3.　 采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是(　 )

①将毒素蛋白注射到棉受精卵中

②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中

③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养

④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵

A. ①②　 B. ②③　 C. ③④　 D. ①④

2.　 镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是(　 )

A. 限制酶　　　 B. DNA连接酶

C. 解旋酶　　　 D. RNA聚合酶

1.　 在基因工程操作过程中，E·coli DNA连接酶的作用是(　 )

A.　 将任意两个DNA分子连接起来

B.　 连接具有相同黏性末端的DNA分子，包括DNA分子的基本骨架和碱基对之间的氢键

C.　 只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键

D.　 只连接具有相同黏性末端的DNA分子碱基对之间的氢键

12.　 (09高考·广东)(14分)(1)饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的　　　 ，然后改变植酸酶的　　　　 ，从而得到新的植酸酶。

(2)培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是　　　　　　　 。请简述获得转基因植株的完整过程。

(3)为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过　　　 转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过　　　　　 方法，从而一次得到多个转基因猪个体。

(4)若这些转基因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？

11.　 (08高考·江苏)(16分)单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb，镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。

(1)从图中可见，该基因突变是由于　　　　 引起的。巧合的是，这个位点的突变使得原来正常基因的限制酶切割位点丢失。正常基因该区域上有3个酶切位点，突变基因上只有2个酶切位点，经限制酶切割后，凝胶电泳分离酶切片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱，正常基因显示　　 条，突变基因显示　　　 条。

(2)DNA或RNA分子探针要用 　　　　　　　　　　　　　　　　等标记。利用核酸分子杂交原理，根据图中突变基因的核苷酸序列(…ACGTGTT…)，写出作为探针的核糖核苷酸序列：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(3)根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇4次妊娠的胎儿Ⅱ-1~Ⅱ-4中基因型BB的个体是　　　 ，Bb的个体是　　　 ，bb的个体是　　　 。

10.　 (25分)利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。2005年青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答：

(1)在基因工程中，A表示　　　 ，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　，

B表示　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　。

(2)在研究过程中，研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因，并采用技术对目的基因进行了扩增，然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过程中需要的工具酶有

。

(3)基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括哪些部分?

(4)将目的基因导入受体细胞的过程中，在③过程中一般是采用　　　 方法，在②过程中一般采用　　　　　 方法，受体细胞一般是　　　　　　　　 。

(5)由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中，检测其体内是否出现药用蛋白，在分子水平上的检测方法及结果是什么?

(6)要确定目的基因(抗虫基因)导入棉花细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程。

9.　 下列关于基因工程的叙述，正确的是(　 )

A. 基因工程常以抗菌素抗性基因作为目的基因

B. 细菌质粒是基因工程最常用的载体

C. 通常用一种限制酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA

D. 选择目的基因--人胰岛素基因时只能从胰岛B细胞中选取

8.　 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是(　 )

A. 氨基酸结构　　 B. 蛋白质空间结构

C. 肽链结构　　　 D. 基因结构

7.　 DNA连接酶催化的反应是(　 )

A. DNA复制时母链与子链之间的氢键　

B. 黏性末端碱基之间的氢键　

C. 两个DNA片段黏性末端之间缝隙的连接

D. DNA连接酶和DNA聚合酶都需要模板

6.　 下列关于限制酶的叙述中正确的是(　 )

A. 限制酶只能存在于原核生物中　

B. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

C. 不同的限制酶切割DNA都会形成相同的黏性末端　

D. 限制酶的作用部位是切割特定的核苷酸形成氢键