8．发酵法生产酒精后的废液(pH 4.3)含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图如下：

请据图分析回答问题：

(1)实验过程中培养白地霉的培养基是　　，培养基定量分装前，先调节　　，分装后用棉塞封瓶口，最后　　处理。

(2)图中①过程称为　　，从甲到丁的培养过程是为了　　。白地霉的代谢类型为　　。

(3)为确定菌体产量，图中②操作之前，应先称量　　的质量。过滤后需反复烘干称量，直至　　。所获菌体干重等于　　　　　　。

解析：由题中示意图可知，培养白地霉的培养基为废液上清液，含有大量的有机物，棉塞封口可透氧，因此白地霉的代谢类型为异养需氧型。菌体的产量是通过菌体干重体现的，所以过滤后需反复烘干，蒸发掉水分，直至质量基本不变，才能确定为干重，最后求得：菌体干重=恒重时的质量-滤纸质量。

答案：(1)废液上清液　pH　灭菌

(2)接种　扩大培养　异养需氧型

(3)滤纸　恒重(质量基本不变)　恒重时的质量与滤纸质量之差

7．(2008年高考山东卷改编题)科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

(1)分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的______、大小及形状不同，在电场中的______不同而实现分离。

(2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供______和______。

(3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的______，确定该蛋白质的抗菌效果。

(4)细菌培养常用的接种方法有______和______。实验结束后，对使用过的培养基应进行______处理。

解析：(1)电泳法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子的带电情况、大小、形状不同，在电场中的迁移速度不同而实现分离。

(2)在微生物的培养过程中，培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供碳源和氮源。

(3)若抗菌活性蛋白的抗菌效果好，则在培养基中加入该抗菌蛋白后，接种等量的菌液，与未加入抗菌蛋白的培养基相比，菌落数目应该少，否则数目应该相当。

(4)细菌培养接种的常用方法有平板划线法和稀释涂布平板法，在实验结束时，应对使用过的培养基进行灭菌，防止污染环境。

答案：(1)电荷(带电情况)　迁移速度

(2)碳源　氮源　(3)数量

(4)平板划线法　稀释涂布平板法(稀释混合平板法)　灭菌

6．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出(多选)(　)

A．大肠杆菌　 B．霉菌

C．放线菌　 　D．固氮细菌

解析：选DBC。根据题意，固氮细菌的生长不需要从培养基上获得氮源，可在缺乏氮源的培养基上正常生长；加入青霉素的培养基上不能生长细菌和放线菌，则可收获霉菌和酵母菌；加入酚的培养基使细菌和霉菌不能正常生长，而放线菌却能利用酚作原料合成自身的产物。

5．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO₂为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是(　)

A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素

B．碳源物质也是该微生物的能源物质

C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D．水是该微生物的营养要素之一

解析：选B。本题考查微生物的营养要素以及理解应用能力、判断能力。CO₂可为自养型微生物提供碳源，但不能提供能源。

4．(2009年高考江苏卷)加工橘子罐头，采用酸碱处理脱去中果皮(橘络)，会产生严重污染。目前使用酶解法去除橘络，可减少污染。下列生长在特定环境中的4类微生物，可以大量产生所用酶的有(多选)(　)

A．生长在麦麸上的黑曲霉　

B．生长在酸奶中的乳酸菌

C．生长在棉籽壳上的平菇　

D．生长在木屑上的木霉

解析：选ACD。去除橘络的酶为纤维素酶，A、C、D项所列微生物都能利用纤维素，都可产生纤维素酶。B项中的乳酸菌催化乳糖水解为半乳糖，故不产生纤维素酶。

3.(2009年高考全国卷Ⅰ)下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述，错误的是(　)

A．发酵时需不断通入无菌空气，否则会积累乳酸

B．发酵时常采用的培养基为液体天然培养基

C．从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产

D．当菌体生长进入稳定期时，补充营养物可提高谷氨酸产量

解析：选C。通过发酵工程利用谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸，谷氨酸棒状杆菌为好氧性细菌，所以要不断通入无菌空气，A选项正确；其培养基通常用豆饼的水解液、玉米浆、尿素、磷酸氢二钾、硫酸镁、生物素等配制而成的液体天然培养基，B选项正确；当菌体生长进入稳定期时，补充营养有助于延长稳定期，可提高谷氨酸的产量，D选项正确；从自然界分离的野生型菌株产量一般都比较低，不能满足工业生产上的要求，C选项错误。

