[生物-现代生物科技专题]必答题 Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图: (1)步骤①中.在核移植前应去除卵母细胞的 . (2)步骤②中.重组胚胎培养到 期时.可从其内细胞团分离出ES细胞. (3)步骤③中.需要构建含有基因Rag2的表达载体.可以根据Rag2基因的 设计引物.利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体.所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点. (4)为检测Rag2基因的表达情况.可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 .用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验. [答案] (1)细胞核 (2)囊胚 (3)核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ (4)蛋白质 [解析](1)步骤①是核移植过程.体细胞核移植前要除去受体卵母细胞的细胞核.原因是若不去掉卵母细胞的细胞核.就会造成细胞里面就有两个细胞核.使得遗传物质是不稳定的. (2)ES细胞是由早期胚胎的内细胞团分离出来的一类细胞. (3)步骤③过程是导入目的基因--Rag2基因于ES细胞中的基因表达载体的构建过程.在生物体外可通过PCR技术扩增目的基因.其条件是模板DNA.Rag2基因的核苷酸序列设计引物.四种脱氧核苷酸.热稳定DNA聚合酶等.另外根据题干可知.获得Rag2目的基因需要用 HindⅢ和PstⅠ两种限制酶.所以在构建表达载体时.所选择的表达载体上应具有HindⅢ和PstⅠ酶的酶切位点. (4)检测目的基因是否翻译相应蛋白质时.应采用抗原-抗体杂交法.即提取蛋白质.用相应的抗体进行抗体-抗原杂交.看是否有杂交带 专题4生物技术的安全和伦理问题 查看更多

 

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(2013福建卷)33. [生物-现代生物科技专题]必答题(10分)

克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。

请回答:

(1)  图中重组细胞的细胞核来自            细胞,早期胚胎移入受体子宫后继续发育,经桑椹胚、囊胚和          胚最终发育为克隆猪。

(2)  在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2 cDNA的分子数,进而计算总mRNA中Bcl-2 mRNA的分子数,从而反映出Bcl-2基因的转录水平。

①图中X表示              过程。

②从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA的核苷酸序列,以便根据这一序列设计合成        用于PCR扩增,PCR扩增过程第一轮循环的模板是             

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(10福建卷)高中生物选修3—— [生物—现代生物科技专题](10分)

红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)期间要生产流程如右图

(1)图中①所指的是          技术。

(2)图中②所指的物质是                   ,③所指的物质是                  

(3)培养重组CHO 细胞时,为便于清除代谢产物,防止细胞产物积累对细胞自身造成危害,应定期更换                 

(4)检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的               细胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成

 

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(10福建卷)高中生物选修3—— [生物—现代生物科技专题]

红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)期间要生产流程如右图

(1)图中①所指的是          技术。O

(2)图中②所指的物质是                   ,③所指的物质是                  

(3)培养重组CHO 细胞时,为便于清除代谢产物,防止细胞产物积累对细胞自身造成危害,应定期更换                

(4)检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的               细胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成

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(10福建卷)高中生物选修3—— [生物—现代生物科技专题]

红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)期间要生产流程如右图

(1)图中①所指的是          技术。O

(2)图中②所指的物质是                   ,③所指的物质是                  

(3)培养重组CHO 细胞时,为便于清除代谢产物,防止细胞产物积累对细胞自身造成危害,应定期更换                

(4)检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的               细胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成

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同步练习册答案