5．(2010·南京二模)在下列各项实验操作中，加清水或蒸馏水的主要原理与其他项不同的是(　)

A．在DNA粗提取时第一次加入蒸馏水

B．在DNA粗提取时第二次加入蒸馏水

C．制备细胞膜时在红细胞液中加入蒸馏水

D．在已质壁分离的细胞一侧加入清水

解析：在DNA粗提取时，第一次加蒸馏水的目的是让细胞吸水胀破，使其中的DNA释放出来；制备细胞膜时加蒸馏水的目的是让细胞吸水胀破，释放出细胞内的物质，留下细胞膜；在已经质壁分离的细胞一侧加清水的目的是让细胞渗透吸水而发生质壁分离复原。上述三项加蒸馏水或清水，都是使细胞吸水。在DNA粗提取中第二次加蒸馏水的目的是稀释NaCl溶液，使DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中析出。

答案：B

4．(2010·湘潭二模)在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰乳浊液和提纯过程中，使用无水Na₂SO₄、NaCl的作用分别是(　)

A．分层、吸水　　　　　　 B．溶解、吸水

C．吸水、分层　 　　　　　　　　　　　　　　 D．分层、萃取

解析：在制取玫瑰乳浊液过程中，加入无水Na₂SO₄的作用是除水；在提纯过程中，加入NaCl的作用是分离油层。

答案：C

3．(2010·湘潭二模)有关稀释涂布平板法的叙述错误的是(　)

A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释

B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面

C．其核心是防止杂菌污染，保证培养液的纯度

D．结果都是在培养基表面由单个细胞形成单个的菌落

解析：在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个的菌落。

答案：D

2．(2010·湘潭二模)下列关于果醋制作的说法正确的是(　)

A．醋酸菌是好氧菌，在制作过程中要一直打开发酵瓶

B．在制作葡萄醋的过程中，温度应严格控制在18-25℃

C．当糖源不足时，醋酸菌先将酒精转变成乙醛，再将乙醛变为醋酸

D．在糖源和氧气充足时，醋酸菌能将葡萄糖分解成乙醇和二氧化碳

解析：当氧气、糖源充足时，醋酸菌能将葡萄汁中的葡萄糖分解为醋酸；在果醋制作过程中不宜一直打开发酵瓶，以防止污染；在果醋发酵过程中，温度应严格控制在30-35℃。

答案：C

1．(2010·湘潭二模)关于灭菌和消毒的理解不正确的是(　)

A．灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子

B．消毒和灭菌实质是相同的

C．接种环用灼烧法灭菌

D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等

解析：灭菌是指杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

答案：A

21．(2010·临沂模拟)(10分)下图是“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程(已知两种植物均为二倍体)。请据图回答有关问题：

(1)②过程所用的化学试剂为________。

(2)由杂种细胞形成杂种植株的原理是________________________________________________________________________。

这种育种方法的优点是________________________________________________________________________。

(3)某同学提出，用上图所示方法不能获得纯种，若用白菜和甘蓝的花粉细胞代替图中的体细胞，再采用上图所示的过程即可获得纯种。该同学的方案中有缺陷，请对该方案加以完善：________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)在上图④⑤阶段所用培养基中含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系：

①当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时，未分化细胞群经分裂形成________；

②当植物激素X与植物激素Y的浓度比________时，未分化细胞群分化形成芽；

③当植物激素X与植物激素Y的浓度比________时，未分化细胞群分化形成根。

(5)图中将杂种细胞培育成杂种植株用到了植物的组织培养技术，请列举该技术在作物新品种培育方面的另一用途：________________________________________________________________________。

答案：(1)聚乙二醇(PEG)　(2)植物细胞的全能性　克服了远源杂交不亲和的障碍　(3)应该对得到的白菜-甘蓝幼苗用秋水仙素处理后再筛选　(4)①愈伤组织　②大于1　③小于1　(5)单倍体育种或突变体的利用(体细胞诱变育种)

