，在细胞中较均匀分布的是________，黑暗时，向细胞中心移动的是________。