白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性人白细胞介素。

（1）在体液免疫过程中，白细胞介素是由＿＿＿细胞分泌的，可作用于受到抗原刺激的B细胞，使B细胞增殖，分化、形成＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿细胞。

   （2）目的基因获取：从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37°C培养48h，提取细胞总RNA，生成eDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成eDNA时所加反应物不同的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 。

   （3）重组载体的构建：用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后，用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿酶处理，形成重组载体。该载体与细胞膜上载体的化学本质分别是＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。

   （4）将重组载体导入酵母细胞，在培养液中培养一段时间后，收集菌液离心取＿＿＿＿＿＿（上清液/菌体）进行产物鉴定。若要统计培养液中酵母菌的活菌数目，常用的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

   （5）利用纯化的产物进行细胞培养实验，可研究人白细胞介素对于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 的作用。

（18分）白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性人白细胞介素。

（1）在体液免疫过程中，白细胞介素是由＿＿＿细胞分泌的，可作用于受到抗原刺激的B细胞，使B细胞增殖，分化、形成＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿细胞。
（2）目的基因获取：从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37°C培养48h，提取细胞总RNA，生成eDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成eDNA时所加反应物不同的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 。
（3）重组载体的构建：用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后，用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿酶处理，形成重组载体。该载体与细胞膜上载体的化学本质分别是＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。
（4）将重组载体导入酵母细胞，在培养液中培养一段时间后，收集菌液离心取＿＿＿＿＿＿（上清液/菌体）进行产物鉴定。若要统计培养液中酵母菌的活菌数目，常用的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（5）利用纯化的产物进行细胞培养实验，可研究人白细胞介素对于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 的作用。

白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性的人白细胞介素。

（1）目的基因获取和扩增：

①从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37℃培养48h，提取细胞总RNA，经???????????? 作用生成cDNA。

②根据已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成cDNA时所加反应物不同的是????? （至少写出两种）。

（2）重组载体的构建：由图中可知：酶切载体和目的基因用的是___________酶，经DNA连接酶处理，形成重组载体。重组载体的化学本质是????????????

（3）将重组载体导入酵母细胞，在培养液中培养一段时间后，利用纯化的产物进行细胞培养实验，可研究人的白细胞介素对于???????????? 的作用。

（18分）白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中，使其分泌出有活性人白细胞介素。

（1）在体液免疫过程中，白细胞介素是由＿＿＿细胞分泌的，可作用于受到抗原刺激的B细胞，使B细胞增殖，分化、形成＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿细胞。

   （2）目的基因获取：从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞，于37°C培养48h，提取细胞总RNA，生成eDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列，合成引物、通过PCR扩增获取目的基因，此时需要加入的反应物与生成eDNA时所加反应物不同的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 。

   （3）重组载体的构建：用两种限制酶EcoR1与EcoR52处理载体和目的基因后，用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿酶处理，形成重组载体。该载体与细胞膜上载体的化学本质分别是＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。

   （4）将重组载体导入酵母细胞，在培养液中培养一段时间后，收集菌液离心取＿＿＿＿＿＿（上清液/菌体）进行产物鉴定。若要统计培养液中酵母菌的活菌数目，常用的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

   （5）利用纯化的产物进行细胞培养实验，可研究人白细胞介素对于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 的作用。