30．【生物—选修1生物技术实践】（15分）

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量金黄色葡萄球菌，培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的数量，可确定该蛋白质的抗菌效果。

（1）抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供______________。灭菌与调节pH的先后顺序是_______________________。抗菌蛋白需在灭菌_____（填“前”或“后”）加入。

（2）对新配制的培养基灭菌时所用的设备是________________________。实验前需对超净工作台进行__________处理。

（3）该实验接种金黄色葡萄球菌的方法是_____________________。

（4）实验中的自变量和因变量分别是_________________________。

（5）有人认为抗菌蛋白本身具有极强的抗菌能力，因此，该实验操作不需要在无菌条件下进行。请你谈谈自己的观点，并简要说明理由________________________________。

30．【生物—选修1生物技术实践】（15分）

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量金黄色葡萄球菌，培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的数量，可确定该蛋白质的抗菌效果。

（1）抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供______________。灭菌与调节pH的先后顺序是_______________________。抗菌蛋白需在灭菌_____（填“前”或“后”）加入。

（2）对新配制的培养基灭菌时所用的设备是________________________。实验前需对超净工作台进行__________处理。

（3）该实验接种金黄色葡萄球菌的方法是_____________________。

（4）实验中的自变量和因变量分别是_________________________。

（5）有人认为抗菌蛋白本身具有极强的抗菌能力，因此，该实验操作不需要在无菌条件下进行。请你谈谈自己的观点，并简要说明理由________________________________。

【生物技术实践-选修1】（15分）回答与酵母菌相关的生物技术问题：

（1）用葡萄酿制果酒时，不可过度清洗葡萄，原因是         。发酵装置如图，葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，其目的是           。若阀a、b一直打开，最后的发酵产物是      （果酒/果醋）。若想得到另外一种发酵产物，阀a、b的正确操作应为           。

（2）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌培养一段时间后，接受紫外线照射进行诱变处理。

步骤2：制备选择培养基：在基本培养基的基础上，注意添加           和调低pH，加琼脂后灭菌，制成固体平板。  

步骤3：将诱变处理后的菌液稀释涂布平板。 

步骤4：根据           选出突变菌。

（3）上述步骤2、3的目的分别是              和                 。

（4）植物秸秆的主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌却无法直接利用，原因是                      。若要酵母菌能利用植物秸秆进行发酵制取酒精，请提出解决该问题的方法                           。(列举两种方法) 

[生物一一一选修3：现代生物科技专题]（15分）

绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和鲴织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶足③过程需要的酶是____．

（2）④过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。

（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用__________技术进行检测。

（4）图中猪的卵母细胞应处于________期，此时在显微镜下可观察到在卵黄膜和透明带之间有__________个极体。用于核移植的导入了基因表达载体的猪胎儿成纤维细胞一般都选用传代10代以内的细胞的原因是__________。

（5）由重组细胞培育得到绿色荧光转基因克隆猪过程中涉及到的现代生物技术手段有__________，生殖方式为__________。

（6）假如该过程得到了一个早期胚胎，为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法，分割时应选择__________或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意__________。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用__________处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。

【现代生物科技专题——选修3】（15分）“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P⁵³基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P⁵³蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。请回答下列问题：

（1）在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的                。检测P⁵³基因的表达产物，还可以采用         技术。

（2）如果要获取人类基因组中抑癌基因P⁵³，可以采取的方法通常包括        和通过化学方法人工合成。目的基因的大量扩增则可以采用         ，该技术中需使用的一种特殊的酶是      。

（3）在研究中如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎于细胞可来源于囊胚期的      _，或胎儿的原始性腺，也可以通过        技术得到重组细胞后在进行相应处理获得。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是           。