1．(2010·南京高三调研)下列关于果酒和果醋制作的叙述，错误的是(　)

A．制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡

B．温度对酵母菌酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌的发酵影响不大

C．在变酸的果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的

D．制作果酒和果醋时都应用70%的酒精对发酵瓶消毒并注意无菌操作

解析：温度影响细胞呼吸过程中酶的活性，对酵母菌酒精发酵和醋酸菌的发酵都有很大影响。

答案：B

5．(2010·济南模拟)某一实验小组的同学，欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验，实验材料及用具齐全。

(1)酵母细胞的固定采用的方法是________。

(2)请完善该实验小组的同学在制备固定化酵母细胞过程的步骤：

①配制氯化钙溶液时应用蒸馏水。

②海藻酸钠溶液应用________加热。

③海藻酸钠溶液必须________才能加入酵母细胞。

④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入__________中形成________。

(3)该实验小组用如图所示的装置来进行葡萄糖发酵。

①为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复运用，实验过程中，一定要在________条件下进行。

②加入反应液后的操作是关闭________________________________________________

________________________________________________________________________。

③装置的长导管起到什么作用？__________________。

(4)试分析下图中，与用海藻酸钠作载体制备的固定化酵母细胞相似的是(　)

解析：由于细胞过大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法进行固定化。操作过程中，必须等海藻酸钠溶液冷却后才能将其与酵母细胞混合，否则酵母细胞会在高温下死亡。酵母菌利用葡萄糖的发酵过程中会产生CO₂，为减小装置中的压力，应及时将其排出。

答案：(1)包埋法　(2)小火或间断　冷却至室温　氯化钙溶液　凝胶珠　③重复培养的目的是________________________________________________________________

无菌　②活塞1和活塞2　③释放CO₂，减小反应柱内压力并可防止其他微生物污染　(4)D

4．工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高水果的出汁率，为研究温度对果胶酶活性的影响，某同学设计了如下实验：

Ⅰ.将果胶酶与苹果泥分装于不同试管，在10℃水浴中恒温处理10分钟(如图甲)。

Ⅱ.将步骤Ⅰ处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10℃水浴中恒温处理10分钟

(如图乙)。

Ⅲ.将步骤Ⅱ处理后的混合物过滤，收集滤液，测量果汁量(如图丙)。

Ⅳ.在不同温度条件下重复以上实验步骤，并记录果汁量，结果如下表：

根据上述实验，请分析回答下列问题：

(1)果胶酶能破除细胞壁，是因为果胶酶可以分解细胞壁中的果胶，产物是________。

(2)实验结果表明，当温度为________左右时，果汁量最多，此时果胶酶的活性________。

(3)为什么该实验能够通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高低？

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

(4)下列A、B、C图依次表示果胶酶浓度一定时，果胶酶的反应速度与反应物浓度、温度、pH之间的关系，据图完成下列问题：

①图A中，反应物达到某一浓度时反应速度不再上升的原因是________。

②图B中，曲线ab段表明________，曲线bc段表明________。

③将装有果胶酶与反应物的甲、乙两支试管分别放入12℃和90℃水浴锅中，20分钟后取出转入40℃的水浴锅中保温，两支试管内的反应是：甲________，乙________。

④图C表示果胶酶浓度、反应物浓度、温度等一定时，果胶酶催化反应的速率随pH变化的曲线，实验时可根据________来判定果胶酶的最适pH。

解析：(1)果胶酶催化植物细胞壁中的果胶分解成为半乳糖醛酸。(2)由题干中的表格可知，40℃时果汁量最多，说明此温度下酶活性最强。(3)该实验中衡量结果的指标有两项，一是观察在相同的时间内，滤出苹果汁的体积的多少。体积多说明果胶酶活性高，将果胶分解得多，使果汁更好地流出。二是观察果汁的澄清度。(4)酶是生物体内具有催化作用的有机物，绝大多数酶是蛋白质，其催化效率受反应物浓度、温度、pH的影响。①图A中，当反应物在低浓度范围内增加时，反应速度迅速上升；当反应物达到一定浓度时，随反应物浓度增加，反应速度不再增加。这是因为酶虽然有高效性，但催化能力也有一定限度，当所有酶都发挥了最高效能后，反应物浓度再增加，反应速度也不增加，这时受酶浓度影响。②从a点到b点曲线上升，这是因为温度升高，酶活性升高。曲线bc段下降，因为温度超过最适温度，酶活性随温度升高而降低。③由于甲试管温度较低，所以酶活性较低，反应速度很慢，当转入40℃(酶反应的适宜温度)的水浴锅中加热时，其反应速度迅速增加。乙试管在90℃高温下，酶结构被破坏，酶变性失活，当转入40℃的水浴锅中保温时，酶活性也不再恢复，故无催化反应。④图C表示果胶酶浓度、反应物浓度、温度等一定时，果胶酶催化反应的速率随pH变化的曲线，实验时可根据果汁的量来判定果胶酶的最适pH。

答案：(1)半乳糖醛酸　(2)40℃　最高　(3)果胶酶将果胶分解为小分子物质，小分子物质可以通过滤纸，因此苹果汁的体积大小反映了果胶酶催化果胶分解的能力

(4)①受反应物中酶浓度的限制　②果胶酶的活性随温度升高而升高　果胶酶的活性随温度的继续升高而下降　③反应速度加快　无催化反应　④果汁的量

3．下列有关固定化酶和固定化细胞的说法正确的是(　)

