题目列表(包括答案和解析)
8.(2010年海南模拟)红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:
(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:________、________、________和________。
(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是________________________________。
②在样品处理中包括红细胞的洗涤、________、分离血红蛋白溶液、透析。
③洗涤红细胞的目的是________,你如何知道红细胞已洗涤干净?______________________________。
④分离红细胞时对离心速度和离心时间的要求是__________________。
⑤若离心速度过高和时间过长结果会怎样?_________________。
(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析,这就是样品的粗分离。
①透析的目的是_________________________________________。
②透析的原理是_____________________________________。
(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
①样品纯化的目的是_____________________________________。
②血红蛋白有什么特点?_______________________________。
这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义?_________________
____________________________________________。
解析:分离提取血红蛋白的实验流程大致是样品处理-粗分离-纯化-纯度鉴定四个步骤。柠檬酸钠属于抗凝剂。血红蛋白是红色含铁的蛋白质。凝胶色谱法分离蛋白质是依据蛋白质的相对分子质量大小来进行的。
答案:(1)样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定 (2)①防止血液凝固 ②血红蛋白的释放 ③去除杂蛋白 离心后的上清液没有黄色 ④低速短时间离心,如500 r/min离心2 min ⑤离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀,得不到纯净的红细胞,影响后续血红蛋白的提取纯度 (3)①去除相对分子量较小的杂质 ②透析袋能使小分子自由进出,而大分子则保留在袋内 (4)①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂蛋白除去 ②血红蛋白呈现红色 在凝胶色谱分离时可通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液,这使血红蛋白的分离过程非常直观,大大简化了实验操作。
7.关于DNA的粗提取和物理性质的观察实验:
(1)在实验前,取0.1 g/mL的________溶液置于烧杯中,注入新鲜鸡血并同时用玻璃棒搅拌。静置一天________即自行沉淀,除去上清液,即得到实验所需材料。
(2)第一次加蒸馏水的目的是_____________________________。
(3)将提取得到的丝状物置于载玻片上,加____________溶液,丝状物被染成____________色,证明此丝状物的主要成分为DNA。
答案:(1)柠檬酸钠 鸡血细胞
(2)使血细胞加速破裂
(3)甲基绿 蓝绿色
6.以下对DNA和血红蛋白的提取与分离(鉴定)实验的分析正确的是( )
A.都要用猪血细胞来进行实验
B.在DNA的粗提取与鉴定实验中,有两次DNA析出,所用的方法相同
C.在实验中都要进行除杂处理以便得到较纯净的DNA或血红蛋白
D.将析出的DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺后呈现蓝色
答案:C
5.下列操作过程的叙述中错误的是( )
A.PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌
B.PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在-20 ℃储存
C.PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后,迅速融化
D.在微量离心管中添加反应成分时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头都必须更换
答案:C
4.(2010年苏州模拟)以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是( )
A.红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的蒸馏水,重复洗涤3次
B.将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的NaCl溶液中透析12小时
C.凝胶装填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在
D.蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的移动速度慢
解析:选C。红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的生理盐水,重复洗涤3次目的是除去杂蛋白。透析时使用物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液,而不是用0.9%的NaCl溶液。蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的在凝胶外部移动,移动速度快。在装填凝胶柱时,不得有气泡存在,气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。
3.关于DNA的复制,下列叙述正确的是( )
A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5′端延伸DNA链
B.DNA复制不需要引物
C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合
D.DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸
解析:选C。由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从引物的3′端开始即复制方向由3′端向5′端延伸。由于DNA分子是反向平行的,子链是依据碱基互补配对原则,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成是从子链5′端向3′端延伸。
2.(2008年高考江苏卷)下列叙述中错误的是( )
A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出
B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色
C.用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质
D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质
解析:选A。本题考查生物技术的应用。DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl浓度的变化而变化。在0.14 mol/L NaCl溶液中DNA的溶解度最小,低于或高于0.14 mol/L,DNA的溶解度都会增大。在DNA粗提取实验中就是先把核物质溶解在2 mol/L NaCl溶液中,然后逐渐加水,稀释至0.14 mol/L时,使DNA析出。
1.(2009年高考江苏卷)下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的有(多选)( )
A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞
B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质
C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的DNA
D.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化
解析:选BD。提取动物细胞中的DNA才要用蒸馏水涨破细胞,提取蛋白质要用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂;蛋白质提取和分离过程中进行透析可除去相对分子质量较小的杂质,而将大分子保留在袋内。故A、C项错误。
10.(2008年高考宁夏卷)根据从胡萝卜中提取胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质,回答下列问题。
(1)胡萝卜素是__________色结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素,常用__________作为溶剂,原因是____________________。
(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是______法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是:粉碎、干燥、______、____________。
(3)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中,应严格将______和______控制在一定范围内,原因是__________________。
(4)提取的胡萝卜素可通过______法进行鉴定,在鉴定过程中需要用______对照。
(5)一般情况下,提取胡萝卜素时,提取效率与原料颗粒的含水量成______比。
解析:解答该题应先回忆胡萝卜素的物理性质、萃取过程及注意事项,再逐题回答。
(1)胡萝卜素为橘(橙)黄色结晶,是一种脂质物质,常用有机溶剂进行提取。
(2)(3)(5)提取胡萝卜素常用的方法为萃取法,其主要步骤包括粉碎、干燥、萃取、过滤、浓缩等。在干燥时要控制好温度和时间,因为温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解,干燥的目的是提高提取效率,因为提取效率与原料颗粒的含水量成反比。
(4)鉴定胡萝卜素可用纸层析法,在鉴定过程中需要用标准样品进行对照。
答案:(1)橘(橙)黄 亲脂性有机溶剂(或有机溶剂)
胡萝卜素是脂质物质
(2)萃取 萃取 过滤 浓缩
(3)温度 时间 温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解
(4)纸层析 标准样品 (5)反
9.如图为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图,请据图回答下列问题。
(1)胡萝卜素粗品鉴定的方法名称是________。
(2)图中②的名称是________。
①的作用是______________________
_________________________________。
(3)⑤为________,对于⑤实验时应注意_________________。
(4)⑥为________,常用________。
(5)如果层析液没及⑤会导致_____________________________。
解析:胡萝卜素粗品的鉴定常用纸层析法,在该法中,需注意:(1)点样要快速细致并保持滤纸干燥;(2)要保持层析容器中有层析液的饱和蒸气,以保证层析效果;(3)层析液不可没及样品原点,以免色素溶解于层析液中,使鉴定失败。
答案:(1)纸层析法
(2)色谱容器 防止层析液挥发
(3)样品原点 点样应该快速细致并保持滤纸干燥
(4)溶剂 石油醚
(5)胡萝卜素溶解在层析液中,导致鉴定失败
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