(10分）研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂一内皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法，请分析回答下列问题：

(1) 从肝细胞中分离总RNA，经_________获得cDNA，之后经过_________扩增内皮抑素基因。

(2) 扩增的目的基因与PUC18质粒（如图14所示）都用EcoR I和BamH I进行双酶切，然后用DNA连接酶进行连接，构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接，还减少了________的连接，提高了重组质粒的比例。

(3) 大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。

选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入_______物质。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成______________颜色的菌落，原因是_____________________。之所以选择大肠杆菌作为基因工程的受体菌，其突出的优点是：___________________________________

(4) 从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养，获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板，37⁰C培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中，72h后在显微镜下观察细胞存活情况并，______________实验结果如下表所示。

结果说明__________________________________________

(10分）研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂一内皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法，请分析回答下列问题：

(1) 从肝细胞中分离总RNA，经_________获得cDNA，之后经过_________扩增内皮抑素基因。
(2) 扩增的目的基因与PUC18质粒（如图14所示）都用EcoRI和BamH I进行双酶切，然后用DNA连接酶进行连接，构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接，还减少了________的连接，提高了重组质粒的比例。
(3) 大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。
选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入_______物质。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成______________颜色的菌落，原因是_____________________。之所以选择大肠杆菌作为基因工程的受体菌，其突出的优点是：___________________________________
(4) 从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养，获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板，37⁰C培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中，72h后在显微镜下观察细胞存活情况并，______________实验结果如下表所示。

结果说明__________________________________________

甲状腺激素是人体内调节生命活动的重要物质，请分析回答相关问题：

（1）下图为甲状腺激素作用机制图解。由图推测，甲状腺激素的受体位于        内，其直接调节的是    过程。当人体处于寒冷环境时，图中功能蛋白质的最终生物效应是             ，使产热增加。

（2）甲状腺的生理活动直接受                  激素的影响；而当甲状腺激素含量偏高时，会抑制     的活动，该过程充分体现了生命活动的反馈调节机制。

（3）取甲状腺腺瘤组织，经             酶处理，制成细胞悬浮液，培养48小时。再换取含不同浓度肾上腺素、去甲肾上腺素的试验液，培养48小时。最后检测细胞的生长功能（吸光值的大小与细胞数量成正比）。结果如下图所示。

该实验的目的是探究                               对甲状腺细胞生长的影响。结果表明，在不同浓度的肾上腺素作用下，甲状腺细胞             （不增殖、增殖被抑制、正常增殖、加速增殖），而去甲肾上腺素浓度对甲状腺细胞生长功能的影响是                               。

甲状腺激素是人体内调节生命活动的重要物质，请分析回答相关问题：

（1）下图为甲状腺激素作用机制图解。由图推测，甲状腺激素的受体位于_________________内，其直接调节的是_________________过程。当人体处于寒冷环境时，图中功能蛋白质的最终生物效应是_________________，使产热增加。

（2）甲状腺的生理活动直接受_____________________激素的影响；而当甲状腺激素含量偏高时，会抑制_________________的活动，该过程充分体现了生命活动的反馈调节机制。

(3)取甲状腺腺瘤组织，经_________________酶处理，制成细胞悬浮液，培养48小时。再换取含不同浓度肾上腺素、去甲肾上腺素的试验液，培养48小时。最后检测细胞的生长功能(吸光值的大小与细胞数量成正比)。结果如下图所示。

该实验的目的是探究___________________________________________________对甲状腺细胞生长的影响。结果表明，在不同浓度的肾上腺素作用下，甲状腺细胞_________________(不增殖、增殖被抑制、正常增殖、加速增殖)，而去甲肾上腺素浓度对甲状腺细胞生长功能的影响是___________________________________________________。

回答下列题

I．日光中的紫外线B波段( UV-B)大部分被臭氧层吸收，臭氧层减薄会导致照射到地表的UV-B辐射增加。小球藻是一种单细胞藻类，是鱼类等海洋生物的饵料，其生长状况受紫外线辐射量的影响。下面是研究UV-B辐射影响小球藻生长的实验。

一、材料用具：含小球藻的培养液、紫外灯（产生UV-B）、培养箱、培养皿、固定液、显微镜等。

二、实验步骤：

（1）取6个培养皿，编号为A₀、A_l、…A₅，分别加入         的含小球藻的培养液。

（2）将A₀~ A₅分别置于紫外灯下，给予         的辐射剂量照射后，放人同一培

养箱，在适宜的条件下培养。

（3）-段时间后，取出A₀~ A₅，吸取样品，固定后观察计数并记录。

三、实验结果：

通过相应公式计算，得出A₀~ A₅中的小球藻的相对增长率分别是a₀~ a₅，结果如图。在实验所用的辐射剂量中，能抑制小球藻生长的剂量有         一个。

四、实验讨论：

（1）A₀在实验中的作用是         。该实验还应设置平行实验组B₀~ B₅，同时进

    行重复实验求平均值，其目的是         。

（2）将A₀中的小球藻培养一段时间后，种群密度维持在8×10⁶个/ml，则A₀中的

小球藻增长最快时，种群密度约为         。

（3）科学家还发现高剂量的UV-B辐射对其他海藻的生长也有抑制作用，认为这可能导致海洋生态系统生物总量减少。请从能量流动的角度，简要分析原因：

                                                                          。

Ⅱ．请回答下列与甲状腺相关的问题：

（1）甲状腺的腺泡细胞中碘离子浓度比血浆中的高20 ~25倍，此现象被称为“聚碘作用”。如用药物抑制ATP水解酶的活性，聚碘作用会立即被抑制。这说明腺泡细胞吸收碘离子的方式为         ，其聚碘能力的大小与细胞膜上的         有关。

（2）甲状腺激素是由一种球蛋白与碘结合后，逐渐转变形成的氨基酸衍生物。这种球蛋白由腺泡细胞的         （填细胞器名称）合成。

（3）甲状腺激素可以促进靶细胞合成ATP水解酶，从而影响细胞代谢。ATP水解酶催化的反应           （写反应式）。当甲状腺激素分泌增加时，细胞耗氧量将会           。