A．某种固定化酶的优势在于能催化系列生化反应

B．固定化细胞技术一次只能固定一种酶

C．固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可在细胞外起作用

D．固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性迅速下降

解析：酶具有专一性，一种酶固定后也不可能催化系列生化反应；固定化细胞技术固定的是一系列酶；固定化酶和固定化细胞都能反复使用，若条件适宜，一般不会出现酶的活性下降问题。

答案：C

2．下列关于加酶洗衣粉说法不正确的是(　)

A．加酶洗衣粉的效果总比普通洗衣粉的效果好

B．加酶洗衣粉效果的好坏受很多因素影响

C．加酶洗衣粉中目前常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶

D．加酶洗衣粉相对普通洗衣粉更有利于环保

解析：加酶洗衣粉与普通洗衣粉相比，虽然表面活性剂和三聚磷酸钠的含量较少，但添加了一定量的酶制剂。在酶的作用下，构成污渍的一些生物大分子被分解为可溶性的小分子，使污迹容易从衣物上脱落，即加酶洗衣粉的洗涤效果不仅没有降低，反而加强了。但是，由于酶具有专一性，只有洗衣粉中的酶与污渍相对应时，其优势才能发挥出来。如果不对应，加酶洗衣粉的洗涤效果可能不如普通洗衣粉。

答案：A

1．(2010·徐州调研)下列关于果胶酶的叙述正确的是(　)

①具有分泌功能的细胞产生的　②凡是活细胞都能产生果胶酶　③果胶酶能将果胶分解成半乳糖醛酸　④植物、霉菌、酵母菌和细菌均可能产生果胶酶　⑤果胶酶特指分解果胶的一种酶　⑥纤维素酶和果胶酶可用于去除植物细胞壁　⑦组成果胶酶的基本单位是氨基酸或核苷酸

A．①②⑤　 B．②③⑦　 　　　 C．③④⑥　 　　　 D．③④⑤

解析：果胶酶并非分泌到细胞外的酶，并非所有的细胞均可产生果胶酶；果胶酶是一种复合酶，它包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶及果胶酯酶。

答案：C

6．通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术使羊奶中含有人体蛋白质，下图表示了这一技术的基本过程，在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是-G^↓GATCC-，请回答：

(1)从羊染色体中“剪下”羊蛋白质基因的酶是________，人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中需要的酶是________。

(2)请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图。

解析：(1)考查在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”。(2)按碱基互补原则，写出所给片段的互补部分，再按切割位点，将其分开，即。

答案：(1)限制性内切酶　DNA连接酶

(2)

5．下图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tet^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别包括有EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

据图回答：

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有________、________、________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行________。

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是__________________。

(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是________，其合成的产物是________。

(4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是__________________。　

解析：在基因表达载体的构建过程中用同种限制酶来切割目的基因和质粒，使之产生相同的黏性末端，以利于DNA片段的连接。将切割后的目的基因和质粒，用DNA连接酶进行连接，它们之间随机连接，可有三种产物：目的基因-载体连接物、载体-载体连接物和目的基因-目的基因连接物。从图中可以看出，目的基因的插入位点在抗四环素基因上，可推知：目的基因-载体连接物的抗四环素基因被破坏，丧失了抗四环素的能力，但保留了抗青霉素的能力；载体-载体连接物既保留了抗四环素的能力也保留了抗青霉素的能力；目的基因-目的基因连接物既无抗青霉素基因也无抗四环素基因，不具备抗性。获得DNA连接产物以后，必须通过筛选方能获得所需的基因表达载体。导入宿主细胞后方能表达获得基因产物。目的基因表达过程中，RNA聚合酶首先与启动子结合，指导目的基因转录产生mRNA，mRNA再指导蛋白质的合成。从图中可看出抗四环素基因上有两个不同的切割位点，所以在实际操作过程中，为避免使切割后的末端任意连接，可用EcoRI和BamHI同时对目的基因和质粒进行切割，使同一切割产物的黏性末端不同。

答案：(1)目的基因-载体连接物　载体-载体连接物　目的基因-目的基因连接物　分离纯化(其他合理答案也即可)

(2)载体-载体连接物　目的基因-载体连接物、载体-载体连接物

(3)启动子　mRNA　(4)EcoRI和BamHI

4．(2010·上海高考)人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。

(1)目的基因的获取方法通常包括________和________。

(2)上图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对；这种变异被称为________。

(3)已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成________个片段；而患者的则被切割成长度为________对碱基和________对碱基的两种片段。

(4)如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是________(以P⁺表示正常基因，P^－表示异常基因。)

解析：(1)目的基因通常用从细胞中直接分离和通过化学方法人工合成的方法获得。(2)对比正常人和患者p53基因部分区域的碱基对序列可知：正常基因中的C-G碱基对被T-A碱基对替换而成为异常基因。(3)由图示知：正常人的p53基因部分区域有2个限制酶切割位点，用限制酶E对正常人的该基因区域进行切割，将得到长度分别为290对碱基、170对碱基和220对碱基3个片段。异常基因因碱基替换而失去一个限制酶E的切割位点，故用限制酶E切割患者的p53基因部分区域，只能得到长度为460对碱基和220对碱基的2种片段。(4)若某人的该基因区域用限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对4种片段。说明该人既有正常基因，又有异常基因，故该人基因型为P⁺P^－。

答案：(1)从细胞中分离　通过化学方法人工合成

(2)见下图

基因碱基对的替换(基因突变)

(3)3　460　220　(4)P⁺P^－

3．(2010·汕头模拟)蛋白质工程与基因工程相比，其突出特点是 (　)

A．基因工程原则上能生产任何蛋白质

B．蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质

C．蛋白质工程可以不通过转录和翻译来实现

D．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第三代基因工程

解析：蛋白质工程通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求，是延伸出来的第二代基因工程。

答案：B