（11分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_____末端。过程②必需的酶是       酶，过程③必需的酶是      酶。
（2）在利用AB获得C的过程中，必须用             切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入        ，才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是__             ___。
（3）为使过程⑧更易进行，可用      （药剂）处理D。
（4）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___      ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____，常用抗原-抗体杂交技术。
（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？     。
原因是                                                    。
（2）过程②称为                   。
（3）为使过程⑧更易进行，可用      处理D。
（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

①将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是                         。（2分，）
②在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是                 。
（5）若要使A在体外通过③④⑤过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是             。（2分）除酶外还需要加入引物，其作用是                                 。（2分）

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？     。

原因是                                                    。

（2）过程②称为                   。

（3）为使过程⑧更易进行，可用      处理D。

（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

①将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是                         。（2分，）

②在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是                 。

（5）若要使A在体外通过③④⑤过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是             。（2分）除酶外还需要加入引物，其作用是                                 。（2分）

（11分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_____末端。过程②必需的酶是        酶，过程③必需的酶是       酶。

（2）在利用AB获得C的过程中，必须用              切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入         ，才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是__              ___。

（3）为使过程⑧更易进行，可用       （药剂）处理D。

（4）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___       ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____，常用抗原-抗体杂交技术。

（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图回答。

   （1）在基因工程操作程序中，图中①②表示        ，⑦表示       ，⑧表示          ，⑩表示目的基因的检测与鉴定。不能利用人的唾液腺细胞来完成①过程的原因是          。

   （2）过程②必需的酶是         酶。过程③是DNA受热             后解链为单链，③④⑤表示的PCR技术需要的条件有：模板DNA、四种脱氧核苷酸、          、       、稳定的缓冲液和严格的温度控制设备。

   （3）在利用A和B获得C的过程中，必须用      切割A和B，使它们产生             ，再加入          ，才可以形成C。

   （4）基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在DNA水平上检测的方法是     。在蛋白质水平上进行检测的方法是从大肠杆菌中提取蛋白质，进行             ，观察是否产生杂交带。

   （5）为使过程⑧更易进行，可用Ca²⁺处理D，使其成为       细胞。