（9分）回答下列关于微生物的问题。

营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷，必须在基本培养基（野生型菌株最低营养要求）中添加缺陷的营养物质（补充培养基）才能正常生长的一类突变株。基本培养基中加入一些营养物质，可以满足该微生物的各种营养缺陷型生长的培养基称为完全培养基。营养缺陷型在基础理论研究和生产应用中有广泛作用。青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成，可用于淘汰野生型菌株。筛选营养缺陷型菌株一般通过四个环节，即诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型。

1.取新活化枯草芽孢杆菌制备菌悬液，再用紫外线照射处理。下列关于将诱变后存活的个体培养，淘汰野生型菌株的做法和原理，正确的是（多选）

培养在含有青霉素的基本培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株

培养在含有青霉素的补充培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株

完全培养基中青霉素可以杀死野生型菌株，缺陷型菌株得以生存

补充培养基中缺陷型菌株可以生存，野生型菌株不能生存

基本培养基中野生型可以生长繁殖，青霉素将其杀死

基本培养基中缺陷型不可以生长繁殖，青霉素不能将其杀死

2.在培养皿倒上一层不含菌的基本培养基，待冷凝后加上一层含菌的基本培养基，其后再浇上一层不含菌的基本培养基。经培养后出现菌落，在皿底将菌落标记为A1、A2…，然后在其上再倒一薄层完全培养基，再培养，出现新的菌落，在皿底标记为B1、B2…，则A菌落与B菌落分别较可能是_______________、_______________（均选填野生型/突变型）。

3.将待测菌落处理后涂布于某培养基平板上培养，用灭菌牙签逐个挑取待测菌，先后点接于A培养基和B培养基平板上。前后位置及号码相对应。培养后观察。见图一。为检出营养缺陷型，A、B培养基应分别为__________培养基、__________培养基。菌落（      ）为营养缺陷型。 

4.为鉴定上步检出的营养缺陷型是哪种营养缺陷型，将待测菌种悬液涂于图二含有基本培养基的培养皿中，培养皿背面划线标注C、D、E三区。C、D、E为三滤纸片，分别浸有氨基酸混合液、维生素混合液和碱基混合液。培养后观察。当观察到________________________现象，说明是该营养缺陷型。图二培养基也可称为_________培养基。

5.如检测菌为碱基类营养缺陷型，要进一步鉴定是哪种碱基营养缺陷型，可同图二方法加浸该营养物质的滤纸片，如加浸________________的滤纸片。

 

某研究性小组研究的课题是“探究影响细菌生长繁殖的因素”。他们在培养细菌的过程中，发现某种细菌的生长和繁殖受营养成分和温度等条件的影响。
（1）研究小组工在探究温度对某种细菌的影响时，对细菌繁殖一代所需的时间（代时）与温度的关系做了有关的数据统计，见下列表格：

依据上表推测，适合该细菌繁殖的最适温度约为_____________。
（2）研究小组Ⅱ发现某种细菌有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质C，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如下表所示。+：表示生长 —：表示不生长
根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是____________。由于A—C所需的量很少，属于微生物所需营养要素中的___________。
（3）假定在细菌培养过程中，出现了某种突变的菌种，为了分离获得不能合成某种维生素的营养缺陷型菌株，设计一个实验以鉴定这种维生素的类型。
第一步：将变异菌株接种到____________培养基上扩大培养；
第二步：配制系列培养基。此时应将_____________设为实验的自变量；
第三步：将扩大培养的变异菌株______________________；
第四步：观察细菌的生长情况。在实验操作过程中自始至终要注意__________操作。
（4）实验结果分析：________________________________________________。

某研究性小组研究的课题是“探究影响细菌生长繁殖的因素”。他们在培养细菌的过程中，发现某种细菌的生长和繁殖受营养成分和温度等条件的影响。

（1）研究小组工在探究温度对某种细菌的影响时，对细菌繁殖一代所需的时间（代时）与温度的关系做了有关的数据统计，见下列表格：

温度（℃）	10	15	20	25	30	35	40	45	47．5	50
代时（分）	860	120	90	40	29	22	17．5	20	77	750

依据上表推测，适合该细菌繁殖的最适温度约为_____________。

（2）研究小组Ⅱ发现某种细菌有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质C，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如下表所示。+：表示生长  —：表示不生长

 

物质[来源:学§科§网Z§X§X§K] 突变体[来源:]	培养基中加入的物质
A	B	C	D	E	G
1	—	—	—	+	—	+
2	—	+	—	+	—	+
3	—	—	—	—	—	+
4	—	+	+	+	—	+
5	+	+	+	+	—	+

根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是____________。由于A—C所需的量很少，属于微生物所需营养要素中的___________。

（3）假定在细菌培养过程中，出现了某种突变的菌种，为了分离获得不能合成某种维生素的营养缺陷型菌株，设计一个实验以鉴定这种维生素的类型。

第一步：将变异菌株接种到____________培养基上扩大培养；

第二步：配制系列培养基。此时应将_____________设为实验的自变量；

第三步：将扩大培养的变异菌株______________________；

第四步：观察细菌的生长情况。在实验操作过程中自始至终要注意__________操作。

（4）实验结果分析：________________________________________________。