解析:由限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的识别序列和切点可知.限制酶Ⅰ可以识别并切割限制酶Ⅱ的位点.而限制酶Ⅱ则不能识别并切割限制酶Ⅰ的位点.故质粒用限制酶Ⅱ切割.保留四环素抗性基因.目的基因用限制酶Ⅰ切割.①为构建目的基因载体的过程.该过程在体外进行.大肠杆菌导入重组质粒后.含有正常的四环素抗性基因.将其涂布在含有四环素的选择培养基上.它能够正常生长.将目的基因导入大肠杆菌后目的基因可在大肠杆菌体内大量复制.根细胞中含有发育成完整个体所需的全套遗传物质.故通过植物组织培养技术可将根细胞培养成一个完整植株. 答案:(1)Ⅱ Ⅰ(Ⅰ和Ⅱ) 体外 (2)四环素 选择 (3)大量复制目的基因 (4)植物组织培养 发育成完整个体所需的全套遗传物质 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

(1)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为________个和________个。

(2)根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

(3)已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有;数个BamH Ⅰ和BglU识别序列的DNA分子进行:反复的切割.连接操作,若干循环后和________序列明显增多。

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在药品生产中,人们逐步利用基因工程技术生产出如干扰素,白细胞介素,凝血因子等各种高质量低成本的药品,请分析回答:

(1)在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中,一般要用到的工具酶是限制酶和____________,其中限制酶切割的是_________键

(2)将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后,能在细菌细胞内直接合成“某激素”,则该激素在细菌体内的合成包括_________和_________两个阶段。

(3)基因工程形成工程菌的遗传学原理是_____________。

(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定,其中分子水平的检测又分三步:首先要检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因,采用技术是            ;其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是            ;最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是             

(5)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对)

第一步水解

产物

(单位bp)

第二步水解

产物

(单位bp)

A酶切割

1900

将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割

1700  200

1500

800  700

1600

   1100 500

由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。

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绿色荧光蛋白GFP能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:

(1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—GGATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—GATC—,在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点,在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来__________,理由是: ___________________________________________

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多的方法是______________________

(3)获得转基因猪的关键步骤是_____(填序号),GFP基因的作用是作为_______。抑制小猪抗原表达的基因要插入到启动子和_________之间。获得的转基因克隆猪,可以解决的医学难题是可以避免     _____________________

(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:_____________________(用数字表示)。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)  

④表达出蓝色荧光蛋白。

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  在2004年12月26日发生的印度洋地震海啸灾难中,死亡人数已达到15万,为了帮助辨别遇难者身份,我国政府派出了DNA鉴定专家组到泰国为遇难遗体做法医病理检验。下列是一组法医检验DNA时常用到的生物技术或物质:

  (1)PCR技术是把某一DNA片段在体外酶的作用下,合成许多相同片段的一种方法,利用它能迅速而特异的扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段;

  (2)限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切,不同的限制性内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切以选择目的基因或DNA片段;

  (3)电泳技术则是在外电场作用下,利用分子携带电荷不同,把待测分子的混合物放在一定介质(如琼脂糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术,利用它能分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质,也可用作亲子法学鉴定。

请阅读上述内容并回答下列问题:

(1)

PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,是依据什么原理?________;利用PCR技术扩增DNA片段时用到的“体外酶”通常是指什么酶?________

(2)

电泳过程中分子的迁移率除与本身所带电荷的多少有关以外,你认为还受什么因素影响?(至少列出一种)________

(3)

如果将含有2条多肽链共48个氨基酸的蛋白质进行彻底的水解,然后再将得到的氨基酸混合物进行电泳,结果如下图1所示。则可推知该蛋白质由________种氨基酸构成,该蛋白质水解时需要的水分子数是________

(4)

由于每个人的DNA条带(经电泳后)分布图是独一无二的,因此“DNA指纹法”可帮助进行亲子鉴定或帮助司法部门进行案件侦破。如果取某小孩和其母亲、以及另外四位待测男性的DNA,经合适的酶处理以后得到若干DNA片段,再经电泳以后得到“DNA指纹图谱”如上图2所示,请分析:四位男性中谁最可能是该小孩的生物学父亲?________

(5)

现以3种不同的限制性内切酶对6.2 kb大小的线状DNA进行剪切后,用凝胶电泳分离各DNA片段,实验结果图3所示。请问:3种不同的限制性内切酶在此DNA片段上相应切点的位置是________。(请从下列各项中选择)

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2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:

注:图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-GGATCC-,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-GATC-。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

(1)在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?并说出理由:________

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多的方法是________

(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是________。获得的转基因克隆猪,可以通过对抗原表达基因的改造从而解决的医学难题是:可以避免________

(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:________(用数字表示)。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)

④表达出蓝色荧光蛋白。

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