回答关于基因工程的问题

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示

（1）口蹄疫病毒的VP1蛋白进入动物体内，能引起机体产生特异性免疫反应。VP1蛋白在免疫反应中称为            。

（2）口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，要获得VP1基因可用               的方法合成DNA，再用限制性核酸内切酶将VP1基因片段切下。

（3）如下图所示，若用2种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从合成的DNA上切下VPI目的基因，并将之取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E—F区域 （0.2kb），那么所形成的重组质粒pZHZ2___________。

A．既能被E也能被F切开               B．能被E但不能被F切开

C．既不能被E也不能被F切开           D．能被F但不能被E切开

（4）已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0．8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O．5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据下表所列酶切结果判断VPI目的基因的大小为        kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在下图中。

（5）上述目的基因模板链中的TGA序列对应1个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是            。

（6）过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和                   等激素外，还需要添加   筛选出含有重组质粒的叶片小段。

（7）获得表达VP1蛋白的番茄植株以后，需要进行免疫效力的测定。具体方法是：将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射1次，3次后检测豚鼠血液内产生的             的数量。为了使结果可信，应设2组对照，分别注射          和          。

真核细胞的基因由编码区和非编码区两部分组成（如下图一示），其中编码区包括能够编码蛋白质的序列（外显子）和较易不能够编码蛋白质的序列（内含子）。在真核细胞基因表达时，首先由DNA转录出前驱ｍRNA，然后经过裁接（将内含子的转录部分切除并将外显子的转录部分连接起来）才能形成成熟的ｍRNA。但在裁接时有可能会发生选择性裁接（在裁接时可能会同时切除某一个或几个外显子的转录部分，即形成不同的裁接形式）和RNA编辑（将前驱ｍRNA上的核苷酸序列加以修改，包括碱基置换或碱基增减）。选择性裁接和RNA编辑的存在，进一步增加了蛋白质结构和功能的多样性。请分析回答：

（1）由于DNA分子的双链靠碱基之间的的氢键相结合，因而增强了DNA分子结构的稳定性。下列双链DNA结构在复制时，最不容易解旋的是（   ）

A                  B                  C

（2）选择性裁接和RNA编辑作用发生在细胞中的____________（部位）。

（3）人的apoB基因在肝细胞中表达出apoB－100蛋白质（数字表示该蛋白质含有的氨基酸数），但是在小肠细胞中， apoBｍRNA上靠近中间位置的某一个“－CAA”密码子上的“C”被编辑为“U”，因此只能表达出apoB－50蛋白质。下列有关分析中正确的是（  ）（多选）

A．apoB基因含有606个脱氧核苷酸；

B．apoB基因在肝细胞中转录的ｍRNA长度约是小肠细胞中转录的ｍRNA长度的2倍

C．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质有50个氨基酸完全一样

D．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质都是apoB基因的表达产物

E．apoB－50蛋白质的产生是因为apoB基因在转录时发生选择性裁接的结果

（4）科学家将人的生长激素基因导入大肠杆菌以获取人生长激素（如图二）。已知限制酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—。

①目的基因可以通过____________方法获取。

②重组质粒构建过程中需要用到的酶包括___________酶和___________酶。

③据图分析，在构建基因表达载体过程中，应选用____________（限制酶I / 限制酶II）切割质粒。

④成功导入该重组质粒的细菌能否生长在含四环素的培养基上？____________；能否生长在含抗氨苄青霉素素的培养基上？____________；根据此原理可完成转基因工程的筛选（工程菌）环节。

（5）如果某基因中的一个碱基发生突变，则突变基因控制合成的蛋白质与正常蛋白（正常基因控制合成）相比____________（一定/不一定）不同，并说明两点理由？

① ________________________；②________________________。

真核细胞的基因由编码区和非编码区两部分组成（如下图一示），其中编码区包括能够编码蛋白质的序列（外显子）和较易不能够编码蛋白质的序列（内含子）。在真核细胞基因表达时，首先由DNA转录出前驱ｍRNA，然后经过裁接（将内含子的转录部分切除并将外显子的转录部分连接起来）才能形成成熟的ｍRNA。但在裁接时有可能会发生选择性裁接（在裁接时可能会同时切除某一个或几个外显子的转录部分，即形成不同的裁接形式）和RNA编辑（将前驱ｍRNA上的核苷酸序列加以修改，包括碱基置换或碱基增减）。选择性裁接和RNA编辑的存在，进一步增加了蛋白质结构和功能的多样性。请分析回答：




