45．微生物发酵是一项重要的生产技术，用这项技术来生产某一特定的产品首先需要培养出单一的高产菌株：

1)原始菌株的获取常可以从 　　　分离，因为它是微生物的大本菅。现要分离出能产生淀粉酶并抗青霉素的菌株可用　　　　　　　　　　　　 选择培养基来筛选。

2)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下三种统计结果。

第一位同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。

第二位同学在该浓度下涂布了3个平板统计的菌落数分别为20、200、239，并且取平均值153作为统计结果。

第三位同学在该浓度下涂布了4个平板统计的菌落数分别为218、233、237、220，并且取平均值227作为统计结果。你认为三位同学的结果是否有效：

①第一位同学的结果　　　　　　 　

理由是 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

②第二位同学的结果 　　　　　　　

　理由是　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

③第三位同学的结果 　　　　　　　

　理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

④这个实例启示我们，在设计实验时，一定要涂布至少　　　 个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致，结果不一致，意味着操作有误，需要重新实验。

3)淀粉酶可以通过微生物发酵生产，为了提高酶的产最，请你设计一个实验，利用诱变育种方法，获得产生淀粉酶较多的菌株。补写出主要实验步骤。(提示：生产菌株在含有淀粉的固体培养基上，随其生长可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈。)

①主要实验步骤：

　　 第一步：将培养好的生产菌株　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

　　 第二步：制备只以淀粉为碳源的固体培养基。

　　 第三步：把诱变组的大量菌株用　　　　　　　 　法或　　　　　　　　　 法接种于多个含淀粉的固体培养基上，同时接种对照组，相同条件下培养。

　　 第四步：比较两组菌株菌落周围透明圈的大小，选出　　　　　　　　 菌株。

44．请分析回答下列有关生物技术实践方面的问题：

(1)微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及　　　　　　　　　　

(2)在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰，其目的是　　　　　　　　　　 。

(3)某同学用稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数(取10g该土壤加90ml_。无菌水制成稀释液)。在对应稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为：121、212、256．则每克该土壤样品中的菌落数为　　　　　　　　　　 。

(4)分离分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取样、梯度稀释、样品涂布到　　　　　 培　 养基上、挑选　　　　　　　　　　 。

(5)植物组织培养技术基本操作的正确顺序是　　 。

　 ①外植体消毒　 ②制备MS培养基　 ③接种　 ④培养　 ⑤栽培　 ⑥移栽

A．①→②→③→④→⑤→⑥　 B．②→①→③→④→⑤→⑥

C．②→①→③→④→⑥→⑤　 D．①→②→③→④→⑥→⑤

(6)在植物组织培养过程中，往往需要使用植物激素启动细胞分裂，人为地控制细胞的 　　　　　　　　　　 　和　　　　　　　　　　 。

(7)通过电泳法分离提纯蛋白质时，影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的带电性质、

分子大小以及　　　　　　　　　　 。

(8)PCR反应过程中需要DNA聚合酶参与的是　　　　　　　　　　 阶段。

(9)根据果胶酶在果汁生产中的作用的系列实验结果回答下列问题：

①能正确表示温度对果胶酶活性影响的曲线是　 　　　　　　　　　

②能正确表示pH对果胶酶活性影响的曲线是　　　　　　　　　　

③在原材料有限的情况下，能正确表示相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响的曲线

是　　　　　　　　　　 　。

　(10)某种全自动洗衣机的水温有冷水、45℃温水、90~C热水三种设置，洗涤方式有直接洗涤和浸泡20分钟后洗涤两种设置。如果用加酶洗衣粉洗涤有陈旧牛奶渍的棉质衣服，洗衣机选择哪种水温和洗涤方式洗涤效果最好?　　　　　　　　　　

