根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：

（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入      制成选择培养基进行分离。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是       。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是            。

（3）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在     期，花药培养成功率高。

（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是                ；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是                 。

（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的         分解。最终使         含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。

（09深圳市调研）（生物技术实践，10分）多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。

（1）DNA的两条链是反向平行的，通常将____________的末端称为5’端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的_________开始延伸DNA链。

（2）PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到__________________，它的发现和应用解决了上述问题；要将Taq细菌从其它普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫___________________________。

（3）PCR的每次循环可以分为__________________三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有_________个这样的DNA片段。

（4）请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。

（5）简述PCR技术的主要应用。

【生物—生物技术实践】

尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：

（1）右图是利用              法进行微生物接种，把聚焦的菌种逐步             分散到培养基的表面。

（2）如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行                 。

（3）下表是一种培养基配方

①配制培养基的操作步骤（      ）

a.调节pH          b．计算     c.溶化     d.称量         e.灭菌

A．a→b→c→d→e               B.e→b→d→c→a

C.b→d→c→a→e                D.b→d→c→e→a

②该培养基属于               培养基（多选）。

A．液体       B．固体        C．鉴定       D．选择     E.天然

③使用该培养基的目的是                               。

④在培养基中加入            指示剂，可初步鉴定出该种细菌能分解尿素。

（4）在进行分离分解尿素细菌的实验中，A同学从培养基筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有            。（多选）

A．由于土样不同     B．由于培养基污染     C．由于操作失误      D．没有设置对照