（1）由于DNA分子的双链靠碱基之间的的氢键相结合，因而增强了DNA分子结构的稳定性。下列双链DNA结构在复制时，最不容易解旋的是（  ）
A                 B                  C
（2）选择性裁接和RNA编辑作用发生在细胞中的____________（部位）。
（3）人的apoB基因在肝细胞中表达出apoB－100蛋白质（数字表示该蛋白质含有的氨基酸数），但是在小肠细胞中， apoBｍRNA上靠近中间位置的某一个“－CAA”密码子上的“C”被编辑为“U”，因此只能表达出apoB－50蛋白质。下列有关分析中正确的是（ ）（多选）
A．apoB基因含有606个脱氧核苷酸；
B．apoB基因在肝细胞中转录的ｍRNA长度约是小肠细胞中转录的ｍRNA长度的2倍
C．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质有50个氨基酸完全一样
D．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质都是apoB基因的表达产物
E．apoB－50蛋白质的产生是因为apoB基因在转录时发生选择性裁接的结果
（4）科学家将人的生长激素基因导入大肠杆菌以获取人生长激素（如图二）。已知限制酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—。
①目的基因可以通过____________方法获取。
②重组质粒构建过程中需要用到的酶包括___________酶和___________酶。
③据图分析，在构建基因表达载体过程中，应选用____________（限制酶I / 限制酶II）切割质粒。
④成功导入该重组质粒的细菌能否生长在含四环素的培养基上？____________；能否生长在含抗氨苄青霉素素的培养基上？____________；根据此原理可完成转基因工程的筛选（工程菌）环节。
（5）如果某基因中的一个碱基发生突变，则突变基因控制合成的蛋白质与正常蛋白（正常基因控制合成）相比____________（一定/不一定）不同，并说明两点理由？
①________________________；②________________________。

真核细胞的基因由编码区和非编码区两部分组成（如下图一示），其中编码区包括能够编码蛋白质的序列（外显子）和较易不能够编码蛋白质的序列（内含子）。在真核细胞基因表达时，首先由DNA转录出前驱ｍRNA，然后经过裁接（将内含子的转录部分切除并将外显子的转录部分连接起来）才能形成成熟的ｍRNA。但在裁接时有可能会发生选择性裁接（在裁接时可能会同时切除某一个或几个外显子的转录部分，即形成不同的裁接形式）和RNA编辑（将前驱ｍRNA上的核苷酸序列加以修改，包括碱基置换或碱基增减）。选择性裁接和RNA编辑的存在，进一步增加了蛋白质结构和功能的多样性。请分析回答：

（1）由于DNA分子的双链靠碱基之间的的氢键相结合，因而增强了DNA分子结构的稳定性。下列双链DNA结构在复制时，最不容易解旋的是（   ）

A                  B                  C

（2）选择性裁接和RNA编辑作用发生在细胞中的____________（部位）。

（3）人的apoB基因在肝细胞中表达出apoB－100蛋白质（数字表示该蛋白质含有的氨基酸数），但是在小肠细胞中， apoBｍRNA上靠近中间位置的某一个“－CAA”密码子上的“C”被编辑为“U”，因此只能表达出apoB－50蛋白质。下列有关分析中正确的是（  ）（多选）

A．apoB基因含有606个脱氧核苷酸；

B．apoB基因在肝细胞中转录的ｍRNA长度约是小肠细胞中转录的ｍRNA长度的2倍

C．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质有50个氨基酸完全一样

D．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质都是apoB基因的表达产物

E．apoB－50蛋白质的产生是因为apoB基因在转录时发生选择性裁接的结果

（4）科学家将人的生长激素基因导入大肠杆菌以获取人生长激素（如图二）。已知限制酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—。

①目的基因可以通过____________方法获取。

②重组质粒构建过程中需要用到的酶包括___________酶和___________酶。

③据图分析，在构建基因表达载体过程中，应选用____________（限制酶I / 限制酶II）切割质粒。

④成功导入该重组质粒的细菌能否生长在含四环素的培养基上？____________；能否生长在含抗氨苄青霉素素的培养基上？____________；根据此原理可完成转基因工程的筛选（工程菌）环节。

（5）如果某基因中的一个碱基发生突变，则突变基因控制合成的蛋白质与正常蛋白（正常基因控制合成）相比____________（一定/不一定）不同，并说明两点理由？

① ________________________；②________________________。