T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T₁代）。
（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除      ，因为后者产生的       会抑制侧芽的生长。
（2） 为筛选出已转化的个体，需将T代播种在含       的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T代）。
（3） 为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T代播种在含       的培养基上，获得所需个体。
（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与     植株进行杂交，再自交      代后统计性状分离比。
（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，
从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性      。
（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取     植株的DNA，用限制酶处理后，再用      将获得的DNA片段连接成环（如右图）以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取   作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

图表 1环状DNA示意图
A、B、C、D表示能与相应T－DNA链互补、长度相等的单链DNA片段；箭头指示DNA合成方向。

31.（16分）T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T₁代）。

（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除       ，因为后者产生的        会抑制侧芽的生长。

（2）为筛选出已转化的个体，需将T 代播种在含        的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T₂代）。

（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T 代播种在含        的培养基上，获得所需个体。

（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与      植株进行杂交，再自交       代后统计性状分离比。

（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性       。

（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取      植株的DNA，用限制酶处理后，再用       将获得的DNA片段连接成环（如右图）以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取    作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T₁代）。

环状DNA示意图
A、B、C、D表示能与相应T—DNA链
互补、长度相等的单链DNA片段；
箭头指示DNA合成方向。
（1）为筛选出已转化的个体，需将T₁代播种在含         的培养基上生长，成熟后目交，收获种子（称为T₂代）。
（2）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T₂代播种在含         的培养基上，获得所需个体。 
（3）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与         植株进行杂交，再自交         代后统计性状分离比。
（4）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性         。
（5）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。
其过程是：提取         植株的DNA，用限制酶处理后，再用         将获得的DNA片段连接成环（如下图）。以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取         作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为 代）。

（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除       ，因为后者产生的        会抑制侧芽的生长。

（2） 为筛选出已转化的个体，需将T代播种在含        的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T代）。

（3） 为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T代播种在含        的培养基上，获得所需个体。

（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与      植株进行杂交，再自交       代后统计性状分离比。

（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，

从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性       。

（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取      植株的DNA，用限制酶处理后，再用       将获得的DNA片段连接成环（如右图）以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取    作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

 T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T₁代）。

环状DNA示意图

A、B、C、D表示能与相应T—DNA链

互补、长度相等的单链DNA片段；

箭头指示DNA合成方向。

    （1）为筛选出已转化的个体，需将T₁代播种在含          的培养基上生长，成熟后目交，收获种子（称为T₂代）。

（2）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T₂代播种在含          的培养基上，获得所需个体。 

    （3）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与          植株进行杂交，再自交          代后统计性状分离比。

    （4）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性          。

    （5）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。

其过程是：提取          植株的DNA，用限制酶处理后，再用          将获得的DNA片段连接成环（如下图）。以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取          作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。