［选修一:生物技术实践专题］（15分）

尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答：?

（1）此培养基能否用于植物组织培养？       ，理由是                         。

（2）培养基中加入尿素的目的是筛选           ，这种培养基属于          培养基。

（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的        和         ，实验需要振荡培养，原因是                   。?

（4）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用     的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（5）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是       ，需要消毒的是       （填序号）。①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管 ③实验操作者的双手

（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有      （填序号）。

①土样不同  ②培养基污染  ③操作失误  ④没有设置对照?

（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行               处理后，才能倒掉。

以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是(　　)

A．在大肠杆菌的分离和培养实验中，划线后盖好培养皿，须将培养皿倒置培养

B．某同学用带盖的瓶子制备葡萄酒的过程中，每隔12小时左右将瓶盖拧松一次，其目的是向瓶中通气，以保证微生物的发酵

C．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后，倒平板

D．可以用稀释涂布平板法来测定某土壤溶液活菌数目

请从A、B两题中任选一题做答，并将答案按顺序填在答题纸上。

A:【现代生物科技专题】

胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。

    哺乳动物精子的发生是在_____________内完成的，精子细胞中的______________在变形过程中发育成顶体。

    在受精的过程中，为防止多精入卵，卵子会发生_____________和_________________两道屏障。

    受精后，合子即在_______________内进行有丝分裂，开始发育，从_______________期起细胞开始出现分化，在_______________期后，透明带破裂，胚胎完成孵化。

B:【生物——生物技术实践】

下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题：

选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用___________期的花粉可提高成功率。选择花粉时，一般要通过____________来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是____________。

上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中____________。

胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度____________的薄壁细胞，胚状体与____________发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。

无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项中哪些需要高温灭菌________________________（填编号）。

①培养基，②培养皿，③接种环，④花蕾，⑤实验操作者的双手，⑥三角锥形瓶

（10分）请在以下I、II两个题目中任选一题作答。

I．生物技术实践

能源甘蔗是生产燃料酒精的优质原料，可通过下图过程快速繁殖；为了提高酒精产量，还需要耐高糖和耐酸性的酵母菌菌种。请回答下面的问题：

(1)对甘蔗外植体常用_______和_________进行消毒；对培养用的器皿常用_________方法进行灭菌。

(2)在组织培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_______________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入______________染料培养几种菌，培养基中出现________________，就可以鉴定其中含有能分解纤维素的细菌。

(3)为了获得理想的酵母菌菌种，所用的培养基要额外添加____________，凋低______________。从功能上说，此培养基属于____________________。

Ⅱ．现代生物科技专题

下图表示构建转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程。请据图回答问题：

(1)图示过程涉及的生物技术有_____________、_____________、___________。

(2)①过程使用的工具酶有________________________；构建的基因表达载体除含有人抗体基因、标记基因外，还应具有_____________________。

(3)向转基因小鼠注射特定的抗原后，从小鼠的_____中提取B淋巴细胞；②过程通常用______诱导。

(4)细胞X是_________________________．体外培养细胞X所用的培养液必须添加_________________等天然成分，培养过程中会产生接触抑制吗？

【生物―――选修１生物技术实践】（15分）农村中泡菜的制作方法是：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处，最适环境温度为28～30 ℃。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”，前者是用盐过多，后者是用盐过少。在实验室或工厂化生产泡菜时，还要跟踪检测泡菜腌制过程中产生的亚硝酸盐含量。

（1）用白酒擦拭泡菜坛的目的是_________________。

（2）若要获得大量乳酸菌菌种，应选用培养基培养，培养基中应有____________、________、水、无机盐等营养，同时还必须满足________、________等具体培养条件的要求。

（3）菜坛为要密封的原因是_________________________。若菜坛有裂缝，可能会出现的结果是____________________。加入“陈泡菜水”的作用是_______________________。

（4）若制作的泡菜特别咸而不酸，最可能的原因是_________，如何调整_____________。

（5）关于测定亚硝酸盐含量实验操作的有关叙述，正确的是（　　）

    A．泡菜制作需要配制盐水，其中盐与水的质量比为4∶1

B．在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料

    C．制备样品处理液，加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质，得到澄清溶液

D．泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐的用量不影响其含量