题目列表(包括答案和解析)
为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
(1)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为________个和________个。
(2)根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。
(3)已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有;数个BamH Ⅰ和BglU识别序列的DNA分子进行:反复的切割.连接操作,若干循环后和________序列明显增多。
在药品生产中,人们逐步利用基因工程技术生产出如干扰素,白细胞介素,凝血因子等各种高质量低成本的药品,请分析回答:
(1)在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中,一般要用到的工具酶是限制酶和____________,其中限制酶切割的是_________键
(2)将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后,能在细菌细胞内直接合成“某激素”,则该激素在细菌体内的合成包括_________和_________两个阶段。
(3)基因工程形成工程菌的遗传学原理是_____________。
(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定,其中分子水平的检测又分三步:首先要检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因,采用技术是 ;其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是 ;最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是 。
(5)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对) | 第一步水解 | 产物 (单位bp) | 第二步水解 | 产物 (单位bp) |
A酶切割 | 1900 | 将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 | 1700 200 | |
1500 | 800 700 | |||
1600 | 1100 500 |
由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。
绿色荧光蛋白GFP能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:
(1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—,在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点,在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来__________,理由是: ___________________________________________。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多的方法是______________________。
(3)获得转基因猪的关键步骤是_____(填序号),GFP基因的作用是作为_______。抑制小猪抗原表达的基因要插入到启动子和_________之间。获得的转基因克隆猪,可以解决的医学难题是可以避免 _____________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:_____________________(用数字表示)。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白。
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2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:
注:图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
(1)在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?并说出理由:________。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多的方法是________。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是________。获得的转基因克隆猪,可以通过对抗原表达基因的改造从而解决的医学难题是:可以避免________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:________(用数字表示)。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白。
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