（11分）基础知识填空：

⑴目的基因导入植物细胞的方法除了农杆菌转化法，还有          法和        法。

⑵目前采用           技术来进行作物脱毒，其原理是植物         附近病毒极少，甚至无病毒，操作过程需要在无菌条件下进行以防止          。

⑶动物细胞培养与早期胚胎培养时，除了必需的营养成分外，通常都需要在培养液中添加       ，以促进细胞的生长和增殖。

⑷早期胚胎发育过程中：桑椹胚阶段之前的每一个细胞都属于        细胞；囊胚期的       细胞，将来发育成胎儿的各种组织；原肠胚时期出现     分化。

⑸ES细胞在          细胞上，或在添加抑制因子的培养液中，能维持不分化状态。

⑹为了实现可持续发展，人类的经济发展必须走生态经济之路，生态经济主要实行循环经济的原则，而实现“循环经济”最重要的手段之一是          。

图1为某人体细胞亚显微结构示意图，图2为细胞内某生理过程示意图。请据图回答下列问题(［  ］内填序号或字母，“_____”上填文字)：

 图2

（1）、若图1细胞为胰岛细胞，其产生的胰岛素主要以___ ___  _的方式从胰岛细胞出来。若胰岛素由a个氨基酸构成，控制胰岛素合成的基因含有b个胸腺嘧啶，则该基因至少含有_______个鸟嘌呤。若一个该基因被提取至体外，采用PCR技术进行人工扩增得100个，则所提供的原料中至少含有

       个游离的鸟嘌呤。

(2)、观察图2 (图中甲表示甲硫氨酸，丙表示丙氨酸)，该图所示的生理过程称____________，所用的原料是______________。

(3)甲硫氨酸的密码子是______________。连接甲和丙的化学键④的结构简式是______________。

(4)③中尿嘧啶和腺嘌呤的和占52%，则可得出与③合成有关的DNA分子胞嘧啶占______________。

(5)下列细胞中不能发生该生理过程的是________。

A．根毛细胞                   B．浆细胞

C．人体成熟的红细胞           D．大肠杆菌细胞

（6）写出与图2所对应的基因中模板链的碱基序列                                

微生物发酵在工业生产上得到广泛应用，其生产流程如下图所示。结合赖氨酸或谷氨酸的生产实际，回答相关问题：?

（1）人工控制微生物代谢的措施包括                 和                   。目前采用①           已经选育出不能合成高丝氨酸脱氢酶的                       。?

（2）在发酵过程中，产物源源不断地产生。这说明赖氨酸或谷氨酸的生产采用了               的发酵方式。在生产过程中，由于赖氨酸或谷氨酸的发酵菌种为                    ，常需增加通氧量。当发酵生产的产品是代谢产物时，还要采用②           等分离提纯的方法进行提取。

（10分）mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。现用两种限制性核酸内切酶M和N切割某人的mtDNA（限制酶M和N的识别序列和切割位点如图1所示），然后通过凝胶电泳分离DNA片段（通电状态下，不同分子量的DNA片段在琼脂中的移动距离不同从而被分离），分析后得到下表。

（1）该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中，M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

（2）M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接，请将连接的结果表示出来：_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割，请简述理由：________________________________________。

（3）图2为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。现用酶切法直接从供体细胞中切割图2中的基因从而获得目的基因，可选用酶______来切割。这个方法虽然操作方便，但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此，目前往往采用逆转录的人工合成的方法，其基本步骤是：__________________。

图2

（4）已知图2中Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G 和C的总数共有400个，则由该区转录的mRNA中A和U总数是_____________。

苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的苹果原醋，再兑以苹果汁等原料而成的饮品。既有淡淡的醋味，又有果汁的香甜，喝起来非常爽口。苹果醋还能保健养生、改善疲劳、美容养颜，是目前大众非常喜爱的饮品。下图是苹果醋的制作简图，据图回答_：

(1) 在图中苹果汁的生产中，为了提高出汁率需要添加的酶是______________。
(2) 过程①中使用到的微生物是____________ ___  __，为了提高该微生物的利用率，最好用固定化细胞技术中的 ______________法对其进行固定。若要检测是否产生了苹果酒可用___________试剂进行检测。
(3) 过程②和过程③中起作用的微生物都是_______，但过程②和过程③该微生物分解的碳源不同，过程②和过程③的碳源分别是_______、_______，产生醋时该微生物可以从食醋中分离纯化获得，具体方法是：
第一步：配置培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的基本营养成分。
第二步：对培养基用_______方法进行灭菌。
第三步：接种。微生物常用的接种方法有_______、_______
第四步：培养。温度控制在_______培养时是否需要提供氧气？_______。一般应采用平板倒置培养，原因是 _____________________。
第五步：挑选符合要求的菌落。
(4)用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率主要取决于_______；_______，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响;在对新鲜胡萝卜进行干燥时，要注意控制___  ____，否则会引起胡萝卜素的分解。