20．(2010·福建八中测试)(10分)新华网报道，美国研究人员2009年8月24日宣布，他们利用人体皮肤细胞培育诱导多功能干细胞(iPS)，并成功分化出了不同类型的视网膜细胞。这意味着将来视网膜受损的患者可以利用自身皮肤细胞进行修复。请回答：

(1)iPS细胞具有全能性的根本原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

iPS细胞能分化出不同类型的视网膜细胞的实质是

________________________________________________________________________。

(2)根据iPS细胞的这种功能特性，当我们身体的某一类细胞功能出现异常或退化时，利用iPS细胞的治疗思路是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)在培养胚胎干细胞时，需向培养液中加入95%的空气和5%的CO₂的混合气体，其中CO₂的作用是维持培养液的________。

(4)囊胚时，胚胎细胞开始出现分化，有些细胞个体较小 ，将来只能发育成胎膜或胎盘，这类细胞称为________。如果想通过代孕小鼠产生视网膜组织，应将iPS细胞注射到小鼠囊胚的________部位，以伴随其发育成某种组织。

(5)将囊胚移入代孕小鼠体内属于________技术，此技术对代孕受体的要求是________________________________________________________________________。

在畜牧生产中采用这种技术的优势主要是______________________________________，若要进一步提高胚胎的利用率，可采用________技术。

答案：(1)iPS细胞中具有一整套的遗传信息　基因的选择性表达　(2)通过诱导iPS细胞定向分化来及时修补　(3)pH　(4)滋养层细胞　内细胞团　(5)胚胎移植　同种、生理状态相同的其他雌性动物　可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力　胚胎分割

19．(2010·南通三模)(10分)2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

　(1)④过程应用的主要生物技术是____________________________________________。

(2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构设计并人工合成的，这属于________工程技术范畴。

(3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(显示部分基因及部分限制性内切酶作用位点)，据图分析：

①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入__________________________。

②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的________(基因)，保证T－DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于________；第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。

③若用限制酶Ⅱ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是：_______________________________________________________。

(4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是________。

答案：(1)植物组织培养　(2)蛋白质　(3)①启动子　②Let和tmr　目的基因(或外源DNA)准确插入　③在含卡那霉素的培养基中能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长　(4)GACGTC

18．(2010·南通二模)(10分)下图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所做的一系列研究，请据图分析回答：

(1)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于用γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的________，加入抗生素是为了________，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。

(2)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有________的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是________。

(3)过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是________，将获得的目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，其目的是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须用X射线照射去除胸腺的小鼠，获得免疫缺陷小鼠，其目的是

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________，

该过程研究的意义在于解决______________________________________问题。

答案：(1)营养物质　防止杂菌污染

(2)发育的全能性　原肠胚

(3)显微注射法　使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代，同时，使目的基因能够发挥作用

(4)去除胸腺，使其不能形成T细胞，不发生细胞免疫，使移植的组织细胞不会被排斥　临床上供体器官不足和器官移植后免疫排斥等

17．(2010·镇江模拟)(12分)日本的下村修、美国的沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景。请据图回答相关问题：

(1)图中形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。如果限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。在DNA连接酶和上述两种不同限制酶的作用下，能否将质粒和目的基因连接起来？理由是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(2)在②过程进行转基因体细胞的筛选时，比较简易的筛选方法是通过设备检测，发出绿色荧光的细胞即为转基因体细胞。绿色荧光蛋白在转基因体细胞的________中合成，写出这一过程包含的信息传递图解：________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)在③过程培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和________等。

(4)在核移植过程中，供体细胞一般选用传代到________代以内的转基因体细胞，原因是________________________________________________________________________。

乙兔提供的细胞应是________________________________________________________________________。

(5)钱永健通过改变氨基酸排序，造出能吸收、发出不同颜色光的荧光蛋白，并能让它们发光更久、更强烈。对荧光蛋白的改造属于________工程。

答案：(1)可以连接。由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同(或可以互补)

(2)核糖体　GFP基因mRNA绿色荧光蛋白

(3)动物血清或血浆

(4)10　能保持细胞正常的二倍体核型　(次级)卵母细胞

(5)蛋白质