(11)用含有蛋白酶的洗衣粉洗涤丝绸衣物和羊毛衣物是否合适?为什么?　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

43．泡菜是人们日常生活中比较喜欢的一种食品，但是泡菜中却含有亚硝酸盐。当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3g-0.5g时，会引起中毒；达到3g时，会引起死亡。我国卫生标准规定，亚硝酸盐的残留量在酱菜中不得超过20mg/Kg。膳食中的绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿液排出，只有在特定的条件下，才会转变成致癌物质--亚硝胺。针对泡菜在发酵过程中会产生亚硝酸盐的事实，某中学生物活动小组设计实验，探究不同食盐浓度和发酵时间对亚硝酸盐含量变化的影响。

⑴请补充实验设计的空缺内容：

①制作泡菜的原理：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

②测量指标及方法：亚硝酸盐与某些化学物质发生反应后形成　　　　　　 色染料。先使泡菜样品及一系列已知浓度的亚硝酸盐溶液分别与化学物质发生显色反应，然后通过　　　　　 颜色，可以估测出泡菜液样中亚硝酸盐的含量。

③确定浓度梯度：经过查找资料和初步实验，发现当食盐浓度为3%以下时，制作的泡菜溶液发生腐败，而当食盐浓度在8%以上时，制作的泡菜又容易成为咸腌菜。因此，分别设计了3%、5%、7%的食盐浓度梯度来制作泡菜。

④选择实验材料：红萝卜和白萝卜，哪种更适合于用做实验材料？　　　　　　　　　 ，

理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

⑤制作泡菜：将实验材料分成3组制作泡菜，除了实验材料的重量相同外，还要保证每组泡菜的　　　　　　　　　　　　　 相同。

⑥从第三天开始，定期测定泡菜中的亚硝酸盐含量，请帮助该小组设计一个用于实验记录

的表格。

⑵下图是该生物活动小组记录的三种食盐浓度的泡菜中的亚硝酸盐含量的与发酵天数的关系图。根据此图实验结果，请你给出制作泡菜的最佳指导意见。

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

你给出此建议的理由是：食盐浓度为3%的泡菜中亚硝酸盐含量总体上在3坛泡菜中

　　　　　　　　 ；食盐浓度为5%的泡菜在发酵初期亚硝酸盐含量迅速升高，且亚硝酸盐含量变化最　　　　　 ，但从发酵11天后亚硝酸盐降到最低值；而食盐浓度为7%的泡菜中亚硝酸盐含量变化不大，虽一直处于较低数值，但容易成为　　　　　　　 。

42．(10分)有一组同学依据以下流程示意图尝试用葡萄制作果酒和果醋。试回答下列问题。

(1)下列对葡萄的处理正确的是：　　 (　　 )

A．挑选霉烂的葡萄进行酿酒，既经济又节约

B．对葡萄要去除枝梗和去皮，但要保留核

c．选取没有成熟的青葡萄才能制备出白葡萄酒

D．对葡萄榨汁前要冲洗，榨汁后要去核

(2)小组经过研究设计了右图所示的装置。在加入葡萄汁之前，该装置应该用　　　　　　　　　 消毒。

(3)该组同学在葡萄汁中加入了少量的葡萄糖溶液和活性干酵

母粉，混合均匀后一起装入发酵罐中大约2／3体积，封闭充气口和出料口。半天时间内，发酵液中产生大量的气泡，此时，排气口排出的主要是　　　　　　 (气体)。

(4)酵母菌的新陈代谢类型是　　　　　　　 。当发酵罐中　　　　　　 时开始产生酒精。可以用　　　　　　 检验酒精，其原理是：　　　　　　　　　　　　　　　　 。此时

发酵罐中产生酒精的酵母菌除了最初来自活性干酵母粉还可能来自　　　　　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　 。

(5)实验装置中充气口的作用主要是在　　　　　　　　 阶段通人无菌空气；发酵过程中出

料口的作用是　　　　　 　　　　　　　　　　。

41．某小组同学在市场上收集到4种洗衣粉，分别叫做“汰渍360度全能洗衣粉”，“太渍360度全能洗衣粉”，“汰清360度全能洗衣粉”和“汰净360度全能洗衣粉”。现欲研究它们的洗涤效果。经过调查发现，几种品牌的包装袋上的说明书均相同，如下所述：

