13.　 (09高考·福建)(10分)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、

SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：

(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶　　　　 ，对 　　　　　　进行切割。

(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有　　　　　　　　　 　，作为标记基因。

(3)香蕉组织细胞具有 　　　　，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的

。

(3)卡那霉素　 (4)放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因

(5)①非转基因植株　 ②3∶1　　 ③100

解析：利用遗传定律知识，杂交后代的比例是1∶1，应属于测交。该植株自交，则后代比例是3∶1。取该转基因植物的花药，通过卡那霉素培养基的选择，选出的都是抗卡那霉素型植株，即100%。

12.　 (09高考·江苏)(14分)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。

　(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有　　　 　种DNA片段。

(2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得　　 种重组质粒；如果换用Bst Ⅰ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得　　 种重组质粒。　　

(3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的。

(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T-DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中　　　　 　对T-DNA的降解。

(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细

胞 　　　　　　。

(6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中

的　　　 基因频率的增长速率。

11.　 (14分)在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答：

(1)A过程需要的酶有　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是

。

(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入　　　　　　 　。

(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该

用　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 作为探针。

(5)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。

①将转基因植株与杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1∶1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为 　　　。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占　 　　%。

10.　 (14分)很久以前科学家在土壤中发现了某种细菌能制造一种对昆虫有毒的蛋白质，当时许多人就想把编码这一蛋白质的基因(抗虫基因)转移到农作物中，以降低昆虫对农作物造成的危害。20世纪90年代，美国科学家采用基因工程技术首次培育出抗虫玉米新品种。下图为这一转基因玉米的主要培育过程。

(1)获得特定目的基因的途径除了从该细菌中直接分离抗虫基因外，还可以　　　　 。将目的基因与运载体结合时必须用　　　 酶和DNA连接酶。在基因工程中，常用的运载体

有　　　 等，而作为运载体必须具备相应的条件，例如应具有　　　　　 　以便进行筛选。

(2)由转基因玉米细胞经过　　　 形成愈伤组织，然后发育成胚状体和试管苗。若要制备转基因玉米的人工种子，可选择上述实验过程中的　　　 再包裹合适的　　　　　 。

9.　 (16分)继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：

(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是　　　　　　　　　　　　 。

(2)进行基因转移时，通常要将外源基因转入中，原因是　　　　　　　　　　　　 。

(3)通常采用　　　　 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组　　　　　　　　 。

(4)在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的　　 细胞中特异表达。

(5)为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的　　　 转入　　　 细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为　　　　 。

8.　 (08高考·全国卷Ⅱ)下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是(　 )

A. 一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列　

B. 限制性内切酶的活性受温度的影响

C. 限制性内切酶能识别和切割RNA　　　

D. 限制性内切酶可从原核生物中提取

7.　 有关基因工程的叙述正确的是(　 )

A.　 DNA聚合酶可连接磷酸二酯键，因此可代替DNA连接酶来进行连接

B.　 基因运载体上的抗性基因的主要作用是提高受体细胞在自然环境中耐热性

C.　 运载体的作用是可以完成目的基因的转运、扩增、表达、确定在染色体上基因间的排列顺序

D.　 不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，充分体现了酶的专一性

6.　 下列有关内容的叙述中，体现利用DNA分子杂交原理的是(　 )

①观察DNA在细胞中的分布　 ②检测目的基因是否导入到受体细胞　 ③研究与分泌蛋白有关的细胞结构　 ④检测目的基因是否完全进行转录和翻译　 ⑤检测目的基因能否进行转录　 ⑥检测个体是否具有某种特性

A. ①③　　 B.　 ②④　 C.　 ②⑤　 D.　 ⑤⑥

5.　 我国上海研究所合成一种具有镇痛作用而又不会使病人上瘾的药物--脑啡呔多糖(类似人类中的糖蛋白)。如要采用基因工程和发酵技术让微生物来生产脑啡呔多糖，应选哪种微生物为受体细胞(　 )

A. 大肠杆菌　 B. 大肠杆菌质粒

C. T4噬菌体　 D. 酵母菌

4.　 现有一长度为1 000碱基对(by)的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco RI酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpnl单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI,Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是(　 )