1、实验步骤设计：

(1)　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

(2)　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　

(3)　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

8、(5分)1999年5月，康奈尔大学的一个研究组在《Nature》杂志上发表文章，声称用带有转基因抗虫玉米花粉的马利筋(一种杂草)叶片饲喂美国大斑蝶，导致44%的幼虫死亡，由此引发GMO环境安全性的争论。

事实上，这一实验是在实验室完成的，并不反映田间情况，因而缺乏说服力，且没有提供花粉量的数据，现在这个事件已有了科学的结论：第一，玉米的花粉大而重，扩散不远，在玉米地以外5米，每平方厘米马利筋叶片上只找到一粒玉米花粉；第二，2000年开始在美国3个州和加拿大进行的田间试验证明，抗虫玉米花粉对斑蝶并不构成威胁，实验室实验中用l0倍于田间的花粉量来喂大斑蝶的幼虫，也没有发现对其生长发育有影响。目前研究已经证实，斑蝶减少的真正原因，一是农药的过度使用，二是作为大斑蝶越冬地的墨西哥生态环境遭到破坏。

如果我们是科学家，该如何设计一个转基因花粉对大斑蝶幼虫的影响的实验。

实验材料：大小、形态和生理状况相同的美国大斑蝶幼虫若干只，马利筋叶片若干，转基因玉米花粉，天然玉米花粉。

7、(7分)Ⅰ、家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大

规模培养，可以提取干扰素用于制药。

(1)进行转基因操作前，需用___________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

Ⅱ、动物乳腺生物反应器已成为生物技术领域发展的尖端方向，具有广阔的开发前景。

十多年来，已有数十种人体蛋白在动物乳汁中生产出来，在小鼠乳腺中获得表达的产品更是多达数百种_K^S*5U.C#

(1)在获得人的蛋白基因后，可通过　　　　　 技术在短时间内得到大量的这种基因

(2)将人的蛋白基因导入小鼠的受体细胞，常用方法是　　　　　　　 　。

(3)进行基因转移时，通常要将外源基因转入　　　　 　　　中，并通常采用　　　　　 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。

6、(10分)下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验。据图回答相关问

题。

(1)X、Y、Z细胞的名称分别是­­­　　　　　　　 、　　　　　　　　 、　 　　　　　　　。

(2)①过程类似于植物组织培养技术中的　　　　　　 过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较　　　　 。

②过程的实质是　　　　　　　　　　　　　 。

(3)③过程中需用到的生物诱导剂是　　　　　　　　　 。

(4)④处需要筛选，其目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(5)若用含放射性³²P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能测到放射性³²P的细胞器是　　　　 、　　　　　 。

5、(9分)一对表现正常的夫妇，其家族中都有遗传性囊性纤维化病(常染色体隐性遗传病)患

者。医生对他们进行了遗传咨询后，决定运用试管婴儿的方法实现他们的优生愿望。医生首先

为女性注射______，刺激卵泡成长，实现控制性超数排卵，然后在局部麻醉下从卵巢中吸取

______，并在显微镜下将其移到含特殊培养液的培养皿中，置于37℃培养箱中培养。再从男性

体内采集精子经过______处理，其方法通常采用______和______。处理后的精子与卵子放在专

用的受精溶液中完成体外受精。然后将受精卵移入发育培养液中继续培养，检查受精状况和发

育能力，待发育到桑椹胚或囊胚时，分别对多个胚胎的细胞进行______，选择出______的胚胎

植入母亲______内，避免遗传病孩子出生。除上述方法外利用经过修饰的腺病毒作载体将正常

基因转入有上述遗传病患者的肺组织中，达到治疗目的的方法叫做______(体外，体内)基因

治疗。

4.(11分)现有一生活污水净化处理系统，处理流程为“厌氧沉淀池→曝气池→兼氧池→植物

池”，其中植物池中生活着水生植物、昆虫、鱼类、蛙类等生物。污水经净化处理后，可用于

浇灌绿地。回答问题：

(1)污水流经厌氧沉淀池、曝气池、兼氧池后得到初步净化，在这个过程中，微生物通过______________呼吸将有机物分解。

(2)植物池中，水生植物、昆虫、鱼类、蛙类和底泥中的微生物共同组成了______________(生态系统、群落、种群)。在植物池的食物网中，植物位于第______________营养级。植物池中所有蛙类获得的能量最终来源于______________所固定的______________能。

(3)生态工程所遵循的基本原理有____________、____________、____________、____________和____________原理。

(4)一般来说，生态工程主要任务是对______________进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。.

3、(8分)将二倍体的阔叶粉花烟草(AAbb)和柳叶黄花烟草(aaBB)两个品种，通过

植物体细胞杂交的方法培育出杂种植株(AAaaBBbb)，其表现型为阔叶黄花。请回答：

(1)植物体细胞杂交过程中，首先去掉细胞壁获得原生质体，其常用的方法是　　　　 ；原生质体融合的结构基础是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)获得杂种细胞后，还要经　　　　　　 技术才能获得杂种植株，此过程所依据的原

理是　　　　　　　　 。获得的杂种植株是　　　　 倍体。

(3)利用上述两个品种来培育杂种植株(AAaaBBbb)，除上述方法外，还可以用其他育种方法。请用遗传图解表示育种过程并作简要的文字说明。

2、(7分)请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题：

(1)精细胞经变形后，_________发育形成精子的顶体，顶体内含有的顶体酶能协助精子穿过卵母细胞的　　　　　 和 　　　　　　。

(2)某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于　　　　　 卵母细胞阶段，当该细胞发育至　　　　　　　　　　　 　时，才具备受精能力。

(3)为了获得更多的早期胚胎，常用激素对供体进行处理，其目的是获得更多的　　　　　　 ，经人工受精后可得到早期胚胎。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜　 　　　　　　　　　。

1、(8分)下列为几种生物新个体的产生方式的图解，分析回答下列问题：

　 甲→精子　

A：　　　　　　　　 受精卵→新个体

　 乙→卵细胞

　 甲的体细胞→取出细胞核　

B：　　　　　　　　　　　　　　 重组细胞→新个体

　 乙的卵母细胞→剔除细胞核

　 甲的精子

C：　　　　　　　　　 试管中受精卵→早期胚胎→代孕母体→新个体

　 乙的卵母细胞

D：离体的组织或细胞→愈伤组织→根、芽→新个体

　 甲植物细胞A→原生质体A

E：　　　　　　　　　　　　　　 原生质体融合→杂种细胞→愈伤组织→新个体

　 乙植物细胞B→原生质体B

F：射线→生物→变异个体→选育出优良品种

　 目的基因

G：　　　　　　　 含目的基因的载体→受体细胞→生物新品种

　 载体

(1)B应用了　　　　　　　　 技术；C应用了　　　　　 和　　　　　　　 技术；

D过程称为　　　　　　　　　 。

(2)属于有性生殖的有　　　　　 。

(3)在A-E中，严格地讲，后代的遗传物质来自一个亲本的是　　　　　 。

(4)能体现高度分化的细胞核具有全能性的是　　　　　　 过程。

(5)B中，新个体的性别与　　　　 相同。

35.一环状DNA分子，设其长度为1。限制性内切酶A在其上的切点位于0.0处；限制性内切酶B在其上的切点位于0.3处；限制性内切酶C的切点未知。但C单独切或与A或B同时切的结果如下表，请确定C在该环状DNA分子的切点应位于图中的哪处(　 )

A．0.2和0.4处　　 　　 B．0.4和0.6处　　 　　 C．0.5和0.7处　 　 D．0.6和0.9处