　 (1)主要成分：全方位去污因子；抗污渍再沉积剂；阴离子表面活性剂；非离子表面活性剂；衣物增鲜剂；无磷水软化剂；香料。

　 (2)注意事项：适用于棉、麻、化纤及其混纺等衣物，请勿用于洗涤丝质或毛料衣物。用温水溶液浸泡衣物，减少浸泡用水量，适当延长浸泡时间。

　 (3)优点：全能去除污渍；超速去渍；不易伤手；持久亮白；易漂洗；

　 现在，小组同学进行比较四种洗衣粉洗涤效果的实验。

　 (1)将“汰渍360度全能洗衣粉”，“太渍360度全能洗衣粉”，“汰清360度全能洗衣粉”和“汰净360度全能洗衣粉”依次编号为1、2、3、4。

　 (2)分别用4把干燥洁净相同型号的药匙移取l、2、3、4中的洗衣粉等量(一匙)，依次溶于编号为1’、2’、3’、4’四个烧杯的500毫升清水中，各用洁净玻棒搅拌2分钟，观察发泡情况。

　 (3)分别用各组的玻棒沾取少量洗衣粉溶液，用pH试纸检测，测得结果如下表：

(4)用洁净的白色旧布作为衣物的替代品，剪裁成为3cm×3cm的布块若干备用，将以上布

块随机分为四组，每组3块，分别编号为A、B、C、D。

(5)按照下表步骤实施实验：

分析以上工作，回答下列问题：

(1)洗衣粉发泡的原因是因为其中含有　　　　　　　　　　　　　　　　　

(2)洗衣粉中的全方位去污因子应该是　　　　　　　　　　　　　　　　　

(3)若本实验中的洗衣粉是加酶洗衣粉，则其中的酶的最适pH值应该　　　　　　 (偏碱

性／中性／偏酸性)

(4)若观察发现，A组布块的两种污渍均被洗干净，而B组的奶渍还有较多残留的痕迹，C

组和D组两种污渍均留有较多痕迹。可以推测，A组洗衣粉中含有　　　　　　　 酶。B组与A组相比，　　　　　　　 酶的含量较少。C、D两组两种污渍均留有较多痕迹的原因可能是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(5)以上实验步骤中有两处错误，试找出一处错误并修改。

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 (2分)

(6)若衣服被大米粥污染了，在洗衣粉中添加　　　　　　　 效果会很好。

A．蛋白酶　　 B．脂肪酶　　 C．淀粉酶　　 D．纤维素

(7)本实验还可以用什么方法来测量实验结果?

5、6、……10。

方法二：将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥的pH分别调至4、5、6、……10，再把pH相同的果胶酶溶液和苹果泥相混合。

其中科学的方法是：　　　　　　　　　 ，理由：　　　　　 　　　　　　　　　　　　。

(2)实验中有玻璃棒搅拌的操作，其目的是使　　　　　　　 ，以减少实验误差。

(3)如果用曲线图的方式记录实验结果，，在现有的条件下，用横坐标表示pH，纵坐标表示果汁体积，下图各项中最可能是实验结果的曲线图：　　　　 。若实验所获得的最适宜pH

为m，请你在所选的曲线图中标出“m”点的位置并将曲线图补充完整。(2分)

40．(10分)果胶酶能够分解果胶，瓦解植物细胞壁及胞间层。在果汁生产中应用果胶酶可以提高出汁率和澄清度。请完成以下有关果胶酶和果汁生产的实验课题。

　 实验用具和材料：磨浆机、烧杯、试管、量筒、刀片、玻璃棒、漏斗、纱布等。苹果、质量分数为2%的果胶酶溶液、蒸馏水等。

实验一：果胶酶在果汁生产中的作用

实验方法及步骤：

　 (1)将苹果洗净去皮，用磨浆机制成苹果泥，加入适量蒸馏水备用。

　 (2)取两个100 ml洁净的烧杯，编号为l、2号，按下表程序进行操作，并把表中未填写的内容填上。　

(3)取出两个烧杯，同时进行过滤。观察或比较　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ，并记录结果。

