光学显微镜是生物科学研究的重要工具之一，下列各项研究中应用到光学显微镜的是

1. A.
   孟德尔发现遗传学的两个定律
2. B.
   恩格尔曼证明水绵细胞中O₂由叶绿体在光下释放
3. C.
   萨姆纳证明脲酶的化学成分是蛋白质
4. D.
   赫尔希和蔡斯证明噬菌体的遗传物质是DNA

（09南充市适考）（共23分）

Ⅰ.玉米、高粱等C₄植物的光合效率较水稻、小麦等C₃植物的高。磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）在其中起了很大的作用。C₄植物光合系统有浓缩CO₂、增加局部CO₂浓度的机制，这样在CO₂浓度低时也能使光合作用接近饱和，从而大大提高光合作用效率。因此，如何将C₄植物的这一机制转移到水稻等C₃植物上一直是植物生理学家的研究课题之一。但实践证明，常规杂交育种手段很难如愿以偿。最近，有人利用土壤农杆菌介导法，将完整的玉米的PEPC基因导入到了C₃植物水稻的基因组中，为快速改良水稻等C₃植物的光合作用效率，提高粮食作物产量开辟了新途径。

（1）玉米和水稻很难利用常规杂交手段杂交的原因是_________________________。

（2）磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶在玉米叶片中的_________细胞里发挥作用，使CO₂转化为C₄化合物。

（3）若你是科研人员，你最好采用_______________________途径从玉米中获得PEPC基因。获得PEPC基因后，将其导入土壤农杆菌的质粒中，以获得重组质粒，需要的两种工具酶是___________________________。PEPC基因在水稻细胞中成功表达的标志是_________________________。得到PEPC基因成功表达的水稻细胞后，常采用____________技术获得转基因水稻植株，该技术所依据的原理是___________________________。

(4)经过黑暗处理的玉米植株，经较强阳光照射过的叶片脱色后，用碘液染色，利用这张叶片制作临时切片，放在显微镜下观察，可以观察到的现象是____________________________，因此确定玉米为C₄植物。鉴别植物是C₃还是C₄植物的简便方法还有_____________________。

Ⅱ.酵母菌是与人类密切相关的微生物。

（1）用酵母菌制啤酒时，为保证获得较多的酒精，生产上，必须首先通气，使其___________，一定时间后再密封，常用___________的方法延长积累酒精最多的时期。

（2）现有酵母菌、金黄色葡萄球菌、硝化细菌、圆褐固氮菌和乳酸菌混合在一起的液体。为将酵母菌从混合菌中分离出来，所用的固体培养基中应滴加适量的______________。

（3）下图为酵母菌中控制丙酮酸羧化酶合成的基因与其mRNA杂交的示意图。图中的______链是该基因转录时的模板链；该基因编码区中不能编码的序列是__________（填写图中序号）。

玉米、高粱等植物的光合效率较水稻、小麦等植物的商。磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PFPC）在其中起了很大的作用。植物光合系统有浓缩、增加局部浓度的机制，这样在浓度低时也能使光合作用接近饱和，从而大大提高光合作用效率。因此，如何将植物的这一机制转移到水稻等植物上一直是植物生理学家的研究课题之一。但实践证明，常规杂交育种手段很难如愿以偿。最近，有人利用土壤农杆菌介导法，将完整的玉米的PEPC基因导入到了植物水稻的基因组中，为快速改良水稻等植物的光合作用效率，提高粮食作物产量开辟了新途径。

（1）玉米和水稻很难利用常规杂交手段杂交的原因是_______________________。

（2）磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶在玉米叶片中的_________细胞里发挥作用，使转化为化合物。

（3）若你是科研人员，你最好采用——途径从玉米中获得PEPC基因。获得PEPC基因后，将其导入土壤农杆菌的质粒中，以获得重组质粒，需要的两种工具酶是             。PEPC基因在水稻细胞中成功表达的标志是           得到PEPC基因成功表达的水稻细胞后，常采用_________________________技术获得转基因水稻植株，该技术所依据的原理是_______________________。

（4）经过黑暗处理的玉米植株，经较强阳光照射过的叶片脱色后，用碘液染色，利用这张叶片制作临时切片，放在显微镜下观察，可以观察到的现象是________________，因此确定玉米为植物。鉴别植物是还是植物的简便方法还有__________________。