（09临沂市一模）(10分)【生物技术实践】

酵母菌等微生物在人类的日常生活中发挥着越来越大的作用。请回答下列问题：

（1）利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重络酸饵来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现色。在发酵过程中, 随着酒精度的提高, 发酵液逐渐呈现深红色, 原因是____________________________________。

（2）从野生酵母群中分离纯化酵母菌, 最常使用的接种方法是_________和___________两种。酵母菌适合生活在偏酸性环境, 而放线菌则适合生活在偏碱性环境中, 分离二者所用的培养基称为____________。

（3）对野生酵母菌进行诱变可筛选出具有耐高糖和耐酸性的高产突变菌株，利用PCR技术可大量获得突变菌所携带的特殊基因在PCR扩增反应中加入引物的作用是____________________________，加入 DNA 聚合酶的作用是_________________。

（4）使用固定化酶和固定化细胞技术可以提高固定化酶活性, 还可以反复使用。目前， 常用的方法有____________法、____________法和物理吸附法。

（08广州市综合测试）(生物技术实践专题，10分)

饮用水的质量问题是2007年最引人关注的问题之一。大肠菌群是一群以大肠埃希氏菌为主的需氧及兼性厌氧细菌。大肠菌群指数(c。U―index)指1升水中含有的大肠菌群数。大肠菌群指数常用于饮用水、食品、饮料等的卫生检测。检测中规定生活饮用水的水质标准为1升水中大肠菌群不得超过3个，即大肠菌群指数不得大于3。

某人在测定自来水中的大肠杆菌群时，先将5升自来水水样浓缩至5毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到4个培养皿中培养，4次培养后计数的菌落数分别是32、38、35、8。请回答下列问题：

（1）根据上述结果计算，被检水样大肠菌群指数为        ，水样    (是、否)达标。

（2）下表是某公司研发的一种测定大肠菌群的配方(g／L)。

从成分看，该培养基的类型是           培养基，可以推测培养基配方中的营养物质应包括碳源、氮源和            。

（3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和稀释平板涂布法，但无论哪种接种方法，其主要目的都是防止杂菌污染，请指出灭菌和消毒这两种方法的差异。

                                                                         。

（4）利用培养基技术不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。请简要说明这两项技术应用设计思路的相同点以及区别。

相同点：                                                         。

不同点：                                                         。

（5）现有一种珍稀兰花，请简述如何通过组织培养获得脱毒苗。

                                                                 。

（09吉林市一检）Ⅰ（8分）德国科学家豪森是2008年生理学或医学奖获奖者之一。他的研究证实宫颈癌和人乳头状瘤病毒（HPV）之间存在联系，为宫颈癌疫苗的研制奠定了基础。现在宫颈癌疫苗已经开发出来，使宫颈癌成为人类可以预防和根除的第一种恶性肿瘤。

（1）理论上讲，可以先将纯化的HPV在_________________________中培养、增殖。收获病毒后用灭活剂杀死，但要确保灭活HPV的_________________不被破坏，并且能被人的免疫细胞识别。这样就能得到预防宫颈癌的疫苗了。

（2）HPV疫苗的作用是使一部分淋巴细胞在反应阶段形成_______，当HPV病毒再次入侵时，机体能产生更强的特异性免疫反应，即____________免疫。

Ⅱ（12分）科学技术的进步，使人们的梦想不断成真，一些始料未及的环境问题也随之摆在了人类面前。2007年入夏以来，中国污染最为严重的太湖、巢湖、滇池等相继出现蓝藻爆发，向人们敲响了环保的警钟。中科院正致力于污染处理问题。

（一）蓝藻爆发时，湖面漂浮着一层绿膜，故有人认为这是绿藻而不是蓝藻，二者在细胞结构上最主要的区别是                          。

（二）从生态系统的成分看，蓝藻属于       ，若从生态系统的营养结构上看，蓝藻处于　　   　。

（三）大范围蓝藻爆发的现象在生态学上称为富营养化，其根本原因是由于大量工业和生活污水的排放，超过了湖泊生态系统      的限度。某些蓝藻会产生并分泌毒素,是该生物的     （初级或次级）代谢产物,对鱼类等水生动物造成危害，甚至可以通过食物链累积危害至牲畜乃至人类，例如：蓝藻毒素对人是一种致癌因子，可使　　　从抑制状态变成激活状态，导致正常细胞发生癌变。实践证明，只有终止污染物的排放，之后利用生态系统的      稳定性，再辅以必要的人工治理措施，才有可能根治这种“绿色污染”。

（四）科研人员试图利用某种细菌限制蓝藻数量，相关实验的示意图如下。

图中①－⑥表示实验步骤。

（1）在接种之前，应对培养基进行           。若从微生物的营养角度分析，培养蓝藻，与培养乳酸菌的培养基的显著不同是                。

（2）图中②、⑤通常接种的是①、④中已培养至　　　　期的蓝藻和溶藻细菌。 

（3）图中⑤实验组在每个培养皿中，如果做三个重复实验，可采取的做法是：在每个培养皿中，选择三个不同位置，各滴加等量的溶藻细菌培养液。为完善实验设计方案，应增设对照组，可采取的做法是：在每个培养皿中，选择三个不同位置，各滴加　　　　　　　　　            　　。

（4）蓝藻通常呈蓝绿色，观察实验结果，发现培养皿中出现褪色空斑，说明蓝藻　　　　　　　　　　。