2．(2009年高考安徽卷)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是(　)

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B．取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24-48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

解析：选D。采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

1．(2009年高考重庆卷)下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是(　)

A．大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是一个环状DNA分子

B．在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源

C．用大肠杆菌工程菌生产干扰素时，应及时添加核酸等生长因子

D．处于对数期的大肠杆菌，常作为生产用的菌种和科研的材料

解析：选D。大肠杆菌是一种细菌，以二分裂的方式进行繁殖；在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用葡萄糖作能源，然后再利用乳糖；利用大肠杆菌作为工程菌生产干扰素时，不需要添加外源生长因子；处于对数期的大肠杆菌细胞代谢最旺盛，常作为生产用的菌种和科研的材料。

10．(2008年高考海南卷)某二倍体植物是杂合体，下图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：

(1)图中①表示的是该花粉培养过程中的　　过程，②表示的是　　过程，X代表的是　　，③表示的是　　过程，④表示的是诱导　　过程。

(2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中　　的种类及其浓度配比，最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为　　植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有　　。

(3)对植株甲进行　　，才能使其结实产生后代(乙)，否则植株甲只有通过　　的方式才能产生后代(丙)。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是　植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为　　种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为　　种。花药培养在育种上的特殊意义是　　，从而开辟育种新途径。

解析：在解题时注意运用植物组织培养的思路，分析培养过程的各个环节。

(1)图示①过程形成愈伤组织，所以应是脱分化过程，②过程形成丛芽，说明是再分化过程，而丛芽经过④过程形成植株，说明是分化生根的过程。另外，愈伤组织在不同的培养基上也可先生根，再分化形成芽，形成完整植株，所以X就是胚状体(主要结构是根)。(2)培养基中所含的激素种类和比例不同，诱导形成的结构不相同。花药细胞含有本物种全套的遗传物质，具有发育的全能性，离体培养成的个体都是单倍体。(3)植物甲为单倍体，只含有配子的染色体组成，是高度不育的，只有其染色体加倍后，才能产生正常的配子，因染色体加倍后形成的是纯合子，每个植物减数分裂只能形成一种基因组成相同的配子，因杂合子植株含有多对等位基因，所以这样的群体产生的配子有许多种。因单倍体育种形成的是纯合子，自交后代不发生性状分离，在育种上可明显地缩短育种年限。

答案：(1)脱分化　再分化　胚状体　分化(或发育)　生根

(2)激素　单倍体　细胞的全能性

(3)染色体加倍(其他合理答案也可)　无性繁殖　乙(或经过染色体加倍的)　一　多　缩短育种年限

9．下图是水稻的花药通过无菌操作，培养产生花粉植株的两种途径的示意图。请据图回答下列问题：

(1)图中的花粉应选自　　　　　　的时期，花药培养成功率最高。图中的A是　　，C过程指　　，B指　　。

(2)这两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于______________

___________________________________________________________。

(3)配制培养基时加琼脂的目的是_________________________。

(4)组织培养要求无菌操作的原因是________________________

_________________________________________________________。

(5)要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有__________和________两类植物激素。

解析：(1)进行花药离体培养，花粉发育时期的选择非常重要，宜选取单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期。

(2)图示两种途径的主要区别在于所使用培养基中激素的种类及浓度比不同。

(3)培养基中加入琼脂可制成固体培养基。

(4)由于微生物会在营养丰富的培养基上快速繁殖，与离体培养的植物组织进行竞争，故培养过程中应“无菌”操作。

(5)植物组织培养过程中，生长素与细胞分裂素的应用对于外植体脱分化、再分化至关重要。

答案：(1)在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧　胚状体　诱导生根　生根

(2)培养基中激素的种类及其浓度配比

(3)使培养基呈固体状态，有利于外植体的生长

(4)如不无菌操作，微生物会在培养基上快速繁殖，与离体培养的植物组织竞争

(5)细胞分裂素　生长素