用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是     （   ）

A．不能用限制性核酸内切酶切割烟草茶花叶病毒的核酸

B．可用DNA连接酶连接经限制酶切割的抗除草剂基因和载体

C．可用显微注射法将重组DNA分子导入烟草的原生质体

D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞

用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是    （  ）

Ⅰ、（12分）有一种病人不能抵抗疾病，只能生活在无菌室里，如果离开无菌室，就会受到病毒感染而死亡。原因是其体内缺乏一种腺苷酶基因。其治疗方案如右图所示。
（1）仿照上述方案设计一个为某男性患者治疗血友病的方案，请完成有关步骤：
第一步：取出患者的皮肤细胞进行细胞培养；
第二步：提取目的基因；
第三步：                             
第四步：将重组体（即重组DNA）导入受体细胞，即让这种携带有正常凝血因子基因的无害病毒去感染在体外培养的                   
第五步：根据病毒上的标记基因检测皮肤细胞是否导入了正常凝血因子基因，并检测是否产生了                 
第六步：将含有目的基因的皮肤细胞扩大培养，当各种指标达到要求后，再与胶原细胞混合，制成注射针剂。将含有这种活细胞的针剂注射到患者体内，并在患者体内表达，使患者的凝血因子达到可以止血的含量。
（2）基因工程中常用到的受体细胞有细菌、真菌和动植物细胞等，此处取患者本人的皮肤细胞作为受体细胞进行培养，是为了防止发生          。

（3）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。两两片段间连接产物中至少有         种环状DNA分子。它们分别是                                  
                          。
Ⅱ、（10分）如图为高等动物细胞亚显微结构模式图。请据图作答：
（1）若此图示旺盛分泌肠液（含多种消化酶）的小肠上皮细胞，则其形态结构必然具有下列         （填序号）特点。
①细胞分泌面有较多的皱褶；②皱褶下和内质网附近分布着较多的线粒体；③细胞的内质网与高尔基体很发达；④细胞内核糖体丰富。
（2）如果该细胞是效应B细胞，培养在含放射性标记的某种氨基酸的培养基中，之后在产物中检测到带有放射性的抗体。放射性出现的先后顺序应该是          
（可供选择的物质和结构是①细胞核  ②核糖体  ③染色体  ④线粒体  ⑤内质网  ⑥细胞膜  ⑦中心体  ⑧高尔基体）
（3）若此图示衰老的细胞，除细胞核体积增大外，细胞膜发生的变化是                      
                     。

（4）右图为该细胞进行细胞分裂过程中不同时期的细胞图像，则该高等动物的性别是       ，其体细胞中染色体数目是         。

Ⅰ、（12分）有一种病人不能抵抗疾病，只能生活在无菌室里，如果离开无菌室，就会受到病毒感染而死亡。原因是其体内缺乏一种腺苷酶基因。其治疗方案如右图所示。

（1）仿照上述方案设计一个为某男性患者治疗血友病的方案，请完成有关步骤：

第一步：取出患者的皮肤细胞进行细胞培养；

第二步：提取目的基因；

第三步：                              

第四步：将重组体（即重组DNA）导入受体细胞，即让这种携带有正常凝血因子基因的无害病毒去感染在体外培养的                   

第五步：根据病毒上的标记基因检测皮肤细胞是否导入了正常凝血因子基因，并检测是否产生了                  

第六步：将含有目的基因的皮肤细胞扩大培养，当各种指标达到要求后，再与胶原细胞混合，制成注射针剂。将含有这种活细胞的针剂注射到患者体内，并在患者体内表达，使患者的凝血因子达到可以止血的含量。

（2）基因工程中常用到的受体细胞有细菌、真菌和动植物细胞等，此处取患者本人的皮肤细胞作为受体细胞进行培养，是为了防止发生           。

（3）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。两两片段间连接产物中至少有          种环状DNA分子。它们分别是                                   

                           。

Ⅱ、（10分）如图为高等动物细胞亚显微结构模式图。请据图作答：

（1）若此图示旺盛分泌肠液（含多种消化酶）的小肠上皮细胞，则其形态结构必然具有下列          （填序号）特点。

①细胞分泌面有较多的皱褶；②皱褶下和内质网附近分布着较多的线粒体；③细胞的内质网与高尔基体很发达；④细胞内核糖体丰富。

（2）如果该细胞是效应B细胞，培养在含放射性标记的某种氨基酸的培养基中，之后在产物中检测到带有放射性的抗体。放射性出现的先后顺序应该是           

（可供选择的物质和结构是①细胞核  ②核糖体  ③染色体  ④线粒体  ⑤内质网  ⑥细胞膜  ⑦中心体  ⑧高尔基体）

（3）若此图示衰老的细胞，除细胞核体积增大外，细胞膜发生的变化是                       

                      。

（4）右图为该细胞进行细胞分裂过程中不同时期的细胞图像，则该高等动物的性别是        ，其体细胞中染色体数目是          。

Ⅰ、有一种病人不能抵抗疾病，只能生活在无菌室里，如果离开无菌室，就会受到病毒感染而死亡。原因是其体内缺乏一种腺苷酶基因。其治疗方案如右图所示。

（1）仿照上述方案设计一个为某男性患者治疗血友病的方案，请完成有关步骤：

第一步：取出患者的皮肤细胞进行细胞培养；

第二步：提取目的基因；

第三步：                              

第四步：将重组体（即重组DNA）导入受体细胞，即让这种携带有正常凝血因子基因的无害病毒去感染在体外培养的                   

第五步：根据病毒上的标记基因检测皮肤细胞是否导入了正常凝血因子基因，并检测是否产生了                 

第六步：将含有目的基因的皮肤细胞扩大培养，当各种指标达到要求后，再与胶原细胞混合，制成注射针剂。将含有这种活细胞的针剂注射到患者体内，并在患者体内表达，使患者的凝血因子达到可以止血的含量。

（2）基因工程中常用到的受体细胞有细菌、真菌和动植物细胞等，此处取患者本人的皮肤细胞作为受体细胞进行培养，是为了防止发生           。

（3）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。两两片段间连接产物中至少有          种环状DNA分子。它们分别是                                   

                           。

Ⅱ、如图为高等动物细胞亚显微结构模式图。请据图作答：

（1）若此图示旺盛分泌肠液（含多种消化酶）的小肠上皮细胞，则其形态结构必然具有下列          （填序号）特点。

①细胞分泌面有较多的皱褶；②皱褶下和内质网附近分布着较多的线粒体；③细胞的内质网与高尔基体很发达；④细胞内核糖体丰富。

（2）如果该细胞是效应B细胞，培养在含放射性标记的某种氨基酸的培养基中，之后在产物中检测到带有放射性的抗体。放射性出现的先后顺序应该是           

（可供选择的物质和结构是①细胞核  ②核糖体  ③染色体  ④线粒体  ⑤内质网  ⑥细胞膜  ⑦中心体  ⑧高尔基体）

（3）若此图示衰老的细胞，除细胞核体积增大外，细胞膜发生的变化是                       

                      。

（4）右图为该细胞进行细胞分裂过程中不同时期的细胞图像，则该高等动物的性别是        ，其体细胞中染色体数目是          。