40．【生物—选修3：现代生物科技专题】（15分）

       使用DNA重组技术，把天然或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗称为基因工程疫苗。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面A蛋白为主要抗原，其基因工程疫苗生产流程如图30。请回答：

       （1）过程①表示             。

（2）可能利用               技术扩增获得A基因。使用该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列来合成           。还需要有耐热的         酶。扩增时DNA解链的温度应控制在        ℃。而互补链延伸时的温度应控制在           ℃。

（3）过程③构建A基因重组载体时，除了A基因外，还必须有      、     和      基因等。这一过程需要使用            和               这两种工具酶。

（4）过程④中选用大肠杆菌作为受体细胞，最常见的转化方法是：用              处理，得到          细胞，再将经过处理的细胞与溶有A基因重组表达载体的缓冲溶液混合，并控制在一定的温度使之完成转化。

（5）可用             技术检测受体细胞菌的DNA上是否插入了A基因，要检测A基因是否成功表达还需检测受体细菌                   。