12．(1)动物细胞培养　胚胎移植　(2)超数排卵　减数第二次分裂中期(MⅡ期)　(3)精子获能　两个极体　 (4)桑椹胚(或囊胚)　胚胎分割

11．(1)(用逆转录等方法进行)人工合成　(2)限制酶Ⅱ　(3)顶体　透明带反应　卵黄膜封闭作用　(4)发情的母牛或用雌激素处理后的母牛　能分泌含人生长激素牛奶的母牛　(5)桑椹胚或囊胚

19．(11分)通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题：

(1)下列所示的黏性末端是由________种限制性核酸内切酶作用产生的。

(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第三步，即　　　　。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA合成仪用化学方法直接　　　　。

(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合，目前经常使用的载体是　　　　。

(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是　　　　；其次还要检测　　　　，方法同样是采用分子杂交技术；最后检测　　　　，方法是　　杂交。

(5)人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现而与日俱增。有人认为转基因生物不会影响食物安全，你的观点呢？理由是什么？

_________________________________________________________　　　　　　　　　

________________________________________________________　　　　　　　　　 。

答案1．C　2．C　3．B　 4．A　5．B　6．B　7．B　8．A　9．BC　10．BC　

18．(7分)下图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程，请据图回答：

(1)在图1中注射到小鼠体内的物质是　　　。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是　　　　　　。

(2)图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和　　的过程，才能与卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2中囊胚中的　　　　均等分割后进行胚胎移植。

(3)图3中过程①是获得植物细胞　　　的阶段。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是　　　　。

17．(9分)科学家从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1禽流感病毒，用以生产可以预防和治疗禽流感的抗体，下图为单克隆抗体制备过程示意图，图中A-G分别表示生物技术或细胞名称，请回答有关问题：

(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自　　　　　　　

的细胞，C过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是　　　　。

(2)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可能形成3种类型的D细胞，因此需用　　　　　培养基筛选出　　　　　(填特点)的E细胞用于培养。

(3)在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是　　　　。随着细胞分裂次数的增多，就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的　　　　　，需要用胰蛋白酶等处理使细胞从瓶壁上分离下来。

(4)如果将单克隆抗体基因导入奶牛受精卵，再通过早期胚胎培养和　　　　，可获得多头奶牛，从而从乳汁中提取更多的抗体；欲获得活性更强的抗体，可通过　　　　　　技术对基因进行修饰，以实现目的。

16．(8分)科学家设法将生长激素基因导入其它生物体(细胞)内，从而获取大量的生长激素，应用于侏儒症的早期治疗，如下图所示。请据图回答：

(1)过程①采用的方法是　　　，过程②之前需用　　　　处理目的基因和质粒。

(2)过程③需事先对大肠杆菌用　　　　处理，使其处于感受态，接着　　　　　　　　　　　　　完成转化过程。

(3)过程④动物细胞培养中使用的工具酶是　　，与植物组织培养的培养基相比，动物细胞培养液中通常需加入　　　　。

(4)过程⑤一般先将生长激素基因导入奶牛的　　，然后进行　　　，再进行胚胎移植，生下转基因犊牛。

15．(9分)有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：

(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是____________________。

(2)若a、b表示两种植物体细胞，则采用化学法形成c时，一般是用______________作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是_______________　　　 ___，这种育种方法的优点是__________________________。

(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是________________。用________________筛选获得d细胞，然后再经克隆化培养和抗体检测、筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是________________________。

14．(7分)某质粒上有SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。

(1)在构建重组质粒时，应选用　　　　　　 两种限制酶对　　　 进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性。

(2)为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入　　，理由是　　　　

　　　　　。

(3)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用　　　技术，即通过　　和　　两个主要过程最终形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加　　　　　。

13．(10分)国家863计划项目“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白”取得重大进展。目前，已经成功获得经纯化的抗凝血酶Ⅲ蛋白，达到国际先进水平。下面是制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程图：

　(1)根据流程图分析，动物乳腺生物反应器主要利用了____________________________技术、胚胎工程技术和细胞培养技术。

(2)要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情期的某一阶段用____________处理，然后在恰当时期进行____________，收集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是______________________。

(3)过程④需将抗凝血酶Ⅲ基因注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是____________________。

(4)要使人的抗凝血酶Ⅲ基因在山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、________、________、标记基因等部分。在⑤之前要检测早期胚胎细胞是否已经导入抗凝血酶Ⅲ基因，宜采用________________技术。

(5)若要一次获得多只完全相同的转基因崂山奶山羊D，⑤应采用____________________技术。

12．(8分)下面是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答：

(1)方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的生物技术有　　　　　和　　　　　。

(2)用激素处理的目的是使B牛　　　　，从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到　　　　　(时期)才能与精子结合。

(3)A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵细胞结合，完成受精作用，这个过程叫　　　　　。卵子受精的标志是在卵黄膜和透明带的间隙能够观察到　　　　。

(4)生产上常用　　　期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个性状相同的家畜个体，可以使用　　　　技术。