51．(14分)绿色荧光蛋白基因(GFP)被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

(51题图)

(1)若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是-TCGA-，N端伸出的核苷酸的碱基序列是-TGCA-，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用限制酶　　　　　　　　 ，再对　　　　　 进行切割。

(2)若对符合设计要求的重组质粒A进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图表中的信息分析，若采用BamHⅠ和PstⅠ酶切，可得到　　　　 种DNA片段。

(3)检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可在荧光显微镜下观察GFP的表达，图中绿色荧光蛋白转基因克隆猪的转基因操作中的GFP既是　　　 ，也是　　　 。

(4)绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中涉及到多项现代生物技术，图中⑤⑥⑦过程属于　　　　　　 ，而⑨过程属于　　　　　　　 。

50．基因芯片的测序原理是DNA分子杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法。先在一块基片表面固定序列已知的八核苷酸的探针，当溶液中带有荧光标记的靶核酸序列，与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时，通过确定荧光强度最强的探针位置，获得一组序列完全互补的探针序列。据此可重组出靶核酸的序列TATGCAATCTAG(过程见图1)。若靶核酸序列与八核苷酸的探针杂交后，荧光强度最强的探针位置如图2所示，请分析溶液中靶序列为 　A.AGCCTAGCTGAA 　B．TCGGATCGACTT　 　C．ATCGACTT　 　D.TAGCTGAA

49．下列关于胚胎工程的相关叙述不正确的是　　　　　　　　　

A．哺乳动物体细胞核移植的成功率小于胚胎细胞核移植　 　

B．诱导胚胎干细胞分化成器官的培养基中不需要加入饲养层细胞

C．胚胎干细胞是一类未分化细胞，具有二倍体核型，可从早期胚胎中分离获取　

D．胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割

48．在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是

A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸

B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体

C.将重组DNA分子导入原生质体

D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞

47．在DNA 测序工作中，需要将某些限制性核酸内切酶的限制位点在 DNA上定位，使其成为 DNA 分子中的物理参照点。这项工作叫做“限制性核酸内切酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制性核酸内切酶 HindⅢ，BamHⅠ和二者的混合物分别降解一个 4kb(1kb即1千个碱基对)大小的线性DNA 分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如下图所示。据此分析，这两种限制性核酸内切酶在该DNA 分子上的限制位点数目是以下哪一组？

A．HindⅢ 2个，BamHⅠ 1个　　 　　　　　B．HindⅢ 2个，BamHⅠ 3个

C．HindⅢ 1个，BamHⅠ 2个　　　　　　　 D．HindⅢ和BamHⅠ各2个

46.我国自主研制的复制型艾滋病疫苗，是把艾滋病病毒的核酸的几个重要片段逆转录后插入天花病毒DNA中，形成重组病毒疫苗。该疫苗具有复制能力，可以持续刺激免疫系统，使人产生较强的免疫能力。该疫苗研制过程中　　　　　　　

A．运用了RNA病毒容易突变的能力

B．运用了基因工程手段，使用质粒作为载体

C．通常需要利用动物的细胞培养技术

D．该重组病毒的形成说明艾滋病病毒和天花病毒具有相同的遗传物质

45.卵细胞作为生殖细胞，在生物技术中可用于　　　　　　　　

①克隆动物时细胞核的受体　 ②进行体外受精，培育试管动物③形成受精卵，作为培育转基因动物的受体细胞 ④直接植物组织培养形成可育的二倍体试管苗⑤形成受精卵，利用转基因和植物组织培养，培育抗虫棉植株

A.①②③④ 　　　　　　　　 B.③④⑤　　　　　　　 C.①③⑤ 　　　　　　　　　　 D.①②③⑤

44.下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。有关叙述正确的是

A．①②过程中都会发生细胞的增殖和分化

B．在利用单倍体育种法培育优质小麦的过程中，不经过愈伤组织阶段

C．此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性

D．利用此过程获得的试管苗可能为杂合子

43.下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开)，下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是　　

A.1 为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ

B.1 为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ

C.1 为PstⅠ， 2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠ

D.1 为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ， 4为EcoRⅠ

42..如图，a、b、c、d表示现代生物技术，①②③④表示其结果，下列说法正确的是

A.a是核移植技术，①反映了动物体细胞具有全能性

B.c是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表现型一定相同

C.b是体外受精技术，②的设计产生有一定的伦理争议

D.d是转基因技术，获得④中个体常用的受体细胞是原肠胚时期的细胞