实验结果的预测及结论：

如果是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ，则

说明果胶酶对果胶的水解具有催化作用。

实验二：验证果胶酶在果汁生产中的作用

(1)在上述实验步骤中，完成“烧杯中分别加入等量苹果泥、试管中分别加人等量果胶酶溶

液、编号、分组”之后，有下列两种操作：

方法一：将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥相混合，再把混合液的pH分别调至4、

39．(10分)下图是“试管牛”工厂化生产的技术流程图，据图回答问题：

(1)在公牛的精子发生过程中，精子细胞经过　　　　　 成为成熟的精子，在此过程中，　　　　　　　 变成精子头的主要

部分，　　　　　 变成精子的尾。

(2)除了通过①过程采集可用的卵母细胞，大型的家畜还可以借助超声波探测仪、

内窥镜等

工具　　　　　　　　　 吸取卵母细胞。

(3)②过程通常采

用　　　　　　　　 法和化学法

(4)早期的动物胚胎体外培养，培养液中除了各种盐类、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加　　　　　　　　　 。

(5)进行胚胎移植时，对供体和受体母牛要用激素进行　　　　　　 处理。

(6)如果进行下图所示的胚胎分割移植操作，则要注意将[　　 ]　　　　　 进行均等分割。理论上，最终获得的幼体在性状上是　　　　　　　　 (相同的环同的)。

　 (7)(多选)ES细胞的分离和培养成功是胚胎工程的重大成就之一，下列相关叙述中正确

　 的是：　　 (　　 )

　 A．可以从牛的早期胚胎或原始性腺中分离得到

　 B．具有发育的全能性，但在体外培养的条件下可以只增殖而不发生分化

　 c．我国政府支持该技术用于人类的无性生殖，用于提高人口质量

　 D．人类的ES细胞可以用于解决临床上供体器官不足和移植后免疫排斥的问题

38．下面是某校生物班同学在“生物技术实践”课中进行的实验，请回答：

(1)分离纯化土壤中细菌最常使用的接种方法是　　　　 和　　　　　 两种。在接种过程中，对接种器械的灭菌方法是　　　　　　 。

(2)一同学在纯化土壤中细菌的实验中，发现其培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是　　　　　　　　　 ，应当怎样处理？　　　　　　　　　　　 (2分)。

(3)另一同学运用PCR技术，准备对分离得到的大肠杆菌一个DNA分子进行体外扩增。他往扩增仪中加入模板DNA、四种脱氧核苷酸，此外还应加入　　　　 和　　　　　 。DNA体外扩增过程包括了三个连续的步骤分别是变性、　　　　　 和　　　　 。

(4)还有同学将大肠杆菌破碎并提取得到大肠杆菌蛋白质，一同学利用醋酸纤维薄膜电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的　　　　　　　 、　　　　　　　　 以及分子的形状等。

37．荧火虫发光是体内荧光素酶催化系列反应所产生的现象。如果荧光素酶存在于植物体内，也可使植物体发光。一直以来荧光素酶的唯一来源是从荧火虫腹部提取。但加利

福利亚大学的一组科学家成功地通过转基因工程实现了将荧光素酶基因导人到大肠杆菌体内，并在大肠杆菌体内产生荧光素酶。请你根据已有的知识回答下列有关问题：

　(1)在此转基因工程中，目的基因是　　　　　　　　　　 ，具体操作过程中下图所示的黏性末端是由　　　　　　　 种限制性内切酶作用产生的。

　(2)在上述过程中需要多种酶的参与，其中包括限制性型内切酶、DNA聚合酶和　　　　

　　　　　　　 等。

　 (3)(多选)将此目的基因导人到大肠杆菌体内需要运载体的帮助。下列各项是选取运载体

　 时必须考虑的是　　 (　 　)

　 A．能够在宿主细胞内复制并稳定保存　　 　B．具有特定的限制酶切点

　 C．具有与目的基因相同的碱基片断　 　　D．具有某些标记基因

　 (4)(多选)本实验中将目的基因导人大肠杆菌的运载体可以是　　 ( 　　)

　 A．质粒　　 B．动物病毒　　 C．噬菌体　　 D．植物病毒

　 (5)在此转基因工程中，将体外重组体DNA导人大肠杆菌体内并使其在细胞内维持稳定

　 和表达的过程称为　　　　　 。最常用的方法是首先用　　　　　　　 处理大肠杆菌，

　 目的是　　　　　　　　　　　　　 。

　 (6)目的基因是否导入受体细胞，用　　　　　 技术来检测。目的基因是否表达出相应

　 的蛋白质，除了通过大肠杆菌是否发光来确定还可以通过　　　　　　　 杂交来判断。