（08广东六校第三次联考）（15分）下列是有关酶的应用以及微生物的培养与应用等问题，请分析回答。

A、工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出果汁率，为研究温度对果胶酶活性的影响。某学生设计了如下实验：

①将果胶酶与苹果泥分装于不同试管，在10℃水浴中恒温处理10分钟（如图A）

②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10℃水浴中恒温处理10分钟（如图B）。

③将步骤②处理后的混合物过滤，收集滤液，测量果汁量（如图C）。

④在不同温度条件下重复以上实验步骤，并记录果汁量，结果如下表：

根据上述实验，请分析回答下列问题：

（1）果胶酶能破除细胞壁，是因为果胶酶可以促进细胞壁中果胶的水解，产物是      ___。

（2）实验结果表明，当温度为___________附近时，果汁量最多，此时果胶酶的活性_________。

（3）为什么该实验能够通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高低？

                                                                    _。

（4）果胶酶作用于一定量的某种物质（底物），保持温度、pH在最适值，生成物量与反应时间的关系如右图：在35分钟后曲线变成水平是因为                 。

若增加果胶酶浓度，其他条件不变，请在答题卷原图上画出生成物量变化的示意曲线。

B、在农业生产研究上，常需要进行微生物的培养和计数。

（1）右图是利用         法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步          分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：（至少答2项）        __。

（2）分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述           ­­­__ 成分，并加入葡萄糖和          物质。

（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下统计结果：

甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；

乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；

丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；

在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确？                  。

2．(17分)(2012·南昌一模)尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：

(1)如图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。除此方法外，常用的微生物接种方法还有________(写一种)。

(2)如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行________，灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是______________________。

(3)下面是两种培养基的配方：

表1：A培养基配方

表2：B培养基配方

①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。

a．倒平板　b．计算　c．溶化　d．称量　e．灭菌

②通常培养基采用____________法灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是________________________。

③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述________(A、B)配方的培养基，在该培养基中加入________指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。

④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是________。

(4)如果进一步从尿素分解菌中提取出DNA，利用PCR技术扩增，则每次循环复制可分为________________三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它们能合成________，该物质被提取出后的纯化方法通常是____________________________________________________。

(5)在微生物培养过程中，常需要对微生物进行计数，血球计数板是常用的工具，血球计数板的计数室长和宽各为1 mm，深度为0.1 mm，其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格位于计数室的____________________。下图表示的是其中一个中方格的情况，对该中方格中的酵母菌进行计数的结果是________个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数为20个，则1 mL培养液中酵母菌的总数为________个。

(6)抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27 ℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图A)，继续在同样条件下培养3天，结果如图B。分析结果，得出的结论是(　　)

①甲菌产生了抗生素　②丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制　③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制　④丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长

A．①③　　　　　　B．①④

C．②③　　　　　　D．②④

2．(17分)(2012·南昌一模)尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：

(1)如图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。除此方法外，常用的微生物接种方法还有________(写一种)。

(2)如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行________，灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是______________________。

(3)下面是两种培养基的配方：

表1：A培养基配方

表2：B培养基配方

①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。

a．倒平板　b．计算　c．溶化　d．称量　e．灭菌

②通常培养基采用____________法灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是________________________。

③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述________(A、B)配方的培养基，在该培养基中加入________指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。

④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是________。

(4)如果进一步从尿素分解菌中提取出DNA，利用PCR技术扩增，则每次循环复制可分为________________三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它们能合成________，该物质被提取出后的纯化方法通常是____________________________________________________。

(5)在微生物培养过程中，常需要对微生物进行计数，血球计数板是常用的工具，血球计数板的计数室长和宽各为1 mm，深度为0.1 mm，其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格位于计数室的____________________。下图表示的是其中一个中方格的情况，对该中方格中的酵母菌进行计数的结果是________个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数为20个，则1 mL培养液中酵母菌的总数为________个。

(6)抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27 ℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图A)，继续在同样条件下培养3天，结果如图B。分析结果，得出的结论是(　　)

①甲菌产生了抗生素　②丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制　③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制　④丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长

A．①③　　　　　　B．①④

C．②③　　　　　　D．②④

I（12分）美国科学家Sanger因发明了链终止．DNA测序法而再获诺贝尔奖。通过向DNA复制体系中加入能够终止新链延伸的某种脱氧核苷酸类似物，可以得到各种不同长度的脱氧核苷酸链，再通过电泳呈带（按分子量大小排列），从而读出对应碱基的位置。下图表示测定DNA新链中腺嘌呤位置的操作方法，据图作答：
[来源:学§科§网]
（1）操作的第一步是通过加热破坏             从而使DNA分子的双链打开，在细胞中这是在          酶的作用下完成的。
（2）根据图中的模板链，对应合成的最长新链的碱基序列是（自上而下读出）：     。
（3）要通过以上操作精确地测出DNA链上每一个碱基的位置，电泳分离结果必须能把
                  区分开来。
（4）为了能够从电泳结果直接读出模板链中鸟嘌呤的位置，进行以上操作时，应加入什么标记物?                 。扩增后将产生几种带标记的新链?              
Ⅱ（112分）植物在生长发育过程中常常表现出顶端优势，即顶芽具有优先生长的优势。为了探究同一枝条中是离根基部最远处（直线距离）的芽具有生长优势还是离地面最远处（垂直距离）的芽具有生长优势，某学习小组进行了一系列的探究活动。
方法步骤：
（1）初春，选择4根长势相似的葡萄一年生枝条，分别标记为甲、乙、丙、丁，每一枝条上留取3个茁壮的芽，从离根最远处依次标记为A、B、C。
（2）弯曲并绑扎固定甲、乙、丙、丁4根枝条，分别使A、B、C三个芽留取在枝条上：
显示出某种“顶端”的含义；其中甲、乙、丁的姿态如下图所示，试在方框内画出丙枝条的姿态并标出A、B、C三个芽的位置。

（3）结果预测及结论：
预测l：甲、乙、丙、丁中均为           芽发育成的新枝最长
结论：离根基部最远处（直线距离）的芽有生长优势。
预测2：甲中的A芽、乙中的C芽、丙中的      芽在枝条中发育成的新枝最长，丁中各芽发育成的新枝一样长。
结论：离地面最远处（垂直距离）的芽有生长优势。
预测3：甲中的A芽、乙中的A和C芽、丙中的A和B芽在各枝条中发育成的新枝都比较长，丁中的A、B、C芽发育成的新枝都一样长。
结论：                                                            
（4）在这个学习小组中，有人根据自己的实验假设预测了在同一时间内各个芽发育成的新枝长度，并根据自己的预测，在电脑上用Excel软件绘制出新枝的生长情况柱状图，如下图所示。

由上图分析可知，此人的预期是：甲、乙、丙枝上发育生长最快的芽依次是      
（填字母），此人的实验假设是：                                         。